2026年, 第49卷, 第4期 刊出日期：2026-08-10
-
全选|
-
-
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 223-229. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20260526-00032目的 在工业放大评估背景下，比较不同预过滤器与除病毒滤器Viresolve® Pro（简称Vpro）串联时对单克隆抗体料液过滤载量和通量衰减行为的影响，并评估新鲜料液与冻融料液条件下不同预过滤方案的工艺表现差异，为生产规模除病毒过滤预过滤器的探索性选型提供参考。方法 选取Millistak+® X0HC Media（简称X0HC）、Millistak+® HC Pro X0SP Media（简称X0SP）和Viresolve® Prefilter（简称VPF）3类预过滤器分别与除病毒过滤器Vpro进行串联组合，在恒压条件下开展过滤测试，比较不同组合的过滤载量、通量衰减和基于3 h处理1 000 L料液场景的耗材成本估算；同时结合动态光散射、分子排阻色谱和毛细管凝胶电泳等方法，对新鲜料液与冻融料液的粒径特征及部分质量属性进行分析。结果 在此研究条件下，3种预过滤组合对新鲜料液的过滤表现总体接近，载量均可达约700 L/m²，通量衰减不超过3%。对于冻融料液，标称孔径较小的预过滤器组合（X0HC+Vpro、X0SP+Vpro）表现出更好的载量和通量稳定性，而VPF+Vpro组合通量衰减达77%，实验载量仅约567 L/m²。基于“3 h处理1 000 L料液”场景的耗材成本估算显示，X0HC+Vpro组合的单批次耗材估算成本最低。结论 在此研究体系和实验条件下，合理选择预过滤器类型可能有助于改善病毒过滤通量表现并提高单位膜面积处理能力，为降低工业放大成本、提高工艺稳健性提供参考。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 230-234. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250416-00023目的 以健康人血浆为原料，探索人凝血酶原的激活条件，提升产品比活性和得率。方法 采用DEAE sephadex A-50凝胶吸附分离健康人合并血浆制备人凝血酶原，并考察Ca2+浓度、初始人凝血酶原浓度、激活温度、初始pH以及激活时间对人凝血酶原激活效果的影响；采用建立的激活条件，经人凝血酶原纯化、人凝血酶原激活、阳离子交换层析等步骤，制备3批实验成品并完成质量指标检测。结果 DEAE sephadex A-50凝胶吸附步骤人凝血酶原平均回收率为81.98%。在氯化钙质量浓度为0.6%、初始人凝血酶原浓度为10 国际单位（international unit，IU）/mL、温度2~8 ℃、初始pH7.45条件下，放孵12 d，每单位人凝血酶原激活可以得到209.50 IU的人凝血酶。3个实验批次阳离子交换层析步骤人凝血酶平均回收率为77.57%，人凝血酶制品比活性均值为1 078.06 IU/mg，理论每吨血浆最高可以制备约6.40×107 IU的人凝血酶产品，3批成品均符合国家药典标准。结论 建立的激活条件可高效激活人凝血酶原，经过阳离子交换层析制备的人凝血酶产品比活性高、回收率高，可大幅降低生产成本，适用于规模化生产。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 235-240. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250421-00026目的 建立并验证培尿酸酶生产工艺中聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）修饰率的测定方法。方法 通过半胱氨酸（Cys）浓度计算修饰率。探索吸光度和Cys浓度之间的关系，建立标准曲线和检测范围，优化显色剂的使用量和反应时间。验证方法的专属性、准确度、精密度和耐用性，并应用该方法进行样品检测。结果 Cys浓度在5～200 μmol/L范围内与吸光度呈现良好的线性关系，决定系数≥0.99。显色剂使用量10 μL，即终浓度约为0.2 mg/mL时，测得Cys浓度与理论浓度差别较小，回收率符合可接受标准。温度对检测结果影响不大，故采用室温。方法的准确度和精密度良好，准确度回收率在90%～110%之间，相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）均＜10.0%。空白溶剂和残留PEG对检测体系无影响，专属性良好。加入显色剂后10～22 min内读板，测得Cys浓度的批间RSD为5.1%，符合可接受标准，方法耐用性良好。3个不同批次培尿酸酶样品的PEG修饰率分别为98.8%、98.4%、98.8%，批间RSD为0.2%，修饰率高且批间差异小，结果符合质量要求。结论 成功建立了培尿酸酶生产工艺中PEG修饰率的分光光度法检测方法，该方法具有良好的线性、专属性、精密度、准确度和耐用性。