目的  采用40层细胞工厂(40-layer cell factory, CF40)工艺培养原代地鼠肾(primary hamster kidney, PHK)细胞，优化乙脑减毒活疫苗的生产工艺。 方法  用不同浓度新生牛血清培养不同接种密度PHK细胞，比较各组PHK细胞数量，确定CF40工艺的PHK细胞接种密度和新生牛血清浓度。通过对比CF40和15 L转瓶采用不同新生牛血清的PHK细胞培养情况，比较两种工艺对新生牛血清的选择性。对4个厂家CF40培养的PHK细胞数量进行单因素方差分析，判定对CF40的选择性。结果  CF40工艺的最有条件为PHK细胞接种密度为6.1×10⁵ ml^-1、新生牛血清浓度6%。CF40工艺对新生牛血清的选择性较低，能比转瓶工艺更稳定地培养更多的PHK细胞。4个厂家CF40培养的PHK细胞数量之间的差异无统计学意义（F=0.23，P＞0.05），对CF40选择性低。 结论  采用CF40可以制备出满足乙脑减毒活疫苗生产要求的PHK细胞。

目的 研究兔抗肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）血清制备中不同免疫剂量对抗体效价的影响。方法 将9只实验兔简单随机分为3组，每组3只。5、50和100 μg 3个剂量EV71灭活疫苗和弗氏佐剂均匀混合后，通过肌内注射途径分别免疫3组动物，于第0、7、14及28天各免疫1次，每7天采血，分离血清，检测抗EV71中和抗体效价。结果 100 μg剂量组兔血清抗体效价显著高于5和50 μg剂量组（第42天t值分别为–3.282和–2.486，P值均<0.05）。第42天时，兔血清抗体效价和免疫剂量（5~100 μg范围内）呈线性关系，回归方程y=478.229x–2 041.820。结论 在本实验选择的3个免疫剂量中，随着免疫剂量升高，产生的血清抗体效价也升高，且呈线性关系。

目的  探索磁力搅拌器的搅拌频率对水痘减毒活疫苗（水痘疫苗）半成品滴度的影响。方法  设置3种不同的搅拌方案配制一定体积的水痘半成品，通过对比水痘疫苗半成品滴度，选取较好的搅拌方案。根据筛选出的搅拌方案进行优化，确定最佳搅拌频率。结果  液体质量分别为10、37、/6/91 kg时，搅拌电机输出频率分别为10、22、34、46 Hz对水痘疫苗半成品滴度影响最小。结论  确认了磁力搅拌器的最佳搅拌频率，为提高水痘疫苗质量奠定基础。

目的  探讨黄热病毒17D减毒株在人二倍体细胞(2BS株)上的传代适应性。 方法  通过噬斑检测法检测病毒滴度，观察在不同培养条件下和连续传代时17D减毒株在2BS细胞上的增殖情况。结果  黄热病毒17D减毒株在2BS细胞上连续传5代可适应在2BS细胞上的生长，并以感染复数 0.005~0.010 接种、培养温度在 35~37 ℃、pH在7.4时，出现最高病毒滴度。 结论  初步确定了在人二倍体细胞（2BS株）上培养17D减毒株的适宜条件，为进一步研发使用人二倍体细胞制备黄热病疫苗奠定了基础。  

目的  评价兰州生物制品研究所有限责任公司（兰州公司）口服轮状病毒活疫苗的稳定性。方法  选取兰州公司2014年生产的3批口服轮状病毒活疫苗，置于37 ℃条件下进行热稳定性试验，在0和7d取样进行病毒滴度检查；置于25 ℃条件下进行加速稳定性试验，在0、1、2、3个月进行全部检定项目检查；置于2～8 ℃条件下进行长期稳定性试验，在0、3、6、9、12、15、18个月进行全部检定项目检查。结果  口服轮状病毒活疫苗于37 ℃条件保存7d，热稳定性试验符合质量标准（病毒滴度≥每毫升5.5 lg半数细胞培养物感染量，病毒滴度下降≤1.0 lg）。在25 ℃条件下保存3个月，全部检定项目均符合质量标准。在2～8 ℃条件下保存18个月，全部检定项目均符合质量标准。结论  兰州公司生产的口服轮状病毒活疫苗质量稳定。

