基孔肯雅病毒感染可引发基孔肯雅热，该病毒在热带及温带的广泛区域均有流行，已成为全球性公共卫生问题。基孔肯雅热以对症治疗为主，没有特效药物，接种疫苗是预防基孔肯雅病毒感染的经济有效手段。虽然目前已有2款疫苗被批准在局部地区使用，但远不能满足高风险区对疫苗的需求。此文对基孔肯雅病毒疫苗研发现状进行综述，重点对已上市疫苗、进入临床试验阶段的疫苗和有潜力进入临床试验的疫苗进行总结。

目的 应用微量致细胞病变（micro-cytopathic effect，CPE）法建立抗柯萨奇病毒A组6型（coxsackievirus A6，CV-A6）中和抗体检测方法并进行方法学验证。方法 用人横纹肌瘤细胞和CV-A6检测毒株建立基于CPE的中和抗体检测方法，并对相对准确度、精密度、线性、专属性和耐用性等进行验证。结果 建立了针对CV-A6免疫血清的中和抗体效价测定方法。3份不同稀释度（1×、16×、256×）的血清参考品各测定3次，相对偏倚分别为﹣2%、﹣4%、﹣16%，拟合线性回归斜率为1.065，相对准确度良好；几何变异系数（geometric coefficient of variation, GCV）为19%～50%，重复性良好。取10份小鼠免疫血清于不同天测定3次中和抗体效价，GCV为0%～75%，中间精密度良好。将抗CV-A6中和抗体血清参考品稀释9个稀释度，独立测定3次，拟合直线的回归系数为0.93，直线回归具有统计学意义（F=340.99，P＜0.000 1）。阴性血清中和效价均＜8，表明专属性良好。不同细胞代次、不同细胞密度、不同病毒载量、不同培养时间、待检血清反复冻融不同次数及短暂储存时间范围的GCV为23%～101%，表明该方法耐用性良好。结论 成功建立了抗CV-A6中和抗体检测方法，该方法具有较好的相对准确度、精密度、线性、专属性及耐用性，可用于评价CV-A6免疫血清的中和抗体水平。

基孔肯雅病毒（chikungunya virus, CHIKV）是由伊蚊传播的甲病毒。CHIKV感染可导致基孔肯雅热，近年来在全球范围内多次暴发，引发严重的公共卫生问题，目前尚无特异性抗病毒药物获批上市，临床治疗仍以对症和支持治疗为主。随着CHIKV传播范围的扩大和疾病负担的加重，开发有效的抗病毒药物成为迫切需求。此文综述了CHIKV的流行情况、基因组结构和功能以及近年来抗CHIKV药物，包括直接抗病毒药物、宿主靶向药物等的研究进展。此文还探讨了药物开发过程中面临的挑战，如发生耐药突变、药物安全性及临床转化等问题，并展望了未来研究方向，包括多靶点药物设计、联合用药策略以及计算机辅助药物设计与人工智能等。通过系统梳理现有研究成果，为抗CHIKV药物的进一步研发提供参考和启示。

目的 建立并验证同时测定流感病毒裂解疫苗（MDCK细胞）中Triton X-100和聚山梨酯80（polysorbate 80，PS80）残留量的方法。方法 采用高效液相色谱（high performance liquid chromato-graphy，HPLC）-蒸发光散射检测器（evaporative light-scattering detector，ELSD）方法检测流感病毒裂解疫苗中的Triton X-100和PS80残留量，并对该方法的专属性、准确度、精密度、线性、定量限和耐用性进行验证。结果 HPLC-ELSD法检测空白溶剂无色谱峰出现，混合标准溶液和供试品可见2个目标色谱峰，且与相邻峰的分离度大于1.5；Triton X-100和PS80样品的不同浓度加标回收率分别在90.0%~105.0%和80.0%~105.0%；同一实验员重复进样6次，TritonX-100和PS80残留量的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为0.7%和1.4%；由2名实验员在不同工作日检测Triton X-100和PS80残留量的RSD均不高于5.0%；Triton X-100质量分数在0.010%~0.100%范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，定量限为0.010%。PS80质量分数在0.006% ~0.060%范围内，浓度与峰面积呈线性关系，定量限为0.003%。结论 成功建立了流感病毒裂解疫苗（MDCK细胞）中Triton X-100和PS80残留量的HPLC-ELSD检测方法，该方法具有良好的专属性、准确度、精密度、线性和耐用性。

目的 开发抗NF-κB受体激活蛋白配体（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）单克隆抗体（单抗）的纯化工艺。方法 采用深层过滤澄清上游细胞培养液去除细胞，澄清后的培养液经过亲和层析捕获、低pH病毒灭活、阴离子交换层析、阳离子交换层析、除病毒过滤、超滤浓缩、透析置换、除菌过滤等步骤，获得单抗原液。通过收率和产品相关杂质去除情况评价亲和层析纯化效果，通过监测穿透点计算填料的动态载量（dynamic binding capacity，DBC）；通过考察不同的pH和温度条件对样品的纯度和活性影响，确定低pH病毒灭活条件；通过考察目的蛋白在不同缓冲体系下的稳定性、工艺相关杂质去除情况，确定合适的阴离子交换层析缓冲体系并考察纯化效果和DBC；通过线性洗脱，分段收集考察杂质情况确定阳离子交换层析工艺参数；通过处理量、通量、流量衰减确定病毒滤器的型号；根据浓缩、透析及过滤除菌说明书和平台技术确定滤膜孔径、进液流速和跨膜压力，再根据确定的参数进行浓缩及透析置换；最后经0.2 μm膜除菌过滤获得原液，并检测纯度和杂质。结果 以MabSelect SuRe为亲和层析填料，DBC 45.3 mg/mL填料，25 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷（Tris）-盐酸（pH7.5）为平衡液，150 mmol/L醋酸（pH2.8）为洗脱液；pH3.5灭活1 h；以Sepharose QFF为阴离子填料，最大DBC 60 mg/mL 填料，50 mmol/L Tris-醋酸（pH7.5）为平衡液；SP HP为阳离子填料，上样量21.9 mg/mL，100%缓冲液A（10 mmol/L柠檬酸，pH5.5）—100%缓冲液B（10 mmol/L柠檬酸+1 mol/L NaCl，pH5.5）线性洗脱20柱体积；以Viresolve Pro为除病毒过滤器；采用PLCTK 30 kDa超滤膜包（C流道）超滤透析浓缩至（40.00±5.00） mg/mL，并以等体积方式10倍体积置换成原液缓冲液后除菌过滤；单抗纯度和杂质含量均符合质量标准。结论 成功开发出抗RANKL单抗的纯化工艺，产品符合要求。

