目的 分析肠道病毒71型（enterovirus A71，EV-A71）灭活疫苗上市后我国手足口病（hand foot mouth disease，HFMD）的病原体、重症病例及人群分布特征情况，为HFMD的预防及控制提供参考。方法 纳入中国知网中2016—2025年公开发表、明确涉及EV-A71疫苗应用效果评价且包含疫苗应用前后病原体的变化、重症病例或发生率、人群分布特征等基础数据的文献，采用卡方检验对其结果进行综合分析。结果 EV-A71灭活疫苗推广使用前、后，HFMD病例的人群分布均表现为散居儿童占比最高、幼托儿童次之、学生及其他人群占比最低；EV-A71疫苗应用后，散居儿童在HFMD病例中的构成较疫苗应用前下降了11.35%，幼托儿童增加了25.62%，学生及其他占比增加了61.38%，疫苗应用前后3组人群分布差异均具有统计学意义（χ²=15 659.45、11 208.25、3 587.36，P<0.001）。EV-A71疫苗推广使用后，EV-A71所致HFMD病例平均减少了56.17%，而柯萨奇病毒A组16型（coxsackie virus A16，CVA16）及其他肠道病毒所致病例平均分别增加了8.08%和62.37%，差异均有统计学意义（χ²= 41.94、310.80、39.37，P<0.001），非EV-A71肠道病毒（如CVA16、CVA6及CVA10等）成为优势病原体。疫苗应用后，重症病例平均减少了42.70%、重症病例中EV-A71所致者占比下降17.89%，差异均有统计学意义（χ²=4 087.32、4 215.92，P<0.001）；疫苗使用后仍有约59%的重症病例由EV-A71感染所致，提示EV-A71依然是导致危重型HFMD的最主要病原体。结论 EV-A71疫苗极大降低了HFMD的重症发生率，EV-A71仍然是导致重症病例的主要病原体，同时CVA16、CVA6及CVA10等非EV-A71肠道病毒已经成为优势病原体。

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis, AS）是主要侵犯骶髂关节、脊柱及临近肌腱、软组织的慢性自身免疫性疾病。AS的典型病理演变含免疫炎症驱动应答、骨破坏与新骨形成等环节，这些环节在同一部位反复发作，最终导致关节逐渐僵直变形。此文从IL-17在AS中的致病机制、调控作用以及研究现状等方面进行论述，阐明IL-17作为靶点在AS治疗中的优势，为IL-17相关药物的开发以及AS的治疗奠定基础。

2型糖尿病是全身性胰岛素抵抗、胰岛β细胞功能减退的内分泌代谢性疾病。目前，2型糖尿病患者以代谢紊乱的复合型肥胖患者居多。司美格鲁肽是胰高血糖素样肽-1受体激动剂，可通过多重机制，如抑制食欲、延缓胃排空、改善胰岛功能等实现血糖控制与体重减轻，在2型糖尿病治疗领域应用广泛。此文对司美格鲁肽治疗2型糖尿病的作用机制、研究进展、临床应用中遇到的问题及建议等进行综述，旨在为其临床应用提供参考。

目的 建立检测异嗜性小鼠白血病病毒（xenotropic murine leukemia virus，X-MuLV）的实时荧光定量反转录PCR（real time fluorescent quantitative reverse transcription PCR，RT-qPCR）方法，并进行验证及初步应用。方法 根据美国典型培养物保藏中心提供的X-MuLV基因组序列，设计特异性引物并构建包含靶序列的质粒和RNA片段；使用数字PCR定量并经连续稀释后作为标准品，建立RT-qPCR检测方法。对建立的方法进行灵敏度、特异性、准确度、精密度和耐用性验证。应用建立的方法对纳米膜过滤及阳离子层析工艺去除逆转录病毒的能力进行评估，并与致细胞病变法的评估结果进行比较。结果 建立定量检测X-MuLV的RT-qPCR方法，该方法在2.5×10¹~2.5×10⁸拷贝/μL范围内线性良好，扩增效率为98%；检测灵敏度为2.5×10¹拷贝/μL；与实验室中其他常用病毒不发生交叉反应；重复性和中间精密度验证的变异系数均不高于1%；蛋白添加及缓冲液组分对样品中病毒检测结果不产生基质效应。应用该法检测纳米膜过滤工艺中指示病毒X-MuLV的去除率，处理前后病毒下降量≥4 lg 拷贝，可认定纳滤法能够有效清除病毒，结论与致细胞病变法检测结论一致。应用于复合式阳离子交换层析时RT-qPCR方法检测结果可反映病毒清除过程中病毒颗粒分布情况。结论 建立的RT-qPCR方法检测X-MuLV灵敏度、特异性、准确度、精密度和耐用性良好，适用于生物制品生产工艺的病毒清除验证工作。

作为分子生物学领域重要的核酸定量技术，数字PCR因其高灵敏度、高精确度以及高特异性等优势，近年来在病原体检测、基因编辑检测以及疾病诊断等领域得到了广泛应用。此文综述了数字PCR的基本概念、原理及其在生物检测领域的应用进展，以期为研究人员选择合适的检测方法提供参考。

近年来，双特异性抗体（双抗）通过提高免疫细胞靶向杀伤能力、阻断多信号通路产生协同作用等方式，在肿瘤免疫治疗领域呈现独特的治疗潜力。全球范围内，目前有＞200种用于抗肿瘤的双抗药物处于临床研究阶段，15种双抗获批用于治疗恶性血液肿瘤或实体瘤。双抗虽在恶性血液肿瘤中的治疗效果较好，但在实体瘤治疗中，如靶点选择、药物递送、安全性以及耐药性等方面仍面临诸多挑战。此文总结了已上市双抗在肿瘤治疗中的临床应用及研究进展，以为双抗药物的研发及临床应用提供参考。