 目的  验证4%甲醛溶液使Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎（脊灰）病毒达到预期灭活效果所需要的时间。方法  用4%甲醛溶液对15批Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰病毒在(36.5±1) ℃ 环境进行灭活，同时以15批未加入4%甲醛溶液的病毒纯化液作为对照组，按照企业注册标准采用微量细胞病变法测定病毒滴度。为了消除4%甲醛溶液对Hep-2细胞的影响，取4%甲醛溶液接种Hep-2细胞作为实验组，同时设置Hep-2细胞为对照组，每天观察对比两组细胞形态。对同一个Hep-2细胞悬液的总细胞数和活细胞数采用传统手工计数和全自动细胞计数仪计数，并比较分析结果。结果  实验组随着灭活时间的延长病毒滴度呈下降趋势，在灭活到第4天起，3个型别样品均检测不到病毒滴度；对照组病毒滴度在每毫升9.1～10.6 lg半数细胞培养物感染量范围内，符合企业注册标准的要求。4%甲醛溶液对Hep-2细胞生长有抑制作用，在培养观察到第3天时细胞全部失去活力死亡；对照组细胞形态良好呈多边形长成致密单层，活细胞组t值为18.098，总细胞组t值为4.005，P值均＜0.05，差异有统计学意义。结论  脊灰病毒在第4天能被彻底灭活，在进行此实验时应先消除甲醛对细胞培养的影响，避免结果出现假病变现象，确保结果的准确性；应用全自动细胞计数能提高计数结果的精确度。

目的  统计分析我国2015—2020年口服轮状病毒活疫苗质量属性检测数据，评价其质量可控性和工艺稳定性。方法  根据口服轮状病毒活疫苗注册标准和中国药典（2010、2015、2020年版）规定的方法对634批口服轮状病毒活疫苗的病毒滴度、热稳定性、抗生素残留量、渗透压以及pH进行检测，应用Minitab和GraphPad数据软件对检测结果进行单值移动极差控制图分析、方差分析和箱线图分析。结果  2015年—2020年634批口服轮状病毒活疫苗的病毒滴度均在每毫升5.5～7.0 lg半数细胞培养物感染量（50％ cell culture infectious does,CCID₅₀),热稳定性试验病毒滴度均不低于5.5 lgCCID₅₀/ml、滴度下降不大于1.0 lgCCID₅₀/ml、抗生素残留量、渗透压以及pH均在国家标准范围及企业内控标准范围内。结论 2015—2020年的口服轮状病毒活疫苗产品有较好的质量可控性，生产工艺稳定。

 目的  考察水痘减毒活疫苗（水痘疫苗）的稳定性。方法  取32批由上海生物制品研究所有限责任公司（上海公司）于2013—2019年生产的水痘疫苗，按照水痘疫苗注册标准和中国药典2015年版三部的要求进行各项检定；在0个月进行热稳定性试验，在0和24个月分别进行鉴别试验、外观检查、异常毒性检查、无菌检查和细菌内毒素含量、牛血清白蛋白残留量、抗生素残留量、渗透压摩尔浓度、pH值、病毒滴度、水分检测。结果  2013—2019年水痘疫苗在有效期内各项指标检定结果均符合注册标准和中国药典要求。疫苗水分不高于3.0%。病毒滴度在每0.5毫升 3.3～4.5 lg噬斑形成单位。结论  上海公司生产的水痘疫苗安全、有效、稳定。

目的 通过比较13价肺炎球菌多糖结合疫苗在BALB/c、KM、CD1小鼠品系体内的免疫应答，评价该疫苗的最佳小鼠免疫原性模型及此模型的最佳小鼠性别及免疫剂量。方法 将13价肺炎球菌多糖结合疫苗分别以每针次0.05、0.10、0.20、0.40 μg的剂量免疫3个品系小鼠，采用ELISA分析免疫应答差异以评价最佳小鼠模型；比较4个剂量在最佳小鼠模型中的雌雄小鼠应答差异以评价最佳小鼠性别；比较4个剂量免疫最佳性别的最佳小鼠模型以评价最佳免疫剂量。 结果 3个品系中，多数血清型在CD1小鼠中免疫应答值最高，KM小鼠应答最弱。在CD1小鼠品系中剂量与免疫应答之间有明显量效关系。4个剂量免疫CD1雌雄小鼠，0.05 μg剂量时免疫应答值均较低，在0.10、0.20、0.40 μg剂量时，几乎所有血清型在雌性小鼠中产生的免疫应答值均高于雄性小鼠。4个剂量免疫CD1雌性小鼠，除3、9V、19F、23F型外，其余血清型在0.20 μg剂量产生的免疫应答值均明显高于其他3个剂量。结论 评价13价肺炎球菌多糖结合疫苗免疫原性的最佳小鼠模型为雌性CD1小鼠， 最佳免疫剂量为0.20 μg。