目的 通过分析口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）单价病毒原液内猪胰蛋白酶残留量、牛血清白蛋白残留量、Vero细胞DNA残留量及片段大小，为该疫苗的杂质质量控制提供依据。方法 采用ELISA分别检测30批单价病毒原液中猪胰蛋白酶残留量和牛血清白蛋白残留量；用磁珠提取法纯化30批单价病毒原液中残留Vero细胞DNA，分别采用荧光染色法和毛细管凝胶电泳法检测Vero细胞DNA含量、DNA片段大小及分布。结果 在已检测的30批单价病毒原液中，猪胰蛋白酶残留量为3.8～7.2 μg/mL，牛血清白蛋白残留量为85～268 ng/mL，Vero细胞DNA残留量为48～115 μg/mL，Vero细胞DNA片段大小分布在201～2 000 bp的占比为73.4%～91.9%。结论 口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）单价病毒原液的杂质残留可控。

目的 通过比较13价肺炎球菌多糖结合疫苗在BALB/c、KM、CD1小鼠品系体内的免疫应答，评价该疫苗的最佳小鼠免疫原性模型及此模型的最佳小鼠性别及免疫剂量。方法 将13价肺炎球菌多糖结合疫苗分别以每针次0.05、0.10、0.20、0.40 μg的剂量免疫3个品系小鼠，采用ELISA分析免疫应答差异以评价最佳小鼠模型；比较4个剂量在最佳小鼠模型中的雌雄小鼠应答差异以评价最佳小鼠性别；比较4个剂量免疫最佳性别的最佳小鼠模型以评价最佳免疫剂量。 结果 3个品系中，多数血清型在CD1小鼠中免疫应答值最高，KM小鼠应答最弱。在CD1小鼠品系中剂量与免疫应答之间有明显量效关系。4个剂量免疫CD1雌雄小鼠，0.05 μg剂量时免疫应答值均较低，在0.10、0.20、0.40 μg剂量时，几乎所有血清型在雌性小鼠中产生的免疫应答值均高于雄性小鼠。4个剂量免疫CD1雌性小鼠，除3、9V、19F、23F型外，其余血清型在0.20 μg剂量产生的免疫应答值均明显高于其他3个剂量。结论 评价13价肺炎球菌多糖结合疫苗免疫原性的最佳小鼠模型为雌性CD1小鼠， 最佳免疫剂量为0.20 μg。

目的 建立毛细管区带电泳方法，检测A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗的多糖含量和多糖分子大小分布。方法 建立检测4种多糖的毛细管区带电泳方法，并探究最佳分离电压和温度。通过单次实验同时表征4种多糖，分别检测4种多糖含量以及多糖分子大小分布，并验证方法的线性、准确度、重复性和专属性。结果 当4种多糖的含量在0.081 3~0.487 5 μg/μL之间时，毛细管区带电泳方法线性良好，决定系数＞0.98；检测低、中、高3个浓度样品，回收率在95%~110%，6次实验相对标准偏差＜2.0%，在目标峰位置无杂峰出现。结论 毛细管区带电泳法检测4种脑膜炎球菌多糖具有良好的线性、准确度、重复性、专属性，适合A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗多糖含量和多糖分子大小分布的检测。

目的 分析肠道病毒71型（enterovirus A71，EV-A71）灭活疫苗上市后我国手足口病（hand foot mouth disease，HFMD）的病原体、重症病例及人群分布特征情况，为HFMD的预防及控制提供参考。方法 纳入中国知网中2016—2025年公开发表、明确涉及EV-A71疫苗应用效果评价且包含疫苗应用前后病原体的变化、重症病例或发生率、人群分布特征等基础数据的文献，采用卡方检验对其结果进行综合分析。结果 EV-A71灭活疫苗推广使用前、后，HFMD病例的人群分布均表现为散居儿童占比最高、幼托儿童次之、学生及其他人群占比最低；EV-A71疫苗应用后，散居儿童在HFMD病例中的构成较疫苗应用前下降了11.35%，幼托儿童增加了25.62%，学生及其他占比增加了61.38%，疫苗应用前后3组人群分布差异均具有统计学意义（χ²=15 659.45、11 208.25、3 587.36，P<0.001）。EV-A71疫苗推广使用后，EV-A71所致HFMD病例平均减少了56.17%，而柯萨奇病毒A组16型（coxsackie virus A16，CVA16）及其他肠道病毒所致病例平均分别增加了8.08%和62.37%，差异均有统计学意义（χ²= 41.94、310.80、39.37，P<0.001），非EV-A71肠道病毒（如CVA16、CVA6及CVA10等）成为优势病原体。疫苗应用后，重症病例平均减少了42.70%、重症病例中EV-A71所致者占比下降17.89%，差异均有统计学意义（χ²=4 087.32、4 215.92，P<0.001）；疫苗使用后仍有约59%的重症病例由EV-A71感染所致，提示EV-A71依然是导致危重型HFMD的最主要病原体。结论 EV-A71疫苗极大降低了HFMD的重症发生率，EV-A71仍然是导致重症病例的主要病原体，同时CVA16、CVA6及CVA10等非EV-A71肠道病毒已经成为优势病原体。