目的 研究人凝血因子Ⅸ（human coagulation factor Ⅸ，FⅨ）制品的溶血性和血管刺激性。方法 根据国家药品审评中心发布的《药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》规定，针对FⅨ产品，采用体外试管法评价药物的溶血性；采用同体左右侧自身对照法，经耳缘静脉注射1.6 mL/kg的FⅨ或生理盐水7 d，开展家兔刺激性实验。结果 FⅨ在50国际单位（international unit，IU）/mL的浓度下未引起溶血和红细胞凝聚反应；家兔给药及停药恢复期间，一般情况观察未见明显异常，血管刺激评分均为0分；家兔停药恢复14 d，血管刺激评分均为0分；家兔末次给药后96 h及停药恢复期14 d结束，病理得分均值均为0分。结论 50 IU/mL浓度的FⅨ对家兔不产生溶血性和血管刺激性。

目的 比较胰蛋白酶及胰蛋白酶类似物TrypLE对Vero细胞、2BS细胞、MDCK细胞的消化效果，以确定其在细胞培养及消化中的适用性。方法 分别用胰蛋白酶和TrypLE消化Vero细胞、2BS细胞、MDCK细胞，分析细胞消化时间、分散效果、消化残留情况、细胞计数、细胞活率，比较不同消化酶消化效果。将消化后细胞分别接种至细胞工厂和篮式生物反应器中进行培养，培养期间每天观察细胞工厂中细胞的形态以及汇合度，检测篮式生物反应器中细胞的贴附效果及葡萄糖消耗量。结果 使用胰蛋白酶和TrypLE消化Vero细胞及2BS细胞时，在消化时间、细胞计数及细胞活率方面差异均无统计学意义（t=﹣0.46~3.46,P=0.074~0.885），分散效果、消化残留情况相似。使用TrypLE消化MDCK细胞的时间明显长于使用胰蛋白酶，差异有统计学意义（t=13.28，P＜0.01），且消化效果较胰蛋白酶差。3种细胞消化后在细胞工厂再培养时，均形态规则，汇合度良好。在篮式生物反应器再培养时，3种细胞3 h内贴附率均在80%以上，且葡萄糖总代谢量差异无统计学意义（t=﹣1.05~1.01，P=0.405~0.783）。结论 TrypLE可以替代胰蛋白酶用于Vero细胞和2BS细胞的消化过程，而胰蛋白酶对MDCK细胞的消化效果更好。

目的 对商业化规模生产场地变更前后的口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）进行单次给药毒性和重复给药毒性实验，以考察非临床安全性的可比性。方法 分别采用商业化规模生产场地变更前后的轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞），对SD大鼠以6 mL/只的剂量（临床拟用剂量为2.0 mL）经口灌胃给药，评价疫苗急性毒性。分别以2 和6 mL/只的剂量于第1、15、29、43天重复灌胃给药4次（恢复期4周），评价疫苗长期毒性。结果 单次给药毒性实验中，生产场地变更前后的疫苗最大耐受量均为6 mL/只，按体重折算，为人拟用剂量的50~200倍；变更前后疫苗组的动物第0—14天体重增长和日进食量均值均与同期对照组相近，分别为每只33~44 g（雌）、109~123 g（雄）和18~20 g（雌）、25~29 g（雄）。重复给药毒性实验中，未观察到不良反应的剂量水平为6 mL/只，低、高剂量组变更前后疫苗的动物体重、日进食量均值和体温的变化趋势均与同期对照组相似；实验动物的血液与生化指标也均未见与生产场地变更相关的异常改变。在同等给药剂量下，各疫苗卫星组血清IgG抗体的阳转率差异（P值为0.474~1.000）和几何平均滴度差异（t值为0.05~0.85，P值为0.442~0.965）均不具有统计学意义，且变化趋势一致；变更前低、高剂量疫苗卫星组血清IgG抗体阳转率和几何平均滴度（1∶lgx）最高水平分别为80.0%、80%和1.61、1.81，变更后分别为90.0%、100.0%和1.79、1.91；实验动物脏器及组织病理学切片均未见与生产场地变更相关的异常改变。结论 商业化规模生产场地变更前后的口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）在SD大鼠体内均显示出良好的安全性，二者的单次给药毒性和重复给药毒性均具有可比性。

目的 研究不同灭菌次数处理后磷酸铝佐剂的理化性质，并评估不同灭菌次数处理的磷酸铝佐剂对6A型肺炎球菌多糖破伤风类毒素（tetanus toxoid，TT）结合物（6A-TT）在小鼠中免疫原性的影响。方法 将自制磷酸铝佐剂分别灭菌1、2和3次，考察其粒径大小及分布、pH、等电点、游离磷酸根离子含量、磷铝摩尔比和蛋白吸附率。通过免疫CD1小鼠，评估经不同灭菌次数处理的磷酸铝佐剂与6A-TT配伍后对实验动物产生的特异性抗体滴度的影响。结果 磷酸铝佐剂灭菌1、2和3次后的50%分布粒径（Dv50）分别为5.04、5.22和5.12 μm，Dv90分别为9.20、9.87和10.60 μm，pH分别为4.6、4.3和4.3，等电点分别为5.48、5.36和5.29，游离磷酸根离子含量分别为4.12%、4.79%和4.86%，磷铝摩尔比分别为1.012、0.972和0.944，对TT的吸附率分别为92.7%、87.8%和85.7%，对6A-TT的吸附率分别为93.8%、91.6%和90.1%。磷酸铝佐剂在灭菌1、2和3次后分别吸附6A-TT，均能诱导小鼠产生抗体，其几何平均滴度分别为1 213、985和1 056。结论 灭菌次数的增加会导致磷酸铝佐剂的等电点和pH下降，游离磷酸根含量升高，磷铝摩尔比和蛋白吸附率降低，并可能影响6A-TT中抗原在小鼠体内的免疫原性。