目的 通过分析口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）单价病毒原液内猪胰蛋白酶残留量、牛血清白蛋白残留量、Vero细胞DNA残留量及片段大小，为该疫苗的杂质质量控制提供依据。方法 采用ELISA分别检测30批单价病毒原液中猪胰蛋白酶残留量和牛血清白蛋白残留量；用磁珠提取法纯化30批单价病毒原液中残留Vero细胞DNA，分别采用荧光染色法和毛细管凝胶电泳法检测Vero细胞DNA含量、DNA片段大小及分布。结果 在已检测的30批单价病毒原液中，猪胰蛋白酶残留量为3.8～7.2 μg/mL，牛血清白蛋白残留量为85～268 ng/mL，Vero细胞DNA残留量为48～115 μg/mL，Vero细胞DNA片段大小分布在201～2 000 bp的占比为73.4%～91.9%。结论 口服六价重配轮状病毒减毒活疫苗（Vero细胞）单价病毒原液的杂质残留可控。

目的 分析青岛市预防乙型肝炎（乙肝）病毒母婴传播措施的阻断效果，探讨相关影响因素。方法 以青岛市2021年完成分娩的869例乙肝病毒感染产妇及其生产且完成乙肝血清学标志物检测的儿童（乙肝暴露儿童）为研究对象，通过随访及问卷调查，获得乙肝母婴传播率及家长对乙肝母婴传播知识的知晓情况，以单因素和多因素逻辑回归方法分析阻断失败的影响因素。结果 共调查乙肝暴露儿童869名，乙肝母婴传播率为0.69%。乙肝暴露儿童未完成全程乙肝疫苗接种〔比值比（odds ratio,OR）=0.030，95%置信区间（confidence interval，CI）：0.004~0.232〕和母亲胎膜早破（OR=9.570，95% CI：1.343~68.201）可能是导致乙肝母婴传播的独立危险因素。乙肝病毒表面抗原研究组和对照组儿童家长对妊娠期必要性用药可以减少母婴传播风险、乙肝暴露儿童接种全程乙肝疫苗后需要进行检测、乙肝疫苗接种流程、接种次数以及乙肝暴露儿童出生后的干预阻断措施知晓情况存在差异。结论 加强孕期保健、减少胎膜早破的发生、对乙肝暴露儿童出生后及时实施联合免疫策略和全程疫苗接种程序，可显著提升母婴阻断效能。针对重点人群加强宣教、提高预防乙肝相关知识的知晓率是降低乙肝母婴传播的有效途径。

目的 通过对变更稳定剂的乙型脑炎减毒活疫苗进行SD大鼠长期毒性试验，评价疫苗的非临床安全性。方法 分别向160只SD大鼠皮下注射3次变更稳定剂前后的乙型脑炎减毒活疫苗或氯化钠注射液（阴性对照），对动物进行临床观察，体重、食量、血细胞计数、血液生化、体温、临床病理、T淋巴细胞亚群和特异性IgG抗体的检测及尿液分析、眼科检查。结果 实验期间，动物未见明显与给药相关的异常反应。虽然部分疫苗组别与阴性对照组相比，体重增长、食量、血细胞计数、血液生化指标差异均有统计学意义（t=2.03~4.26，P =0.011~0.042），但未见与稳定剂变更相关的异常改变，体温、凝血功能、T淋巴细胞亚群未见具有统计学意义的改变（t=1.35~1.98，P =0.052~0.186）。至恢复期结束时，所有疫苗组的所有动物仍可检测到抗体，各抗体效价未见明显降低。末次给药后3 d和恢复期结束时，阴性对照组及所有疫苗组安乐死动物的大体观察、组织病理学检查均未见明显异常改变。变更前后疫苗的毒性反应、局部刺激性和免疫原性未见明显不同。结论 变更稳定剂后的乙型脑炎减毒活疫苗的大鼠长期毒性试验结果符合动物安全性评价要求。