目的 评估人凝血因子Ⅸ（human coagulation factor Ⅸ, FⅨ）在血友病B患者中单次静脉注射的药代动力学参数，并初步分析其临床意义。方法 在1项单臂、开放标签、多中心临床试验研究中，13例25～64岁男性血友病B患者在非出血状态下接受FⅨ 50 国际单位(international unit, IU)/kg单次静脉注射，给药前2 h及给药后15、30 min和1、3、9、24、48、72、96 h采血检测FⅨ活性，采用非房室模型计算FⅨ的药代动力学参数。给药后30、90 d检测患者的FⅨ抑制物。结果 FⅨ单次静脉注射15 min～1 h后，所有患者血浆FⅨ浓度达到峰值（51.5～69.3 IU/dL）。根据FⅨ基线水平校正的药代动力学参数（均值±标准差）为：达峰时间（0.37±0.22） h，消除半衰期（29.732±4.576） h，峰浓度（58.3±5.3） IU/dL，清除率（0.028±0.006） dL/kgh，血药浓度-时间曲线下面积（零时至最后时间点）（1 626.189±285.365） %h，增量回收率（1.166±0.106） IUdL^-1/IUkg^-1。给药后1 h，所有13例患者的FⅨ活性在40%～60%；给药后3 h，有12例患者FⅨ活性维持在40%～60%；给药后9 h，仍有8例患者FⅨ活性处于40%～60%。13例患者均未检测到FⅨ抑制物。结论 血友病B患者在单次静脉注射FⅨ 50 IU/kg后，主要药代动力学参数，如消除半衰期及清除率等的结果表明其能在体内维持有效的血药浓度，此结果可用于进一步临床研究以评估替代治疗的疗效。

目的 分析青岛市预防乙型肝炎（乙肝）病毒母婴传播措施的阻断效果，探讨相关影响因素。方法 以青岛市2021年完成分娩的869例乙肝病毒感染产妇及其生产且完成乙肝血清学标志物检测的儿童（乙肝暴露儿童）为研究对象，通过随访及问卷调查，获得乙肝母婴传播率及家长对乙肝母婴传播知识的知晓情况，以单因素和多因素逻辑回归方法分析阻断失败的影响因素。结果 共调查乙肝暴露儿童869名，乙肝母婴传播率为0.69%。乙肝暴露儿童未完成全程乙肝疫苗接种〔比值比（odds ratio,OR）=0.030，95%置信区间（confidence interval，CI）：0.004~0.232〕和母亲胎膜早破（OR=9.570，95% CI：1.343~68.201）可能是导致乙肝母婴传播的独立危险因素。乙肝病毒表面抗原研究组和对照组儿童家长对妊娠期必要性用药可以减少母婴传播风险、乙肝暴露儿童接种全程乙肝疫苗后需要进行检测、乙肝疫苗接种流程、接种次数以及乙肝暴露儿童出生后的干预阻断措施知晓情况存在差异。结论 加强孕期保健、减少胎膜早破的发生、对乙肝暴露儿童出生后及时实施联合免疫策略和全程疫苗接种程序，可显著提升母婴阻断效能。针对重点人群加强宣教、提高预防乙肝相关知识的知晓率是降低乙肝母婴传播的有效途径。

目的 通过对变更稳定剂的乙型脑炎减毒活疫苗进行SD大鼠长期毒性试验，评价疫苗的非临床安全性。方法 分别向160只SD大鼠皮下注射3次变更稳定剂前后的乙型脑炎减毒活疫苗或氯化钠注射液（阴性对照），对动物进行临床观察，体重、食量、血细胞计数、血液生化、体温、临床病理、T淋巴细胞亚群和特异性IgG抗体的检测及尿液分析、眼科检查。结果 实验期间，动物未见明显与给药相关的异常反应。虽然部分疫苗组别与阴性对照组相比，体重增长、食量、血细胞计数、血液生化指标差异均有统计学意义（t=2.03~4.26，P =0.011~0.042），但未见与稳定剂变更相关的异常改变，体温、凝血功能、T淋巴细胞亚群未见具有统计学意义的改变（t=1.35~1.98，P =0.052~0.186）。至恢复期结束时，所有疫苗组的所有动物仍可检测到抗体，各抗体效价未见明显降低。末次给药后3 d和恢复期结束时，阴性对照组及所有疫苗组安乐死动物的大体观察、组织病理学检查均未见明显异常改变。变更前后疫苗的毒性反应、局部刺激性和免疫原性未见明显不同。结论 变更稳定剂后的乙型脑炎减毒活疫苗的大鼠长期毒性试验结果符合动物安全性评价要求。

2型糖尿病是全身性胰岛素抵抗、胰岛β细胞功能减退的内分泌代谢性疾病。目前，2型糖尿病患者以代谢紊乱的复合型肥胖患者居多。司美格鲁肽是胰高血糖素样肽-1受体激动剂，可通过多重机制，如抑制食欲、延缓胃排空、改善胰岛功能等实现血糖控制与体重减轻，在2型糖尿病治疗领域应用广泛。此文对司美格鲁肽治疗2型糖尿病的作用机制、研究进展、临床应用中遇到的问题及建议等进行综述，旨在为其临床应用提供参考。