目的 分析安徽省实施国家免疫规划吸附白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗（diphtheria-tetanus-acellular pertussis vaccine，DTaP）新免疫策略前后的疑似预防接种异常反应（adverse event following immunization，AEFI）发生情况和分布特征，为新免疫策略的安全性评估提供依据。方法 收集中国疾病预防控制中心免疫规划信息管理系统中安徽省2024年（策略调整前）和2025年（自1月1日起实施新策略，即策略调整后）的AEFI监测数据，从安徽省免疫规划信息管理系统获取同期DTaP接种剂次数。采用描述性流行病学方法分析DTaP AEFI的分布特征及发生率，采用χ²检验或Fisher确切概率法比较策略调整前后的差异。结果 2024—2025年安徽省共接种DTaP 2 375 028剂，报告AEFI 4 958例，总发生率为208.76/10万剂。策略调整后，一般反应发生率由186.69/10万剂上升至221.37/ 10万剂（χ²=32.50，P<0.001）；异常反应发生率由0.66/10万剂下降至0.20/10万剂，降幅约69.70%。首剂接种年龄提前至2月龄后，第1剂次的AEFI发生率由170.57/10万剂降至119.65/10万剂（χ²=24.76, P<0.001）；6周岁剂次由白喉-破伤风疫苗调整为DTaP后，未监测到异常反应病例，发生率0.00/10万剂（95% 置信区间: 0.00~0.83/10万剂）。结论 安徽省DTaP AEFI以一般反应为主，异常反应报告率极低。免疫策略调整后首剂提前至2月龄明显降低了AEFI发生率，有利于尽早建立免疫屏障；6周岁加强剂次改用DTaP后未监测到异常反应，表明本研究观察期内核心安全性指标表现良好。2、4、6、18月龄及6岁接种5剂次DTaP的新策略在本研究观察期内显示出较好的安全性。

目的 调查宣城市水痘流行特征及突破病例情况，为疫情防控提供依据。方法 通过中国疾病预防控制信息系统水痘疫情报告卡收集宣城市2021—2023年水痘病例信息，采用描述流行病学方法分析流行病学特征。结果 2021—2023年，宣城市共报告水痘病例6 979例，年均报告发病率93.44/10万（χ²=122.80，P＜0.001）。水痘发病具有显著的季节性，每年5—7月为发病小高峰，10月至次年1月达到最高峰。年均发病率居前3位的县（市）依次为绩溪县、宁国市、泾县。男性发病人数略高于女性；发病年龄以14岁以下为主；职业以学生及托幼儿童为主。 突破病例2 652例，占总病例的38.00%。男性突破病例多于女性，秋季突破病例占比最高。在接种疫苗后的11年内，距离接种时间越长，突破病例越多。聚集性疫情中的突破病例占关联病例的68.45%，明显高于散发病例中的突破病例占比。突破病例以7～13岁学生为主。结论 宣城市水痘发病率有上升的趋势，学校及托幼机构是水痘疫情防控的重点场所；应防止聚集疫情发生，提高2剂次水痘疫苗接种，减少突破病例发生。CDC应加强疫情监测，做好疫情报告审核，针对性开展培训和健康宣教，建立有效的免疫屏障，以降低水痘发病。

目的 探究不同供应商来源动物在同一生物制品异常毒性试验中的差异，并通过增加血常规分析探讨异常毒性试验的科学性与合理性。方法 参考中国药典2025年版三部通则1141异常毒性检查法，通过分析免疫不同疫苗后动物的体重及血常规结果，对不同供应商来源的动物进行差异性比对。结果 B供应商的NIH小鼠在疫苗组与对照组中的体重增长趋势均低于当前供应商（A供应商）且差异有统计学意义（t=2.64~7.07，均P<0.05）；C供应商与A供应商差异不明显。血常规结果显示，B供应商NIH小鼠两种疫苗组的红细胞数均明显高于A供应商的（t=2.44~4.07，均P<0.05），且多项白细胞指标与A供应商有明显差异（t=2.31~5.96，均P<0.05）；C供应商仅少数指标与A供应商有差异。将新增的D、E豚鼠供应商与现有评估合格的豚鼠供应商（B供应商）进行比较，3个供应商来源Hartley豚鼠对照组与疫苗组的体重生长趋势均一致，血常规结果也无明显差异。结论 B供应商的NIH小鼠与A、C供应商的小鼠存在明显差异，B、D、E供应商的Hartley豚鼠无明显差异。动物自身的差异可能影响异常毒性试验结果的判定，将异常毒性试验作为疫苗批次放行的检测手段，其合理性值得探讨。

目的 基于美国疫苗不良事件报告系统数据，分析人用狂犬病疫苗（rabies vaccine for human use，RVFHU）相关不良事件，评估其安全性。方法 选取美国疫苗不良事件报告系统中2019年1月1日至2023年9月15日的RVFHU相关报告，采用描述性统计方法分析不良事件分布特征，应用不相称测定法检测疫苗安全性信号。结果 共纳入794例不良事件报告（2 606例次临床症状）。临床症状以产品使用问题最多，系统器官分类中全身性疾病及给药部位症状占比最高。一般不良事件和严重不良事件构成比方面，接种剂次的构成比差异有统计学意义（χ²=10.25，P<0.05），而性别、年龄、发生时间的构成比差异均无统计学意义（χ²=0.32、2.58、2.02，P>0.05）。安全性信号检测发现59条阳性信号，涉及产品使用、免疫系统异常、精神病类反应等方面。结论 RVFHU相关不良事件多为产品使用问题或一过性轻度反应；检测出的阳性信号数据较少，尚需进一步研究验证。

