目的 探索HEK293报告基因法（reporter gene assay，RGA）检测3个厂家贝伐珠单克隆抗体（单抗）产品的可行性。方法 采用RGA分别检测3个厂家贝伐珠单抗产品的生物学活性，并对该方法的线性、准确度、精密度进行验证，探索胎牛血清浓度、细胞铺板密度、细胞培养代次对RGA检测结果的影响。结果 RGA检测3个厂家贝伐珠单抗产品绘制的四参数曲线显示，厂家-2信噪比高，厂家-2和厂家-3拟合度好；理论相对效价为50%~150%时，相对效价的理论对数值与其效价测定值呈现良好的线性关系；3个厂家产品的回收率均在70%~130%之间，相对标准偏差均＜20%；胎牛血清浓度为5%和10%，细胞铺板密度在0.6×10⁵、0.9×10⁵和1.2×10⁵个/孔，细胞代次8、16、23代时，活性测定拟合曲线较好。结论 RGA能实现对3个厂家贝伐珠单抗产品的生物活性检测，虽然方法的线性、准确度、精密度良好，但胎牛血清浓度、细胞铺板密度及细胞代次对RGA检测结果有一定影响。

目的 对靶向唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15（sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin 15, Siglec-15）的全人源单克隆抗体23F4进行关键结合位点鉴定和生物学功能的初步评价。方法 对Siglec-15进行丙氨酸扫描突变，鉴定23F4的关键结合位点，再通过ELISA和流式细胞术对23F4的体外生物学功能进行探究，最后构建2种小鼠肿瘤模型以评价23F4的体内抗肿瘤功能。结果 鉴定得到23F4的关键结合位点（R71/H72残基）。在体外检测中23F4具有较高的结合活性，半数效应浓度为68.42 ng/mL，在中、低浓度下与Siglec-15阳性细胞的结合活性优于对照抗体，并且23F4能够阻断Siglec-15与受体的结合，解除T细胞的增殖抑制，在2种小鼠肿瘤模型中均具有抑制肿瘤生长的功能。结论 靶向Siglec-15的单克隆抗体23F4具有新型结合位点，能够解除Siglec-15介导的免疫抑制。

目的 评价阿达木单抗注射液的运输稳定性。方法 以武汉市至哈尔滨市作为公路运输起止点，进行1次往返运输，模拟药品运输过程的最差条件，以考察非温度因素条件下的药品稳定性。以极端温度及温度循环等破坏性试验来模拟药品脱冷链后的情况，通过检测阿达木单抗注射液常规质量检定项目考察药品温度偏移稳定性。结果 运输后3批次药品内包材均完整，破瓶率为0%，所有检测项目均符合企业标准，药品运输前后差异无统计学意义(t=﹣3.23~4.00,P=0.057~0.840)。3批次药品分别在(40±2) ℃、(﹣20±5) ℃条件下放置7 d后所有检测项目均符合企业标准。其中药品在(40±2) ℃条件下放置7 d后，分子排阻色谱法测定的单体含量和离子色谱法测定的纯度与2~8 ℃及(﹣20±5) ℃下的差异均有统计学意义(t=﹣142.00~97.00，P=0.000~0.020)。(﹣20±5) ℃条件下放置7 d后，药品所有检定项目与2~8 ℃条件下差异均无统计学意义(t=0.70~3.46，P=0.074~0.556)。3批次药品经过3次冻融后所有检测项目均符合企业标准，与未经冻融试验样品差异无统计学意义(t=﹣4.06~1.73，P=0.056~0.478)。结论 在本实验条件下长途运输非温度因素对药品的质量没有影响，药品在短期内温度偏移对药品的质量影响较小。

目的 建立并验证SIBP-A01单克隆抗体（单抗）中聚山梨酯20（polysorbate 20，PS20）残留量的高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）-蒸发光散射检测器（evaporative light-scattering detector，ELSD）检测方法。方法 应用HPLC-ELSD方法检测SIBP-A01单抗中PS20残留量，并对该方法的专属性、精密度、线性、准确度、定量限和耐用性进行验证。结果 稀释液以及不含PS20的制剂缓冲液无干扰峰；3批单抗供试品重复检测结果、不同人员检测结果、同一实验人员不同时间检测结果的相对标准偏差均< 5%；PS20含量在12.5~100.0 μg/mL范围内时，峰面积对数与含量对数线性关系良好，决定系数为0.996 8；加标回收率在103.5%~109.2%之间；定量限为5.0 μg/mL；当色谱柱温度为（30±3） ℃、供试品于10 ℃放置24 h或使用不同品牌PS20时，检测差<5%。结论 成功建立了SIBP-A01单抗中PS20残留量的HPLC-ELSD检测方法，该方法的专属性、精密度、线性、准确度和耐用性良好。

目的 建立并验证检测阿达木单抗电荷变异体的阳离子交换高效液相色谱法。方法 采用以羧基官能团的弱阳离子为固定相的交换柱（4 mm×250 mm），以0.01 mol/L 磷酸氢二钠溶液、pH 7.5为流动相 A，以0.01 mol/L 磷酸氢二钠+0.5 mol/L 氯化钠溶液、pH 5.5为流动相 B进行梯度洗脱。按面积归一法计算赖氨酸变异体和酸性组分含量，并对该方法进行专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度和耐用性验证。结果 该方法检测阿达木单抗注射液可见溶剂峰和目标峰；重复检测6次各组分相对标准偏差均＜2%；不同实验员、不同实验设备检测各组分的相对标准偏差均＜2%；赖氨酸变异体之间的峰的定量限（信噪比＞10）为100 μg/mL、检测限（信噪比＞3）为30 μg/mL；在企业质量标准限度范围内检测不同浓度各组分线性良好，决定系数均＞0.99；第1酸区峰、赖氨酸变异体之间的峰和赖氨酸变异体2峰准确度回收率均在80%～115%，第2酸区峰、主峰和赖氨酸变异体1峰准确度回收率均在85%～110%；不同流动相pH、不同流动相氯化钠浓度、不同流速与柱温、不同批次色谱柱条件下检测结果符合要求，一致性较好。结论 建立的方法具有良好的专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度和耐用性，适用于阿达木单抗电荷变异体的测定。

近年来，双特异性抗体（双抗）通过提高免疫细胞靶向杀伤能力、阻断多信号通路产生协同作用等方式，在肿瘤免疫治疗领域呈现独特的治疗潜力。全球范围内，目前有＞200种用于抗肿瘤的双抗药物处于临床研究阶段，15种双抗获批用于治疗恶性血液肿瘤或实体瘤。双抗虽在恶性血液肿瘤中的治疗效果较好，但在实体瘤治疗中，如靶点选择、药物递送、安全性以及耐药性等方面仍面临诸多挑战。此文总结了已上市双抗在肿瘤治疗中的临床应用及研究进展，以为双抗药物的研发及临床应用提供参考。

肿瘤基因治疗虽然是非常有前景的方法，但是非细菌载体面临着转化效率低和递送脱靶的问题。使用肿瘤靶向的细菌作为载体是实体瘤基因治疗所倾向采用的策略之一。此文综述了基因修饰双歧杆菌在肿瘤靶向基因治疗中的新进展，包括基因修饰双歧杆菌介导的自杀基因治疗、抗血管增生治疗和肿瘤抑制基因治疗，也是首次对全球肿瘤基因治疗中的获批临床试验方案，特别是细菌载体方案趋势的综述。