骨损伤是临床常见病，现有的临床治疗方法对一些骨损伤疑难病症治疗效果不佳。骨组织工程学的研究成果可提供解决该问题的新方案。当前应用较为成熟的骨组织工程损伤修复方法之一是骨髓间充质干细胞移植治疗技术，该细胞的临床应用还存在若干问题，如种子细胞来源困难、缺乏同种异体干细胞种子细胞或通用型种子细胞等。近期研究发现，外周血单核细胞不仅具有多向分化的潜能，同时增殖能力强且材料易得，可作为骨损伤修复的优选替代材料。此文综述了单核细胞及其在骨损伤修复中发挥的作用及作用机制，以期为骨损伤患者提供更加有效且无毒副作用的新治疗方法，提高其生活质量。

目的 建立13价肺炎球菌结合疫苗解吸附处理总蛋白含量测定方法并验证。方法 13价肺炎球菌结合疫苗经解吸附处理，利用Lowry法对其总蛋白含量进行测定，对建立的方法进行线性、准确度、重复性及耐用性验证。结果 适宜的解吸附条件为加入10%体积的0.3 mol/L NaOH。在蛋白标准品40~200 μg/mL范围内，标准曲线线性良好，决定系数>0.995； 20、40、60、80、120 μg/mL的蛋白标准品回收率在95.25%~104.77%之间，方法准确度良好；样品在不同时间重复测定6次的实验结果相对标准偏差为3.82%，方法重复性良好；解吸附后室温下分别放置15和30 min，测定结果之间差异无统计学意义（t值分别为0.059和0.238，P值>0.05），且测定结果的相对标准偏差分别为4.82%和5.14%，方法耐用性良好。结论 建立的方法可有效、准确、稳定地检测13价肺炎球菌结合疫苗中总蛋白含量。

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis, AS）是主要侵犯骶髂关节、脊柱及临近肌腱、软组织的慢性自身免疫性疾病。AS的典型病理演变含免疫炎症驱动应答、骨破坏与新骨形成等环节，这些环节在同一部位反复发作，最终导致关节逐渐僵直变形。此文从IL-17在AS中的致病机制、调控作用以及研究现状等方面进行论述，阐明IL-17作为靶点在AS治疗中的优势，为IL-17相关药物的开发以及AS的治疗奠定基础。

作为分子生物学领域重要的核酸定量技术，数字PCR因其高灵敏度、高精确度以及高特异性等优势，近年来在病原体检测、基因编辑检测以及疾病诊断等领域得到了广泛应用。此文综述了数字PCR的基本概念、原理及其在生物检测领域的应用进展，以期为研究人员选择合适的检测方法提供参考。

目的 建立检测异嗜性小鼠白血病病毒（xenotropic murine leukemia virus，X-MuLV）的实时荧光定量反转录PCR（real time fluorescent quantitative reverse transcription PCR，RT-qPCR）方法，并进行验证及初步应用。方法 根据美国典型培养物保藏中心提供的X-MuLV基因组序列，设计特异性引物并构建包含靶序列的质粒和RNA片段；使用数字PCR定量并经连续稀释后作为标准品，建立RT-qPCR检测方法。对建立的方法进行灵敏度、特异性、准确度、精密度和耐用性验证。应用建立的方法对纳米膜过滤及阳离子层析工艺去除逆转录病毒的能力进行评估，并与致细胞病变法的评估结果进行比较。结果 建立定量检测X-MuLV的RT-qPCR方法，该方法在2.5×10¹~2.5×10⁸拷贝/μL范围内线性良好，扩增效率为98%；检测灵敏度为2.5×10¹拷贝/μL；与实验室中其他常用病毒不发生交叉反应；重复性和中间精密度验证的变异系数均不高于1%；蛋白添加及缓冲液组分对样品中病毒检测结果不产生基质效应。应用该法检测纳米膜过滤工艺中指示病毒X-MuLV的去除率，处理前后病毒下降量≥4 lg 拷贝，可认定纳滤法能够有效清除病毒，结论与致细胞病变法检测结论一致。应用于复合式阳离子交换层析时RT-qPCR方法检测结果可反映病毒清除过程中病毒颗粒分布情况。结论 建立的RT-qPCR方法检测X-MuLV灵敏度、特异性、准确度、精密度和耐用性良好，适用于生物制品生产工艺的病毒清除验证工作。

目的 研究人凝血因子Ⅸ（human coagulation factor Ⅸ，FⅨ）制品的溶血性和血管刺激性。方法 根据国家药品审评中心发布的《药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》规定，针对FⅨ产品，采用体外试管法评价药物的溶血性；采用同体左右侧自身对照法，经耳缘静脉注射1.6 mL/kg的FⅨ或生理盐水7 d，开展家兔刺激性实验。结果 FⅨ在50国际单位（international unit，IU）/mL的浓度下未引起溶血和红细胞凝聚反应；家兔给药及停药恢复期间，一般情况观察未见明显异常，血管刺激评分均为0分；家兔停药恢复14 d，血管刺激评分均为0分；家兔末次给药后96 h及停药恢复期14 d结束，病理得分均值均为0分。结论 50 IU/mL浓度的FⅨ对家兔不产生溶血性和血管刺激性。

近年来，双特异性抗体（双抗）通过提高免疫细胞靶向杀伤能力、阻断多信号通路产生协同作用等方式，在肿瘤免疫治疗领域呈现独特的治疗潜力。全球范围内，目前有＞200种用于抗肿瘤的双抗药物处于临床研究阶段，15种双抗获批用于治疗恶性血液肿瘤或实体瘤。双抗虽在恶性血液肿瘤中的治疗效果较好，但在实体瘤治疗中，如靶点选择、药物递送、安全性以及耐药性等方面仍面临诸多挑战。此文总结了已上市双抗在肿瘤治疗中的临床应用及研究进展，以为双抗药物的研发及临床应用提供参考。