免疫代谢是探索免疫细胞和新陈代谢相互作用的新兴领域。近年来，免疫代谢在自身免疫和自身免疫性疾病中的作用日渐受到关注，尤其是细胞代谢如何影响免疫细胞功能和应答。目前认为，免疫细胞信号转导和分化过程可以决定免疫细胞的行为方式，控制许多代谢途径，从而影响免疫细胞的功能和应答。此文主要介绍了免疫细胞的代谢在系统性红斑狼疮、1型糖尿病和类风湿关节炎等自身免疫性疾病中的改变，阐述了免疫代谢如何影响疾病发生、加重或缓解，并总结了靶向免疫代谢通路以调控免疫应答的相关药物及研究进展。

目的 评价阿达木单抗注射液的运输稳定性。方法 以武汉市至哈尔滨市作为公路运输起止点，进行1次往返运输，模拟药品运输过程的最差条件，以考察非温度因素条件下的药品稳定性。以极端温度及温度循环等破坏性试验来模拟药品脱冷链后的情况，通过检测阿达木单抗注射液常规质量检定项目考察药品温度偏移稳定性。结果 运输后3批次药品内包材均完整，破瓶率为0%，所有检测项目均符合企业标准，药品运输前后差异无统计学意义(t=﹣3.23~4.00,P=0.057~0.840)。3批次药品分别在(40±2) ℃、(﹣20±5) ℃条件下放置7 d后所有检测项目均符合企业标准。其中药品在(40±2) ℃条件下放置7 d后，分子排阻色谱法测定的单体含量和离子色谱法测定的纯度与2~8 ℃及(﹣20±5) ℃下的差异均有统计学意义(t=﹣142.00~97.00，P=0.000~0.020)。(﹣20±5) ℃条件下放置7 d后，药品所有检定项目与2~8 ℃条件下差异均无统计学意义(t=0.70~3.46，P=0.074~0.556)。3批次药品经过3次冻融后所有检测项目均符合企业标准，与未经冻融试验样品差异无统计学意义(t=﹣4.06~1.73，P=0.056~0.478)。结论 在本实验条件下长途运输非温度因素对药品的质量没有影响，药品在短期内温度偏移对药品的质量影响较小。

季节性流感对全球公共卫生构成持续性威胁，尤其对老年人、儿童、孕妇、慢性病患者及免疫缺陷者等高风险人群造成显著疾病负担。现有流感疫苗的效力虽受当季流行毒株匹配度影响，但对高风险人群的保护效益已获循证支持。当前，我国流感疫苗免疫接种率远低于发达国家，亟需通过政策支持与新技术开发进一步提升高风险人群的疫苗接种率，减轻流感疾病负担。此文系统综述了流感疫苗在高风险人群中的保护证据，重点探讨了灭活疫苗、减毒活疫苗、重组蛋白疫苗及佐剂疫苗等不同类型疫苗在高风险人群中的有效性及适用性，同时分析了重复接种效果、群体免疫作用及接种策略优化，为提升高风险人群保护效果提供参考。

目的 分析2016—2025年安徽省水痘减毒活疫苗（varicella attenuated live vaccine，VarV）疑似预防接种异常反应（adverse event following immunization，AEFI）特征。方法 分别通过中国疾病预防控制信息系统和安徽省免疫规划信息管理系统收集安徽省 2016—2025 年VarV AEFI个案数据和VarV接种剂次数，采用描述性流行病学方法分析AEFI报告发生率和分布特征。结果 2016—2025年安徽省共报告VarV AEFI 2 408例，年均报告发生率为329.46/100万剂，一般反应、异常反应报告发生率分别为308.46/100万剂、17.80/100万剂。男性占53.74%，≤1岁占64.70%，皖北地区占61.17%，24 h内发生占78.15%，第1剂次占77.24%。在异常反应中，过敏性皮疹占90.77%，年均报告发生率为16.16/100万剂。结论 安徽省VarV AEFI以一般反应为主，异常反应极罕见，VarV安全性总体良好。

近年来，全球新突发传染病频发，历次公共卫生危机的应对实践表明，面对具有大规模流行潜力病原体的威胁，疫苗的快速响应对于有效遏制威胁至关重要。流行病防范创新联盟（Coalition for Epidemic Preparedness Innovations， CEPI）在2021年提出了“CEPI 2.0战略规划”暨“百日疫苗计划”，旨在依托确定原型疫苗库、搭建全球临床试验网络、筛选早期免疫生物标志物、构建快速制造与验证能力、布局早期疫情监测系统及加强生物安全保障能力6大支柱，在大流行病原体确认后的百日内，完成目标疫苗的初始授权和规模化生产启动。此文就“百日疫苗计划”的科学框架部分进行系统性梳理和解读，以期为我国更好地应对潜在的疫情风险和大流行病的发生提供借鉴。

目的 评估3种Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗生产用片状载体的使用效果，为该疫苗生产工艺中载体的选择提供依据。方法 采用15 L篮式生物反应器体系，分别搭载A、B、C 3种片状载体进行Vero细胞培养并制备Sabin株脊髓灰质炎病毒液，考察并比较Vero细胞接种于片状载体后0~3 h的细胞贴附率、8 d培养周期的葡萄糖代谢特征、病毒收获液病毒滴度及D抗原含量等指标。结果 接种3 h后A、B、C 3种载体的细胞贴附率均达到90%以上。3组细胞均呈现典型S型葡萄糖消耗曲线，载体A和B组累计消耗量分别为（191.1±7.6） g和（192.9±5.3） g，差异无统计学意义（F=43.23，P=0.060），二者均高于C组的（153.1±4.4） g且差异有统计学意义（F=43.23， P<0.001）。载体B组D抗原含量为（777.0±12.5） D抗原单位（D-antigen unit，DU）/mL，病毒滴度为（8.2±0.1） lgCCID₅₀/mL，略高于载体A组〔（773.3±10.8） DU/mL，（8.1±0.2） lgCCID₅₀/mL〕，差异无统计学意义（F分别为209.00、27.30，P分别为0.946、0.708），而载体C组2项指标〔（598.3±14.2） DU/mL，（7.2±0.2） lgCCID₅₀/mL〕低于载体B组，差异有统计学意义 （F分别为209.00、27.30，P均小于0.001）。结论 载体A和载体B在Vero细胞代谢活性维持与病毒复制方面均较有优势。