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 241-247. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20251105-00079目的 以麻疹病毒（measles virus,MV）沪-191疫苗株MVS191为载体构建表达风疹病毒（rubella virus，RV）RA27/3疫苗株病毒样颗粒（virus-like particle，VLP）的重组病毒。方法 将RV的开放阅读框2〔包含衣壳（capsid, C）、包膜（envelope，E）1、E2基因〕核酸序列克隆至载体pT7-MVS191，构建载体pT7-MVS191-RVS。pT7-MVS191-RVS与表达MV核蛋白、磷蛋白、大蛋白的3个辅助质粒及表达T7 RNA聚合酶的辅助质粒pCDIBP-T7RNAP共转染BSRT7细胞进行病毒拯救，而后感染Vero细胞完成病毒增殖。采用反转录PCR及基因测序鉴定重组病毒中外源基因的插入；用蛋白质印迹法检测RV C蛋白的表达；通过琼脂糖凝胶过滤层析纯化VLP，蛋白质印迹法分析洗脱峰中VLP的组装；以重组病毒免疫昆明小鼠，采用蛋白质印迹法、ELISA及微量细胞病变抑制法分别检测小鼠血清中抗RV抗体、抗RV抗体滴度及抗MV中和抗体效价。结果 基因测序证明重组病毒中成功插入了表达RV C、E2、E1蛋白的3 189 bp基因片段；蛋白质印迹法可检测到重组病毒中RV C蛋白的表达；分子筛外水洗脱峰中可检测到RV C蛋白。免疫小鼠血清中重组病毒MVS191-RVS与疫苗株诱导的抗RV抗体滴度相当，滴度达1∶32 000，麻疹中和抗体滴度大于1∶320。结论 利用反向遗传学技术，成功获得表达RV VLP的重组病毒MVS191-RVS。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 248-254. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20251011-00073目的 模拟制剂工艺中自制磷酸铝佐剂的无菌处理过程，对其在储存的不同时间点进行第2次高压灭菌，检测高压灭菌前后佐剂质量特性的变化情况，为磷酸铝佐剂的储存、使用和有效期设置提供基础数据。方法 将3批自制产业化规模磷酸铝佐剂储存于（25 ±2） ℃，分别在0、1、3、6、9、12、18和24个月定期取样进行第2次高压灭菌（121 ℃、30 min）。检测高压灭菌前后佐剂的质量特性，包括外观、pH、吸附率、粒径大小与分布、零电荷点、Zeta电位、上清液磷含量、磷/铝摩尔比等。结果 在（25 ±2） ℃储存24个月，3批磷酸铝佐剂各项质量特性稳定；在储存期间的不同时间点进行第2次高压灭菌，3批磷酸铝佐剂外观合格，pH维持在6.33~6.44，吸附率维持在55.8%~65.9%，10%、50%、90%分布粒径大小分别维持在2.166~2.574 μm、3.866~4.539 μm、6.250~8.049 μm，零电荷点维持在4.33~4.75，Zeta电位绝对值维持在32.4~36.0 mV，上清液磷含量维持在0.15~0.16 mg/mL，磷/铝摩尔比维持在0.93~1.07。结论 自制磷酸铝佐剂在（25 ±2） ℃储存24个月性质稳定，在储存期间的不同时间点进行第2次高压灭菌不会影响其性质。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 255-261. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250806-00059目的 建立并验证能同步检测免疫猪血浆中非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）、猪细小病毒（porcine parvovirus，PPV）和伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）的荧光PCR法。方法 参考上述3种病毒的国家标准，设计特异性的引物、探针和标准质粒，对重组质粒进行鉴定后，建立ASFV、PPV、PRV荧光PCR方法，并验证方法的线性、特异性、灵敏度和重复性。用建立的方法对送检的491份免疫猪血浆进行检测。结果 ASFV、PPV、PRV-糖蛋白H和糖蛋白E基因的标准曲线决定系数分别为0.999 1、0.999 8、0.999 5、0.999 9，阴阳性符合率均为100%；针对猪血浆样本的ASFV、PPV、PRV单检检测限均为25拷贝/μL，5混检检测限均为125拷贝/μL，批内和批间的重复性变异系数均＜5%。送检的491份免疫猪血浆样本中未检出ASFV和PRV，有极少数样本存在PPV。结论 建立的ASFV、PPV、PRV荧光PCR方法具有良好的线性、高特异性、高灵敏度和良好的重复性。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 262-266. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250819-00067目的 建立并验证检测佐剂中QS-21含量的高效液相色谱法。方法 采用氯仿与异丙醇（体积比3∶7）对佐剂进行破乳，破乳比例为1∶1。采用C18色谱柱，以体积分数0.05%三氟乙酸水溶液和0.05%三氟乙酸乙腈-水溶液梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，进样量为10 μL，柱温为25 ℃，检测波长为210 nm。对方法进行系统适应性、线性和范围、准确度、检测限和定量限、专属性验证。结果 方法的系统适应性较好，3次实验QS-21色谱峰的保留时间和峰面积相对标准偏差均小于2.0%；标准曲线的线性良好，决定系数在0.999 6到0.999 8之间。在3个加标浓度（12.5、25.0和37.5 μg/mL）下，QS-21加标回收率在96.0%~114.4%之间，相对标准偏差为5.5%；检测限为1 μg/mL，定量限为3 μg/mL；对照溶液无QS-21峰。结论 建立的QS-21含量测定方法操作简便、线性良好、准确度高、专属性强，可有效检测佐剂中QS-21含量，保证佐剂相关质量控制。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 267-272. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250708-00051目的 建立肠道病毒71型（enterovirus 71, EV71）纯度工作参考品，应用于高效液相色谱法检验EV71灭活疫苗（Vero细胞）原液纯度过程中的质量控制，并研究该工作参考品的长期稳定性。方法 将EV71接种Vero细胞，经纯化、灭活的病毒原液分装后作为EV71工作参考品，并检定主要评价指标，包括无菌性及蛋白质含量等。采用高效液相色谱法对EV71工作参考品的纯度进行标定，并将参考品于2～8 ℃条件下放置72个月，分别在不同时间进行纯度检测，考察其长期稳定性。结果 建立的EV71工作参考品的无菌性及蛋白质含量等检查结果均符合规定，其标定纯度为98.02%～100.00%，满足工作参考品的质量控制要求。在2～8 ℃条件下放置72个月内病毒蛋白峰峰形保持一致，保留时间为6.861～7.473 min，相对标准偏差为2.6%；纯度的相对标准偏差为0.1%，纯度未见明显改变。结论 建立的EV71纯度工作参考品长期稳定性良好，可用于EV71灭活疫苗（Vero细胞）原液纯度的检测。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 273-283. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250928-00071骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC）与水凝胶支架的相互作用是骨组织工程领域的研究热点。此文系统梳理了水凝胶支架调控BMSC成骨分化的分子机制，聚焦其在协调信号通路、改善免疫微环境及引导细胞行为方面的作用。研究表明，水凝胶通过其物理化学特性（如刚度、成分）调节Wnt、腺苷酸活化蛋白激酶- UNC-51样激酶1-自噬轴、刺猬蛋白及Nel样分子1等关键信号网络，进而激活Runt相关转录因子2、Osterix等成骨核心转录因子。功能化水凝胶还可负载IL-4等免疫调节因子或生物活性离子，诱导巨噬细胞向M2型极化，抑制炎症并释放血管内皮生长因子、骨形态发生蛋白2等，重塑促再生免疫微环境，同时增强细胞黏附与定向迁移。这些机制共同克服了炎症-成骨负反馈及干细胞归巢效率低的问题，为智能骨修复支架的临床转化提供了理论支撑。此文还进一步对比了天然、合成及复合水凝胶作为调控载体的性能差异，为材料选择提供了依据。
-
国际生物制品学杂志. 2026, 49(4): 284-291. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20251116-00085T细胞介导的抗肿瘤免疫应答在实体瘤治疗中具有核心地位。近年来，围绕T细胞功能增强、过继性T细胞治疗、工程化抗原识别，以及内源性T细胞重定向等技术路径，多种T细胞相关疗法在实体瘤领域取得临床与监管进展。此文综述当前实体瘤T细胞相关疗法的主要技术路径及代表性证据，重点涵盖肿瘤浸润性淋巴细胞疗法、T细胞受体工程化T细胞疗法、T细胞受体类CD3 T细胞衔接器、嵌合抗原受体T细胞疗法，以及抗体类CD3 T细胞衔接器。基于已获批、重新获得上市许可或处于关键验证阶段的代表性产品，此文比较不同技术路径在实体瘤中的临床转化模式，并讨论其在人群覆盖、安全性管理、制造、可及性和证据成熟度等方面的结构性限制。总体而言，精准人群定位、免疫相关毒性的可管理性，以及制造与供给体系的成熟度，将成为决定相关疗法能否实现可持续临床转化的关键因素。
沪公网安备 31010502000696号