目的 比较胰蛋白酶及胰蛋白酶类似物TrypLE对Vero细胞、2BS细胞、MDCK细胞的消化效果，以确定其在细胞培养及消化中的适用性。方法 分别用胰蛋白酶和TrypLE消化Vero细胞、2BS细胞、MDCK细胞，分析细胞消化时间、分散效果、消化残留情况、细胞计数、细胞活率，比较不同消化酶消化效果。将消化后细胞分别接种至细胞工厂和篮式生物反应器中进行培养，培养期间每天观察细胞工厂中细胞的形态以及汇合度，检测篮式生物反应器中细胞的贴附效果及葡萄糖消耗量。结果 使用胰蛋白酶和TrypLE消化Vero细胞及2BS细胞时，在消化时间、细胞计数及细胞活率方面差异均无统计学意义（t=﹣0.46~3.46,P=0.074~0.885），分散效果、消化残留情况相似。使用TrypLE消化MDCK细胞的时间明显长于使用胰蛋白酶，差异有统计学意义（t=13.28，P＜0.01），且消化效果较胰蛋白酶差。3种细胞消化后在细胞工厂再培养时，均形态规则，汇合度良好。在篮式生物反应器再培养时，3种细胞3 h内贴附率均在80%以上，且葡萄糖总代谢量差异无统计学意义（t=﹣1.05~1.01，P=0.405~0.783）。结论 TrypLE可以替代胰蛋白酶用于Vero细胞和2BS细胞的消化过程，而胰蛋白酶对MDCK细胞的消化效果更好。

目的 对商业化规模生产场地变更前后的口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）进行单次给药毒性和重复给药毒性实验，以考察非临床安全性的可比性。方法 分别采用商业化规模生产场地变更前后的轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞），对SD大鼠以6 mL/只的剂量（临床拟用剂量为2.0 mL）经口灌胃给药，评价疫苗急性毒性。分别以2 和6 mL/只的剂量于第1、15、29、43天重复灌胃给药4次（恢复期4周），评价疫苗长期毒性。结果 单次给药毒性实验中，生产场地变更前后的疫苗最大耐受量均为6 mL/只，按体重折算，为人拟用剂量的50~200倍；变更前后疫苗组的动物第0—14天体重增长和日进食量均值均与同期对照组相近，分别为每只33~44 g（雌）、109~123 g（雄）和18~20 g（雌）、25~29 g（雄）。重复给药毒性实验中，未观察到不良反应的剂量水平为6 mL/只，低、高剂量组变更前后疫苗的动物体重、日进食量均值和体温的变化趋势均与同期对照组相似；实验动物的血液与生化指标也均未见与生产场地变更相关的异常改变。在同等给药剂量下，各疫苗卫星组血清IgG抗体的阳转率差异（P值为0.474~1.000）和几何平均滴度差异（t值为0.05~0.85，P值为0.442~0.965）均不具有统计学意义，且变化趋势一致；变更前低、高剂量疫苗卫星组血清IgG抗体阳转率和几何平均滴度（1∶lgx）最高水平分别为80.0%、80%和1.61、1.81，变更后分别为90.0%、100.0%和1.79、1.91；实验动物脏器及组织病理学切片均未见与生产场地变更相关的异常改变。结论 商业化规模生产场地变更前后的口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）在SD大鼠体内均显示出良好的安全性，二者的单次给药毒性和重复给药毒性均具有可比性。

目的 研究不同灭菌次数处理后磷酸铝佐剂的理化性质，并评估不同灭菌次数处理的磷酸铝佐剂对6A型肺炎球菌多糖破伤风类毒素（tetanus toxoid，TT）结合物（6A-TT）在小鼠中免疫原性的影响。方法 将自制磷酸铝佐剂分别灭菌1、2和3次，考察其粒径大小及分布、pH、等电点、游离磷酸根离子含量、磷铝摩尔比和蛋白吸附率。通过免疫CD1小鼠，评估经不同灭菌次数处理的磷酸铝佐剂与6A-TT配伍后对实验动物产生的特异性抗体滴度的影响。结果 磷酸铝佐剂灭菌1、2和3次后的50%分布粒径（Dv50）分别为5.04、5.22和5.12 μm，Dv90分别为9.20、9.87和10.60 μm，pH分别为4.6、4.3和4.3，等电点分别为5.48、5.36和5.29，游离磷酸根离子含量分别为4.12%、4.79%和4.86%，磷铝摩尔比分别为1.012、0.972和0.944，对TT的吸附率分别为92.7%、87.8%和85.7%，对6A-TT的吸附率分别为93.8%、91.6%和90.1%。磷酸铝佐剂在灭菌1、2和3次后分别吸附6A-TT，均能诱导小鼠产生抗体，其几何平均滴度分别为1 213、985和1 056。结论 灭菌次数的增加会导致磷酸铝佐剂的等电点和pH下降，游离磷酸根含量升高，磷铝摩尔比和蛋白吸附率降低，并可能影响6A-TT中抗原在小鼠体内的免疫原性。

季节性流感对全球公共卫生构成持续性威胁，尤其对老年人、儿童、孕妇、慢性病患者及免疫缺陷者等高风险人群造成显著疾病负担。现有流感疫苗的效力虽受当季流行毒株匹配度影响，但对高风险人群的保护效益已获循证支持。当前，我国流感疫苗免疫接种率远低于发达国家，亟需通过政策支持与新技术开发进一步提升高风险人群的疫苗接种率，减轻流感疾病负担。此文系统综述了流感疫苗在高风险人群中的保护证据，重点探讨了灭活疫苗、减毒活疫苗、重组蛋白疫苗及佐剂疫苗等不同类型疫苗在高风险人群中的有效性及适用性，同时分析了重复接种效果、群体免疫作用及接种策略优化，为提升高风险人群保护效果提供参考。