目的 对靶向唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15（sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin 15, Siglec-15）的全人源单克隆抗体23F4进行关键结合位点鉴定和生物学功能的初步评价。方法 对Siglec-15进行丙氨酸扫描突变，鉴定23F4的关键结合位点，再通过ELISA和流式细胞术对23F4的体外生物学功能进行探究，最后构建2种小鼠肿瘤模型以评价23F4的体内抗肿瘤功能。结果 鉴定得到23F4的关键结合位点（R71/H72残基）。在体外检测中23F4具有较高的结合活性，半数效应浓度为68.42 ng/mL，在中、低浓度下与Siglec-15阳性细胞的结合活性优于对照抗体，并且23F4能够阻断Siglec-15与受体的结合，解除T细胞的增殖抑制，在2种小鼠肿瘤模型中均具有抑制肿瘤生长的功能。结论 靶向Siglec-15的单克隆抗体23F4具有新型结合位点，能够解除Siglec-15介导的免疫抑制。

目的 建立并验证检测阿达木单抗电荷变异体的阳离子交换高效液相色谱法。方法 采用以羧基官能团的弱阳离子为固定相的交换柱（4 mm×250 mm），以0.01 mol/L 磷酸氢二钠溶液、pH 7.5为流动相 A，以0.01 mol/L 磷酸氢二钠+0.5 mol/L 氯化钠溶液、pH 5.5为流动相 B进行梯度洗脱。按面积归一法计算赖氨酸变异体和酸性组分含量，并对该方法进行专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度和耐用性验证。结果 该方法检测阿达木单抗注射液可见溶剂峰和目标峰；重复检测6次各组分相对标准偏差均＜2%；不同实验员、不同实验设备检测各组分的相对标准偏差均＜2%；赖氨酸变异体之间的峰的定量限（信噪比＞10）为100 μg/mL、检测限（信噪比＞3）为30 μg/mL；在企业质量标准限度范围内检测不同浓度各组分线性良好，决定系数均＞0.99；第1酸区峰、赖氨酸变异体之间的峰和赖氨酸变异体2峰准确度回收率均在80%～115%，第2酸区峰、主峰和赖氨酸变异体1峰准确度回收率均在85%～110%；不同流动相pH、不同流动相氯化钠浓度、不同流速与柱温、不同批次色谱柱条件下检测结果符合要求，一致性较好。结论 建立的方法具有良好的专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度和耐用性，适用于阿达木单抗电荷变异体的测定。

目的 验证细胞种属鉴别（多重PCR）法，并应用于多种不同种属来源的细胞鉴别。方法 使用细胞种属鉴别检测试剂盒（多重PCR法）提取细胞基因组DNA，用混合引物对靶基因进行扩增，采用多重PCR联合琼脂糖凝胶电泳技术，根据扩增产物的条带大小及数量进行物种鉴定及交叉污染检测，并考察该方法对5种不同来源细胞的检测限、专属性和耐用性。结果 细胞种属鉴别（多重PCR）法对Hep-2细胞（人）、犬肾细胞、Vero细胞（非洲绿猴）、L929细胞（小鼠）的检测限为500个细胞，对中国仓鼠卵巢细胞的检测限为5 000个细胞。对每种细胞设计不同来源的细胞进行交叉污染，主细胞及污染细胞均能检出，且能够检测出1‰水平的细胞污染。将5种细胞的基因组DNA提取液分别于﹣18 ℃保存1、3、7 d，扩增结果均一致。结论 该细胞种属鉴别（多重PCR）法灵敏度高、特异性强且快速便捷，有助于提高生物制品生产用细胞基质的质量控制水平。

目的 建立并验证重组人干扰素α1b等电点（isoelectric point，pI）全柱成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis，iCIEF）检测方法。方法 用iCIEF检测重组人干扰素α1b的pI，对iCIEF的样品中尿素添加浓度以及等电聚焦时间进行确认，并依据人用药品技术要求国际协调理事会Q2（R2）要求对该检测方法进行方法学验证，包括专属性、准确度、重复性、中间精密度和耐用性。结果 最终选择等电聚焦条件为3 000 V等电聚焦3 min，样品检测时添加尿素终浓度为1 mol/L。空白对照（醋酸盐缓冲液）对重组人干扰素α1b pI的检测没有干扰，重组人干扰素α1b等电聚焦产生2个峰，峰1 pI约为5.4，峰2 pI约为5.5；经验证该检测方法专属性、准确度、重复性、中间精密度和耐用性均良好。结论 建立的iCIEF检测方法可以用于重组人干扰素α1b pI的检测，可为该产品的质量控制提供参考。

随着微针技术的快速发展，微针逐渐成为新兴的疫苗递送方式，其具有微创、无痛、自给药、节省剂量、增强免疫应答等优势。免疫原性评价对疫苗的研发至关重要，目前尚无对微针疫苗免疫原性评价方法的系统性总结。此文概述了微针疫苗免疫应答的特点，系统梳理和讨论了用于评价微针疫苗免疫原性的各种方法及关键指标，并对新兴免疫原性评价方法在微针疫苗领域的应用进行了探讨和展望。