目的 对柯萨奇病毒B组5型（coxsackievirus B5, CV-B5）的病毒蛋白1（viral protein 1, VP1）进行生物信息学分析，以期为后续免疫监测、表位疫苗设计和疾病研究提供科学依据。方法 应用ProtParam、SignalP-6.0、DeepTMHMM-1.0、NetPhos-3.1、NetNGlyc1.0、SOPMA、SWISS-MODEL、ABCpred、BCPred和IEDB在线网站预测分析VP1的物理化学性质、结构特征和线性B细胞抗原表位。结果 CV-B5 VP1是不稳定且呈碱性的亲水性蛋白，无信号肽结构，有1个跨膜结构域。预测该蛋白可能存在33个磷酸化位点和15个糖基化位点。VP1二级结构以无规则卷曲为主，存在多个潜在的优势Ｂ细胞抗原表位。结论 利用生物信息学工具对CV-B5 VP1进行预测分析，初步判断了VP1的生物学功能及线性抗原表位。

目的　评价分别用Al(OH)₃、MF59、AS03和QS21佐剂配伍的新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）和流感病毒联合疫苗在小鼠中的免疫原性。方法　分别用Al(OH)₃、MF59、AS03和QS21佐剂配制SARS-CoV-2（灭活）和四价流感病毒（裂解）联合疫苗，在第0、14天分别腹腔注射免疫BALB/c小鼠，第14、28天采血检测血清抗SARS-CoV-2抗体滴度和流感血凝抑制滴度，并在第28天分离脾脏淋巴细胞检测针对SARS-CoV-2和流感病毒的细胞免疫应答。结果　不同佐剂的SARS-CoV-2和流感病毒联合疫苗均能诱导小鼠产生抗原特异性的抗体和细胞免疫应答。初次免疫后28 d，MF59佐剂组诱导了较高的抗SARS-CoV-2结合抗体和中和抗体，几何平均滴度（geometric mean titer，GMT）分别为89 144和5 418；MF59佐剂组也诱导了较高的针对四价流感病毒（H1N1、H3N2、BV、BY）的血凝抑制抗体，GMT分别为4 457、5 120、1 470和5 881；MF59和AS03佐剂组诱导了较强的针对SARS-CoV-2的Th1型（IFN-γ、IL-2）细胞免疫应答，与正常对照组的斑点形成单位差异均有统计学意义（IFN-γ： H=16.69，P＜0.01； IL-2： H=15.21， P＜0.05）；AS03佐剂组诱导了较强的针对H1N1、H3N2、BV、BY流感病毒的Th1型（IFN-γ、IL-2）细胞免疫应答，与正常对照组的斑点形成单位差异均有统计学意义（IFN-γ： H=12.93、12.17、11.82、13.61，P＜0.05； IL-2： H=12.24、12.42、11.72、12.43， P＜0.05）。结论　不同佐剂配方的SARS-CoV-2和流感病毒联合疫苗的免疫原性及抗原特异性抗体和细胞免疫应答均不同，证明了联合疫苗配方研究中佐剂的重要性。

目的　评价自制磷酸铝佐剂在不同储存条件下的稳定性，为该佐剂的储存和有效期设置提供数据支持。方法　选取连续3批产业化规模的自制磷酸铝佐剂，分别置于（5±3） ℃和（25±2） ℃储存。定期取样考察磷酸铝佐剂的主要评价指标（外观、pH值、铝含量、吸附率、氯化钠含量、沉降上清分析、无菌性、细菌内毒素、砷盐、铁盐、硫酸盐、铵盐、重金属、磷铝摩尔比、零电荷点、粒径大小与分布）。结果　3批磷酸铝佐剂在2种温度下储存15个月后，外观、无菌性均合格，pH值在5.4~6.2之间，吸附率在93%~100%之间，铝含量在2.77~3.36 mg/mL之间，氯化钠含量在7.90~8.60 g/L之间，沉降上清分析在12~15 mL之间，细菌内毒素在0.5~3.0 内毒素单位/mg铝之间，磷铝摩尔比在0.82~1.13之间，累积分布达到10%、50%、90%时对应的粒径大小分别为1.75~2.53、2.87~3.98和4.94~6.90 μm，零电荷点在5.11~5.47之间，残留杂质砷盐≤0.001‰、铁盐≤0.015‰、硫酸盐≤0.5%、铵盐≤0.005%、重金属≤0.002%，佐剂各项主要评价指标均稳定且符合质量标准。结论　3批自制磷酸铝佐剂在（5±3） ℃和（25±2） ℃条件下保存15个月后稳定性良好，为磷酸铝佐剂储存条件及效期的制定提供了依据。