免疫代谢是探索免疫细胞和新陈代谢相互作用的新兴领域。近年来，免疫代谢在自身免疫和自身免疫性疾病中的作用日渐受到关注，尤其是细胞代谢如何影响免疫细胞功能和应答。目前认为，免疫细胞信号转导和分化过程可以决定免疫细胞的行为方式，控制许多代谢途径，从而影响免疫细胞的功能和应答。此文主要介绍了免疫细胞的代谢在系统性红斑狼疮、1型糖尿病和类风湿关节炎等自身免疫性疾病中的改变，阐述了免疫代谢如何影响疾病发生、加重或缓解，并总结了靶向免疫代谢通路以调控免疫应答的相关药物及研究进展。

目的 探究不同供应商来源动物在同一生物制品异常毒性试验中的差异，并通过增加血常规分析探讨异常毒性试验的科学性与合理性。方法 参考中国药典2025年版三部通则1141异常毒性检查法，通过分析免疫不同疫苗后动物的体重及血常规结果，对不同供应商来源的动物进行差异性比对。结果 B供应商的NIH小鼠在疫苗组与对照组中的体重增长趋势均低于当前供应商（A供应商）且差异有统计学意义（t=2.64~7.07，均P<0.05）；C供应商与A供应商差异不明显。血常规结果显示，B供应商NIH小鼠两种疫苗组的红细胞数均明显高于A供应商的（t=2.44~4.07，均P<0.05），且多项白细胞指标与A供应商有明显差异（t=2.31~5.96，均P<0.05）；C供应商仅少数指标与A供应商有差异。将新增的D、E豚鼠供应商与现有评估合格的豚鼠供应商（B供应商）进行比较，3个供应商来源Hartley豚鼠对照组与疫苗组的体重生长趋势均一致，血常规结果也无明显差异。结论 B供应商的NIH小鼠与A、C供应商的小鼠存在明显差异，B、D、E供应商的Hartley豚鼠无明显差异。动物自身的差异可能影响异常毒性试验结果的判定，将异常毒性试验作为疫苗批次放行的检测手段，其合理性值得探讨。

目的 调查宣城市水痘流行特征及突破病例情况，为疫情防控提供依据。方法 通过中国疾病预防控制信息系统水痘疫情报告卡收集宣城市2021—2023年水痘病例信息，采用描述流行病学方法分析流行病学特征。结果 2021—2023年，宣城市共报告水痘病例6 979例，年均报告发病率93.44/10万（χ²=122.80，P＜0.001）。水痘发病具有显著的季节性，每年5—7月为发病小高峰，10月至次年1月达到最高峰。年均发病率居前3位的县（市）依次为绩溪县、宁国市、泾县。男性发病人数略高于女性；发病年龄以14岁以下为主；职业以学生及托幼儿童为主。 突破病例2 652例，占总病例的38.00%。男性突破病例多于女性，秋季突破病例占比最高。在接种疫苗后的11年内，距离接种时间越长，突破病例越多。聚集性疫情中的突破病例占关联病例的68.45%，明显高于散发病例中的突破病例占比。突破病例以7～13岁学生为主。结论 宣城市水痘发病率有上升的趋势，学校及托幼机构是水痘疫情防控的重点场所；应防止聚集疫情发生，提高2剂次水痘疫苗接种，减少突破病例发生。CDC应加强疫情监测，做好疫情报告审核，针对性开展培训和健康宣教，建立有效的免疫屏障，以降低水痘发病。

目的 评估3种Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗生产用片状载体的使用效果，为该疫苗生产工艺中载体的选择提供依据。方法 采用15 L篮式生物反应器体系，分别搭载A、B、C 3种片状载体进行Vero细胞培养并制备Sabin株脊髓灰质炎病毒液，考察并比较Vero细胞接种于片状载体后0~3 h的细胞贴附率、8 d培养周期的葡萄糖代谢特征、病毒收获液病毒滴度及D抗原含量等指标。结果 接种3 h后A、B、C 3种载体的细胞贴附率均达到90%以上。3组细胞均呈现典型S型葡萄糖消耗曲线，载体A和B组累计消耗量分别为（191.1±7.6） g和（192.9±5.3） g，差异无统计学意义（F=43.23，P=0.060），二者均高于C组的（153.1±4.4） g且差异有统计学意义（F=43.23， P<0.001）。载体B组D抗原含量为（777.0±12.5） D抗原单位（D-antigen unit，DU）/mL，病毒滴度为（8.2±0.1） lgCCID₅₀/mL，略高于载体A组〔（773.3±10.8） DU/mL，（8.1±0.2） lgCCID₅₀/mL〕，差异无统计学意义（F分别为209.00、27.30，P分别为0.946、0.708），而载体C组2项指标〔（598.3±14.2） DU/mL，（7.2±0.2） lgCCID₅₀/mL〕低于载体B组，差异有统计学意义 （F分别为209.00、27.30，P均小于0.001）。结论 载体A和载体B在Vero细胞代谢活性维持与病毒复制方面均较有优势。