目的 建立并验证SIBP-A01单克隆抗体（单抗）中聚山梨酯20（polysorbate 20，PS20）残留量的高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）-蒸发光散射检测器（evaporative light-scattering detector，ELSD）检测方法。方法 应用HPLC-ELSD方法检测SIBP-A01单抗中PS20残留量，并对该方法的专属性、精密度、线性、准确度、定量限和耐用性进行验证。结果 稀释液以及不含PS20的制剂缓冲液无干扰峰；3批单抗供试品重复检测结果、不同人员检测结果、同一实验人员不同时间检测结果的相对标准偏差均< 5%；PS20含量在12.5~100.0 μg/mL范围内时，峰面积对数与含量对数线性关系良好，决定系数为0.996 8；加标回收率在103.5%~109.2%之间；定量限为5.0 μg/mL；当色谱柱温度为（30±3） ℃、供试品于10 ℃放置24 h或使用不同品牌PS20时，检测差<5%。结论 成功建立了SIBP-A01单抗中PS20残留量的HPLC-ELSD检测方法，该方法的专属性、精密度、线性、准确度和耐用性良好。

目的 建立并验证人生长激素（human growth hormone，hGH）注射液中壬基酚浸出物超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)检测方法。方法 参照人用药品注册技术要求国际协调会杂质相关指导原则，计算壬基酚安全限度值；采用UPLC-MS/MS法检测hGH注射液中壬基酚浸出物含量，并对该方法的线性、专属性、定量限、准确度、精密度、稳定性和耐用性进行验证。用建立的方法对3批hGH注射液进行检测。结果 壬基酚的安全限度值为4.5 μg/瓶。壬基酚浓度在8.2~65.5 μg/L范围内时，峰面积与浓度线性关系良好；空白溶液中未检测到壬基酚；定量限为1.2 μg/瓶；低、中、高水平加标样品的平均回收率均在70%~125%之间，相对标准偏差（relative standard deviationg, RSD）均＜15%；重复性和中间精密度RSD均＜15%；供试品溶液中壬基酚在室温下20 h内稳定；色谱条件中的流速设为0.27和0.33 mL/min时，6次检测壬基酚峰面积RSD＜10%；3批样品的检测结果远低于4.5 μg/瓶的限值。结论 成功建立了hGH注射液中壬基酚浸出物的UPLC-MS/MS检测方法，该方法的线性、专属性、定量限、准确度、精密度、稳定性和耐用性良好。

目的 借助深度学习与基于结构的药物设计策略，开发兼具高效激动活性与酶切耐受性的胰高血糖素样肽-1受体（glucagon-like-peptide-1 receptor，GLP-1R）/胃抑制多肽受体（gastric inhibitory polypeptide receptor，GIPR）/胰高血糖素受体（glucagon receptor，GCGR）三受体激动多肽并评估其体外效力。方法 以临床候选多肽Peptide 20（MAR423）为模板，对N端前3残基进行虚拟饱和突变，采用Protein Message-passing Neural Network对三受体复合物稳定性评分，并结合神经网络模型预测二肽基肽酶-Ⅳ（dipeptidyl peptidase Ⅳ, DPP-Ⅳ）敏感性，筛选800条候选序列；对优选序列执行5 ns分子动力学模拟计算结合自由能，并在HEK-293报告基因体系中测定半数效应浓度（median effective concentration，EC₅₀）；耐酶性能通过DPP-Ⅳ处理后残余活性验证。结果 获得的Peptide A对GLP-1R、GIPR、GCGR的结合自由能分别达到（﹣151.49±15.87）、（﹣122.79±23.42）和（﹣139.25±19.81） kcal·mol^﹣¹，构象稳定；体外EC₅₀分别为0.069、0.089、2.730 nmol/L，与各内源性配体相当或更优。经DPP-Ⅳ处理24 h后活性保留率（104.30±3.23）%，显著优于对照肽（40.91%~89.00%）。结论 建立了快速、有效获得具有优异三受体平衡活性和耐DPP-Ⅳ能力新型多肽的流程，为代谢性疾病长效多靶点肽药物的理性设计提供了通用方案和实验依据。

目的 验证检测注射用重组人凝血因子Ⅶa（recombinant human coagulation factor Ⅶa，rFⅦa）纯度的分子排阻高效液相色谱法，并应用于rFⅦa成品纯度的稳定性分析。方法 利用rFⅦa标准品、原液、成品，验证采用分子排阻高效液相色谱法检测rFⅦa的系统适用性与专属性、上样量耐用性、准确度、重复性、中间精密度和色谱柱耐用性，观察rFⅦa分别置于2～8 ℃和40 ℃储存6个月的稳定性。结果 rFⅦa国际标准品中二聚体的峰谷比为1.43，单体的拖尾因子为1.08。制剂缓冲液在单体峰位置出现的辅料峰最大占比0.4%。在10~50 μg蛋白上样量范围内，rFⅦa原液和成品单体峰面积百分比含量的相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）分别为0.03%和0.07%。采用强制热降解实验验证准确度，强制热降解处理前后多聚体、二聚体/寡聚体和单体的峰面积百分比变化的回收率为97.5%～100.0%，样品总峰面积的回收率为98.5%～100.6%。重复性验证rFⅦa原液和成品的单体峰面积百分比含量的RSD分别为0.03%和0.02%。中间精密度验证不同操作人员、分析设备和检测日期的差异无统计学意义（F=0.13~2.09， P值均>0.05），原液及成品单体峰面积百分比的RSD分别为0.2%和0.9%。不同批次色谱柱的耐用性结果差异无统计学意义（F=0.01， P>0.05）。在2～8 ℃储存6个月后，注射用rFⅦa成品的分子大小分布无明显变化，纯度保持稳定；在40 ℃储存6个月后，单体减少3.1%～4.0%，二聚/寡聚体增加1.9%～2.3%，多聚体增加1.2%～1.7%。结论 分子排阻高效液相色谱法高效、准确、重现性好，适用于注射用rFⅦa的纯度检测。注射用rFⅦa成品在2～8 ℃或40 ℃条件下储存6个月稳定性良好。