目的　研究乙型脑炎减毒活疫苗在动物皮下接种后的毒性反应和全身主动过敏反应，考察疫苗安全性。方法　采用Sprague-Dawley大鼠皮下注射单次给药毒性试验评价疫苗的急性毒性；采用豚鼠全身主动过敏试验评价疫苗的致敏性。结果　乙型脑炎减毒活疫苗以1.50 mL/只的剂量单次皮下注射给予大鼠，未见与供试品相关的毒性反应，最大耐受量为1.50 mL/只。乙型脑炎减毒活疫苗分别以0.05 mL/只（低剂量）和0.50 mL/只（高剂量）皮下注射致敏3次，并在末次致敏后14 d以0.10 mL/只（低剂量）和1.00 mL/只（高剂量）静脉注射激发，可导致豚鼠发生全身主动过敏反应。结论　乙型脑炎减毒活疫苗在动物皮下接种后，毒性反应和全身主动过敏反应符合动物安全性评价要求。

目的　验证无酚红M199培养基的贮存效期，同时探索无酚红M199效期对无酚红Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（inactivated Sabin strain poliovirus vaccine，sIPV）关键质量属性的影响。方法　对贮存0、6、12、18、24、30、36及42个月的3批次无酚红M199干粉培养基进行外观、澄清度、pH、干燥失重、细菌内毒素、微生物限度等物理化学性质及微生物性质长期监测；检测用贮存36个月并检定合格的无酚红M199制备的sIPV成品关键质量属性；将近效期和远效期无酚红M199制备的各3批sIPV分别贮存于37 ℃和25 ℃进行稳定性监测，检测D抗原含量，评价其稳定性；用2组sIPV免疫大鼠，检测大鼠血清抗体效价，评价其免疫原性。结果　无酚红M199干粉培养基于2~8 ℃贮存42个月后的外观、澄清度、pH、干燥失重、细菌内毒素、微生物限度等均合格；用贮存36个月无酚红M199所制备sIPV成品的pH、D抗原、蛋白含量、Vero细胞DNA残留量、牛血清白蛋白残留量、Vero细胞蛋白残留量、游离甲醛含量等各项检定结果均符合中国药典2020年版三部和企业标准要求；用贮存36个月无酚红M199制备的sIPV效价合格、稳定性良好且与远效期无酚红sIPV免疫原性趋势一致，效力（t =﹣0.15~2.17，P＞0.05）和诱导中和抗体水平（t =﹣1.46~2.02，P＞0.05）差异均无统计学意义。结论　用贮存至36个月的无酚红M199制备的sIPV成品稳定性较好，近效期和远效期无酚红M199制备的sIPV产品质量属性、免疫原性及稳定性趋势一致，且对产品质量无影响，无酚红培养基的效期初步可定为36个月。

目的　对自制的兔源5型肺炎球菌特异性血清参考品进行质量控制检测，用于23价肺炎球菌多糖疫苗生产过程中的过程样品检测。方法　采用双光径速率浊度免疫分析系统非竞争性浊度模式进行检测，依次考察5型血清的工作浓度及线性、交叉情况、与市售血清的可比性、室间室内检测差异以及工作浓度下的稳定性。结果　4批自制5型血清工作浓度最大稀释倍数分别为75、20、30、8倍，对应工作浓度下，多糖浓度在0.625~4.000 μg/ml范围内与响应值呈现良好线性关系，线性相关系数均＞0.985；4批5型血清参考品与其余22个型别均无交叉现象，特异性良好；与市售血清的可比性考察中，5批血清（包括市售血清）同时检测3个不同厂家上市疫苗中的5型多糖含量的变异系数均小于5%，4批自制5型血清与市售血清重均分子量降低后的检测结果无明显差异；室间、室内检测结果变异系数均＜10%；工作浓度的4批5型血清在2~8 ℃均可在至少1个月内保持良好稳定性。结论　自制的兔源5型肺炎特异性血清效价高、线性良好、无交叉，与市售血清具有可比性，工作浓度下稳定性良好，可用于肺炎5型多糖疫苗的多糖含量检测。

目的　研究肺炎球菌多糖结合疫苗中各血清型肺炎球菌在液体培养基中传代培养的稳定性。方法　在液体培养基中对各代次肺炎球菌的培养时长进行对比；对第15代次（P15）与P4（对照组）进行菌种检定与荚膜多糖抗原基因序列分析；将P15菌种按生产工艺进行发酵培养，分析培养情况和荚膜多糖抗原产量及质量，与P4代次对比。结果　在P7—P15中，各代次培养时长相近，且P15菌种检定、抗原基因序列与P4相比无差异，序列相似度为100%；P15菌种发酵培养后，菌体生长、荚膜多糖产量与荚膜多糖相关检定指标与P4无明显差异，且均符合中国药典质量标准。结论　用于生产肺炎球菌多糖结合疫苗的各血清型肺炎球菌在液体环境中传代培养稳定。