目的 评价阿达木单抗注射液的运输稳定性。方法 以武汉市至哈尔滨市作为公路运输起止点，进行1次往返运输，模拟药品运输过程的最差条件，以考察非温度因素条件下的药品稳定性。以极端温度及温度循环等破坏性试验来模拟药品脱冷链后的情况，通过检测阿达木单抗注射液常规质量检定项目考察药品温度偏移稳定性。结果 运输后3批次药品内包材均完整，破瓶率为0%，所有检测项目均符合企业标准，药品运输前后差异无统计学意义(t=﹣3.23~4.00,P=0.057~0.840)。3批次药品分别在(40±2) ℃、(﹣20±5) ℃条件下放置7 d后所有检测项目均符合企业标准。其中药品在(40±2) ℃条件下放置7 d后，分子排阻色谱法测定的单体含量和离子色谱法测定的纯度与2~8 ℃及(﹣20±5) ℃下的差异均有统计学意义(t=﹣142.00~97.00，P=0.000~0.020)。(﹣20±5) ℃条件下放置7 d后，药品所有检定项目与2~8 ℃条件下差异均无统计学意义(t=0.70~3.46，P=0.074~0.556)。3批次药品经过3次冻融后所有检测项目均符合企业标准，与未经冻融试验样品差异无统计学意义(t=﹣4.06~1.73，P=0.056~0.478)。结论 在本实验条件下长途运输非温度因素对药品的质量没有影响，药品在短期内温度偏移对药品的质量影响较小。

目的 验证细胞种属鉴别（多重PCR）法，并应用于多种不同种属来源的细胞鉴别。方法 使用细胞种属鉴别检测试剂盒（多重PCR法）提取细胞基因组DNA，用混合引物对靶基因进行扩增，采用多重PCR联合琼脂糖凝胶电泳技术，根据扩增产物的条带大小及数量进行物种鉴定及交叉污染检测，并考察该方法对5种不同来源细胞的检测限、专属性和耐用性。结果 细胞种属鉴别（多重PCR）法对Hep-2细胞（人）、犬肾细胞、Vero细胞（非洲绿猴）、L929细胞（小鼠）的检测限为500个细胞，对中国仓鼠卵巢细胞的检测限为5 000个细胞。对每种细胞设计不同来源的细胞进行交叉污染，主细胞及污染细胞均能检出，且能够检测出1‰水平的细胞污染。将5种细胞的基因组DNA提取液分别于﹣18 ℃保存1、3、7 d，扩增结果均一致。结论 该细胞种属鉴别（多重PCR）法灵敏度高、特异性强且快速便捷，有助于提高生物制品生产用细胞基质的质量控制水平。

随着微针技术的快速发展，微针逐渐成为新兴的疫苗递送方式，其具有微创、无痛、自给药、节省剂量、增强免疫应答等优势。免疫原性评价对疫苗的研发至关重要，目前尚无对微针疫苗免疫原性评价方法的系统性总结。此文概述了微针疫苗免疫应答的特点，系统梳理和讨论了用于评价微针疫苗免疫原性的各种方法及关键指标，并对新兴免疫原性评价方法在微针疫苗领域的应用进行了探讨和展望。

目的 对靶向唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15（sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin 15, Siglec-15）的全人源单克隆抗体23F4进行关键结合位点鉴定和生物学功能的初步评价。方法 对Siglec-15进行丙氨酸扫描突变，鉴定23F4的关键结合位点，再通过ELISA和流式细胞术对23F4的体外生物学功能进行探究，最后构建2种小鼠肿瘤模型以评价23F4的体内抗肿瘤功能。结果 鉴定得到23F4的关键结合位点（R71/H72残基）。在体外检测中23F4具有较高的结合活性，半数效应浓度为68.42 ng/mL，在中、低浓度下与Siglec-15阳性细胞的结合活性优于对照抗体，并且23F4能够阻断Siglec-15与受体的结合，解除T细胞的增殖抑制，在2种小鼠肿瘤模型中均具有抑制肿瘤生长的功能。结论 靶向Siglec-15的单克隆抗体23F4具有新型结合位点，能够解除Siglec-15介导的免疫抑制。

目的 分析2016—2025年安徽省水痘减毒活疫苗(varicella attenuated live vaccine, VarV)疑似预防接种异常反应（adverse event following immunization，AEFI)特征。方法 分别通过中国疾病预防控制信息系统和安徽省免疫规划信息管理系统收集安徽省 2016—2025 年VarV AEFI个案数据和VarV接种剂次数，采用描述性流行病学方法分析AEFI报告发生率和分布特征。结果 2016—2025年安徽省共报告VarV AEFI 2 408例，年均报告发生率为329.46/100万剂，一般反应、异常反应报告发生率分别为308.46/100万剂、17.80/100万剂。男性占53.74%，≤1岁占64.70%，皖北地区占61.17%，24 h内发生占78.15%，第1剂次占77.24%。在异常反应中，过敏性皮疹占90.77%，年均报告发生率为16.16/100万剂。结论 安徽省VarV AEFI以一般反应为主，异常反应极罕见，VarV安全性总体良好。

目的 基于美国疫苗不良事件报告系统数据，分析人用狂犬病疫苗（rabies vaccine for human use，RVFHU）相关不良事件，评估其安全性。方法 选取美国疫苗不良事件报告系统中2019年1月1日至2023年9月15日的RVFHU相关报告，采用描述性统计方法分析不良事件分布特征，应用不相称测定法检测疫苗安全性信号。结果 共纳入794例不良事件报告（2 606例次临床症状）。临床症状以产品使用问题最多，系统器官分类中全身性疾病及给药部位症状占比最高。一般不良事件和严重不良事件构成比方面，接种剂次的构成比差异有统计学意义（χ²=10.25，P<0.05），而性别、年龄、发生时间的构成比差异均无统计学意义（χ²=0.32、2.58、2.02，P>0.05）。安全性信号检测发现59条阳性信号，涉及产品使用、免疫系统异常、精神病类反应等方面。结论 RVFHU相关不良事件多为产品使用问题或一过性轻度反应；检测出的阳性信号数据较少，尚需进一步研究验证。