用于生产流感病毒疫苗的动物细胞大规模培养技术凭借其高效稳定、易于放大、安全可控等优势，有望逐步取代传统的鸡胚培养法，成为生产流感疫苗的主流方法。深入认识流感病毒在疫苗生产细胞系中的病毒扩增与细胞应激特性，是指导生产细胞株的构建和病毒生产工艺的理性设计与优化的关键所在。此文概述了细胞基质流感病毒疫苗的生产流程，综述了流感病毒在生产细胞系中的扩增过程与生产细胞系感染流感病毒后的应激反应相关研究进展，并介绍了数学模型在流感病毒生产过程中的应用，旨在为细胞基质流感疫苗生产的理性优化提供参考。

感染性骨缺损的治疗因“感染-修复”恶性循环而面临巨大挑战。抗菌-成骨双功能水凝胶通过协同整合抗菌与成骨功能，为破解这一难题提供了创新策略。此文综述了该类水凝胶在骨髓间充质干细胞骨修复中协同作用的最新研究进展，重点阐述了赋予材料智能化功能的设计策略，深入剖析了时序协同、微环境重塑和空间协同等核心机制。通过物理抗菌、免疫调节、智能释药等多维度机制的协同，可有效调控骨髓间充质干细胞活性，打破感染抑制骨再生的恶性循环。尽管水凝胶的临床前疗效明显，但其临床转化仍面临微环境响应性不足、功能协同矛盾及生物安全性等挑战。未来研究需聚焦于智能载体开发及时空序贯释放体系构建，以推动骨再生策略向智能化、精准化发展。

T细胞介导的抗肿瘤免疫应答在实体瘤治疗中具有核心地位。近年来，围绕T细胞功能增强、过继性T细胞治疗、工程化抗原识别，以及内源性T细胞重定向等技术路径，多种T细胞相关疗法在实体瘤领域取得临床与监管进展。此文综述当前实体瘤T细胞相关疗法的主要技术路径及代表性证据，重点涵盖肿瘤浸润性淋巴细胞疗法、T细胞受体工程化T细胞疗法、T细胞受体类CD3 T细胞衔接器、嵌合抗原受体T细胞疗法，以及抗体类CD3 T细胞衔接器。基于已获批、重新获得上市许可或处于关键验证阶段的代表性产品，此文比较不同技术路径在实体瘤中的临床转化模式，并讨论其在人群覆盖、安全性管理、制造、可及性和证据成熟度等方面的结构性限制。总体而言，精准人群定位、免疫相关毒性的可管理性，以及制造与供给体系的成熟度，将成为决定相关疗法能否实现可持续临床转化的关键因素。

目的 分析重庆市南岸区含白喉-破伤风-无细胞百日咳（diphtheria, tetanus and acellular pertussis，DTaP）成分联合疫苗预防接种的安全性。方法 通过中国疾病预防控制中心免疫规划信息管理系统和重庆市免疫规划信息管理系统，收集重庆市南岸区2020—2024年报告的接种含DTaP成分联合疫苗的疑似预防接种异常反应（adverse event following immunization，AEFI）监测数据和疫苗接种数据。结果 2020—2024年重庆市南岸区累计接种含DTaP成分联合疫苗191 299剂次，报告296例AEFI，AEFI报告发生率为154.73/10万剂；其中一般反应291例（发生率152.12/10万剂）、异常反应5例（发生率2.61/10万剂）；男女性别比为1.33∶1.00；18~24月龄儿童占70.95%；各月均有病例报告，主要在4—9月，占78.38%；加强免疫的AEFI报告发生率高于基础免疫，且差异有统计学意义（χ²_趋势= 266.21，P＜0.01）。结论 2020—2024年重庆市南岸区含DTaP成分联合疫苗接种的AEFI报告以一般反应为主，异常反应罕见，表明该疫苗具有良好的安全性。

目的 分析上海市青浦区赵巷镇2019—2023年疑似预防接种异常反应（adverse event following immunization，AEFI）分布状况，为评价疫苗接种的安全性和提升预防接种服务质量提供依据。方法 分别通过中国疾病预防控制信息系统和上海市疫苗综合管理和预防接种服务信息系统收集2019—2023年上海市青浦区赵巷镇AEFI和疫苗接种数据，并采用描述性流行病学方法进行分析。结果 2019—2023年上海市青浦区赵巷镇共报告AEFI 504例，年平均报告发生率为355.18/10万剂。一般反应（99.01%）以发热（45.24%）和局部反应（42.86%）为主，异常反应（0.99%）均为过敏性皮疹。男性略多于女性（1.20∶1.00），<1岁儿童占比最高（53.77%）。83.73%的AEFI发生在接种后1 d内。带状疱疹疫苗报告发生率最高，白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗其次，白喉-破伤风-无细胞百日咳-流感嗜血杆菌b结合疫苗（四联疫苗）以及13价肺炎球菌疫苗（结合）的报告发生率也较高。结论 赵巷镇AEFI以一般反应为主，异常反应发生率较低，表明疫苗接种安全性良好；建议重点加强1岁以内儿童和接种后24 h内的AEFI监测。

目的 探索HEK293报告基因法（reporter gene assay，RGA）检测3个厂家贝伐珠单克隆抗体（单抗）产品的可行性。方法 采用RGA分别检测3个厂家贝伐珠单抗产品的生物学活性，并对该方法的线性、准确度、精密度进行验证，探索胎牛血清浓度、细胞铺板密度、细胞培养代次对RGA检测结果的影响。结果 RGA检测3个厂家贝伐珠单抗产品绘制的四参数曲线显示，厂家-2信噪比高，厂家-2和厂家-3拟合度好；理论相对效价为50%~150%时，相对效价的理论对数值与其效价测定值呈现良好的线性关系；3个厂家产品的回收率均在70%~130%之间，相对标准偏差均＜20%；胎牛血清浓度为5%和10%，细胞铺板密度在0.6×10⁵、0.9×10⁵和1.2×10⁵个/孔，细胞代次8、16、23代时，活性测定拟合曲线较好。结论 RGA能实现对3个厂家贝伐珠单抗产品的生物活性检测，虽然方法的线性、准确度、精密度良好，但胎牛血清浓度、细胞铺板密度及细胞代次对RGA检测结果有一定影响。

目的 分析2020—2024年上海市青浦区水痘的流行病学特征，为完善水痘防控措施提供依据。方法 从中国疾病预防控制中心免疫规划信息管理系统收集2020—2024年上海市青浦区水痘病例，采用描述性研究方法对水痘病例的时间分布、地区分布及人群分布情况进行分析，采用SPSS 26.0软件对数据整理分析，使用卡方检验进行多组间比较。结果 2020—2024年青浦区共报告水痘病例1 225例，水痘发病整体呈现下降趋势（χ²_趋势= 110.73，P<0.001），2个发病高峰期分别为5—7月及11月至次年1月。全区各街镇均有发病，且主要集中在夏阳街道和徐泾镇等中心城区。多个年龄组均有病例，其中<5岁组发病数虽最多，但整体占比呈现下降趋势，在所有病例中的构成比从2020年的22.34%下降至2024年的13.46%。在所有职业中，以学生病例最多（38.04%），其次为散居儿童（15.10%）。结论 2020—2024年青浦区水痘发病率虽有所下降，但应关注重点机构和人群，及时规范开展疫情处置，并稳步提升水痘疫苗覆盖率。

目的 分析2019—2024年宿松县水痘流行病学及时空分布特征，为水痘监测和预防控制提供科学依据。方法 从中国疾病预防控制信息系统收集宿松县2019年1月1日至2024年12月31日报告的水痘病例个案数据，采用描述性流行病学方法分析其流行病学特征（时间、人群、地区分布），利用SaTScan 10.1软件，采用回顾性时空扫描统计（回顾性时空重排扫描统计法）识别水痘发病的时空聚集区（扫描单位：乡镇；时间分辨率：月）。结果 2019—2024年宿松县共报告水痘病例1 091例，年报告发病率波动在14.23/10万至35.39/10万之间，年均为21.06/10万，年发病报告率呈现显著的波动下降趋势（趋势采用卡方检验，χ² = 28.76，P<0.01）；发病呈现双峰季节性，主高峰在10月至次年1月（秋冬季），次高峰在5月至7月（春末夏初）；时空扫描分析识别出4个具有统计学意义（P<0.05）的时空聚类，覆盖全县10个乡镇，高发地区主要集中在县域中北部，以城关的孚玉镇及周边乡镇为主；男性病例（n=615，占比56.37%）多于女性（n=476，占比43.63%）；病例主要集中于儿童和青少年（<15岁，占比65.54%），其中5~9岁组病例占比最高（30.26%），其次为10~14岁组（23.46%）；职业分布方面，在校学生占比最高（n=723，66.27%），其次为托幼儿童；78.00%的病例无水痘疫苗免疫史。结论 2019—2024年间，宿松县水痘报告发病率呈现显著下降趋势，在校学生高发，发病存在时空聚集性。为进一步控制水痘疫情，建议持续加强水痘疫情监测，重点做好学校和托幼机构的聚集性疫情防控；同时落实并提高2剂次水痘疫苗接种覆盖率，优先覆盖适龄儿童及既往无免疫史人群。

目的 在中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CHO）细胞表达系统中真核表达截短型水痘-带状疱疹病毒（varicella zoster virus，VZV）糖蛋白E（glycoprotein E，gE），并评价其免疫原性。方法 将VZV-gE 1—546位氨基酸基因片段克隆至载体pCHO1.0，构建重组表达质粒 pCHO1.0-VZV-gE 1-546，瞬时转染至CHO细胞，扩增培养后收获上清。经离子交换层析获得高度纯化的重组截短gE，与复合佐剂（铝佐剂+CpG 1018佐剂）以一定比例混合，腹腔注射免疫小鼠2次，采血分离血清进行IgG抗体水平检测。末次免疫3周后安乐死小鼠，取脾脏淋巴细胞进行酶联免疫斑点试验检测。结果 基因测序结果表明，重组表达质粒pCHO1.0-VZV-gE 1-546构建正确；纯化后的重组截短gE的纯度可达95%以上。实验组小鼠免疫后血清中抗VZV的IgG抗体水平、IFN-γ和IL-2的斑点几何平均数均高于对照组小鼠，且复合佐剂组高于非佐剂组。结论 成功构建并表达了重组截短VZV gE，该蛋白在小鼠体内可诱导良好的免疫应答。

目的 建立中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CHO）细胞收获液的小鼠微小病毒（minute virus of mice， MVM）荧光定量PCR（quantitative PCR，qPCR）检测法并进行方法学验证及初步应用。方法 采用qPCR法对CHO细胞培养收获液进行MVM检测，验证该方法的重复性、中间精密度、专属性、耐用性和检测限。对12份CHO细胞收获液进行MVM检测。结果 同一样品重复检测 6次，加标样品循环阈值的变异系数为0.6%~0.8%。不同人员间的变异系数为0.7%。与猪细小和猪圆环病毒无交叉反应。当细胞数在1.0×10⁷、1.1×10⁷、9.0×10⁶波动时检测结果未受影响。检测限为200 拷贝/μL。采用该方法对12份CHO细胞收获液进行检测，均未检出MVM。结论 建立的qPCR法具有良好的重复性、中间精密度、专属性、耐用性和检测限，可以用于CHO细胞收获液中MVM的检测。