目的 分析安徽省实施国家免疫规划吸附白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗（diphtheria-tetanus-acellular pertussis vaccine，DTaP）新免疫策略前后的疑似预防接种异常反应（adverse event following immunization，AEFI）发生情况和分布特征，为新免疫策略的安全性评估提供依据。方法 收集中国疾病预防控制中心免疫规划信息管理系统中安徽省2024年（策略调整前）和2025年（自1月1日起实施新策略，即策略调整后）的AEFI监测数据，从安徽省免疫规划信息管理系统获取同期DTaP接种剂次数。采用描述性流行病学方法分析DTaP AEFI的分布特征及发生率，采用χ2检验或Fisher确切概率法比较策略调整前后的差异。结果 2024—2025年安徽省共接种DTaP 2 375 028剂，报告AEFI 4 958例，总发生率为208.76/10万剂。策略调整后，一般反应发生率由186.69/10万剂上升至221.37/ 10万剂（χ2=32.50，P<0.001）；异常反应发生率由0.66/10万剂下降至0.20/10万剂，降幅约69.70%。首剂接种年龄提前至2月龄后，第1剂次的AEFI发生率由170.57/10万剂降至119.65/10万剂（χ2=24.76, P<0.001）；6周岁剂次由白喉-破伤风疫苗调整为DTaP后，未监测到异常反应病例，发生率0.00/10万剂（95% 置信区间: 0.00~0.83/10万剂）。结论 安徽省DTaP AEFI以一般反应为主，异常反应报告率极低。免疫策略调整后首剂提前至2月龄明显降低了AEFI发生率，有利于尽早建立免疫屏障；6周岁加强剂次改用DTaP后未监测到异常反应，表明本研究观察期内核心安全性指标表现良好。2、4、6、18月龄及6岁接种5剂次DTaP的新策略在本研究观察期内显示出较好的安全性。

目的 建立并验证检测阿达木单抗电荷变异体的阳离子交换高效液相色谱法。方法 采用以羧基官能团的弱阳离子为固定相的交换柱（4 mm×250 mm），以0.01 mol/L 磷酸氢二钠溶液、pH 7.5为流动相 A，以0.01 mol/L 磷酸氢二钠+0.5 mol/L 氯化钠溶液、pH 5.5为流动相 B进行梯度洗脱。按面积归一法计算赖氨酸变异体和酸性组分含量，并对该方法进行专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度和耐用性验证。结果 该方法检测阿达木单抗注射液可见溶剂峰和目标峰；重复检测6次各组分相对标准偏差均＜2%；不同实验员、不同实验设备检测各组分的相对标准偏差均＜2%；赖氨酸变异体之间的峰的定量限（信噪比＞10）为100 μg/mL、检测限（信噪比＞3）为30 μg/mL；在企业质量标准限度范围内检测不同浓度各组分线性良好，决定系数均＞0.99；第1酸区峰、赖氨酸变异体之间的峰和赖氨酸变异体2峰准确度回收率均在80%～115%，第2酸区峰、主峰和赖氨酸变异体1峰准确度回收率均在85%～110%；不同流动相pH、不同流动相氯化钠浓度、不同流速与柱温、不同批次色谱柱条件下检测结果符合要求，一致性较好。结论 建立的方法具有良好的专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度和耐用性，适用于阿达木单抗电荷变异体的测定。

目的 建立并验证人生长激素（human growth hormone，hGH）注射液中壬基酚浸出物超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)检测方法。方法 参照人用药品注册技术要求国际协调会杂质相关指导原则，计算壬基酚安全限度值；采用UPLC-MS/MS法检测hGH注射液中壬基酚浸出物含量，并对该方法的线性、专属性、定量限、准确度、精密度、稳定性和耐用性进行验证。用建立的方法对3批hGH注射液进行检测。结果 壬基酚的安全限度值为4.5 μg/瓶。壬基酚浓度在8.2~65.5 μg/L范围内时，峰面积与浓度线性关系良好；空白溶液中未检测到壬基酚；定量限为1.2 μg/瓶；低、中、高水平加标样品的平均回收率均在70%~125%之间，相对标准偏差（relative standard deviationg, RSD）均＜15%；重复性和中间精密度RSD均＜15%；供试品溶液中壬基酚在室温下20 h内稳定；色谱条件中的流速设为0.27和0.33 mL/min时，6次检测壬基酚峰面积RSD＜10%；3批样品的检测结果远低于4.5 μg/瓶的限值。结论 成功建立了hGH注射液中壬基酚浸出物的UPLC-MS/MS检测方法，该方法的线性、专属性、定量限、准确度、精密度、稳定性和耐用性良好。

目的 建立并验证重组人干扰素α1b等电点（isoelectric point，pI）全柱成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis，iCIEF）检测方法。方法 用iCIEF检测重组人干扰素α1b的pI，对iCIEF的样品中尿素添加浓度以及等电聚焦时间进行确认，并依据人用药品技术要求国际协调理事会Q2（R2）要求对该检测方法进行方法学验证，包括专属性、准确度、重复性、中间精密度和耐用性。结果 最终选择等电聚焦条件为3 000 V等电聚焦3 min，样品检测时添加尿素终浓度为1 mol/L。空白对照（醋酸盐缓冲液）对重组人干扰素α1b pI的检测没有干扰，重组人干扰素α1b等电聚焦产生2个峰，峰1 pI约为5.4，峰2 pI约为5.5；经验证该检测方法专属性、准确度、重复性、中间精密度和耐用性均良好。结论 建立的iCIEF检测方法可以用于重组人干扰素α1b pI的检测，可为该产品的质量控制提供参考。