目的　了解安徽省将A、C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗纳入免疫规划11年后适龄儿童抗脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis，Nm）IgG抗体水平，为进一步完善疫苗免疫策略提供参考。方法　采用多阶段随机抽样方法，在安徽省6个市抽取0～11岁健康儿童开展问卷调查并采集血液标本，采用ELISA定量检测抗A、C、W135、Y群IgG抗体水平，并对数据进行统计分析。结果　共调查1 002名儿童，抗Nm A、C、W135、Y群IgG抗体浓度达到保护性水平的儿童所占比例（阳性率）分别为89.82%、92.12%、31.04%、66.87%；中位抗体浓度分别为9.93、10.55、4.63、7.75 μg/ml。不同年龄组人群抗4个血清群 IgG抗体阳性率差异均有统计学意义，χ²值分别为27.75、17.70、132.00、122.55，P均＜0.05。采用A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗进行加强免疫的儿童，其抗W135群和Y群Nm IgG抗体阳性率显著高于接种AC群脑膜炎球菌多糖疫苗的儿童（χ²值分别为10.30和38.25，P均＜0.05）。结论　安徽省0～11岁儿童抗A、C群Nm IgG抗体水平较高，A、C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗纳入免疫规划11年后Nm防控效果成效显著。但该人群抗W135、Y群IgG抗体水平仍较低，应加强宣教工作，提升流行性脑脊髓膜炎多价疫苗的接种率。

目的　研究在特定的储存条件下，细胞工厂工艺生产的麻疹病毒原液和含麻疹成分疫苗中麻疹病毒滴度随温度、时间的变化规律。方法　按照细胞工厂工艺分别制备3批麻疹、腮腺炎和风疹病毒原液，将麻疹病毒原液置于2～8 ℃保存21 d和–60 ℃以下保存15个月进行稳定性分析，并将同批次原液分别用于配制6批麻疹减毒活疫苗（measles attenuated live vaccine，MV）、麻疹-腮腺炎联合减毒活疫苗（measles and mumps combined attenuated live vaccine，MM）和麻疹-腮腺炎-风疹联合减毒活疫苗（measles, mumps and rubella combined attenuated live vaccine，MMR），对上述18批疫苗进行（25±2） ℃保存6个月加速稳定性试验及2～8 ℃保存30个月长期稳定性试验。检测原液以及成品的麻疹病毒滴度，分析不同产品中的麻疹病毒在不同储存温度下的稳定性，并应用Minitab 17分析软件预估原液和成品稳定期。结果　3批麻疹病毒原液于2～8 ℃保存21 d和–60 ℃以下保存15个月，麻疹病毒滴度最低值分别为5.5和5.8 lgCCID₅₀/ml，均符合≥5.3 lgCCID₅₀/ml的质量标准。18批疫苗于（25±2） ℃保存6个月，MV、MM和MMR的麻疹病毒滴度最低值分别为4.0、4.7和3.4 lgCCID₅₀/ml；2～8 ℃保存30个月，MV、MM和MMR的麻疹病毒滴度最低值分别为4.4、4.5和3.8 lgCCID₅₀/ml。上述成品稳定性试验中的麻疹病毒滴度均符合各产品的质量标准；应用分析软件预估的原液和成品稳定期均远超各产品批准效期。结论　细胞工厂工艺的麻疹病毒原液以及3种含麻疹成分疫苗中的麻疹病毒的稳定性良好。

目的　建立检测重组戊型肝炎疫苗宿主DNA残留量的荧光染色法，并进行方法验证。方法　采用λDNA作为标准品建立标准曲线，重组戊型肝炎疫苗纯化后原液作为样品，进行线性、准确度以及精密度的验证。结果　该方法在1.250~80.000 ng/ml范围内有良好的线性，决定系数大于0.99；准确性验证中DNA残留量加标回收率在90.00%~110.00%之间，且加标回收率相对标准偏差均小于15.00%。重复性验证和中间精密度验证的相对标准偏差分别为6.62%和10.30%，均小于15.00%。结论　该方法快速、灵敏、准确，可以检测重组戊型肝炎疫苗宿主DNA残留量。

目的　探讨新型冠状病毒类病毒结构疫苗中的mRNA和蛋白使用剂量对小鼠免疫效果的影响，以期确定最佳的mRNA和蛋白使用剂量及成药可能性。方法　用ADT-脂质纳米颗粒递送系统装载和包封不同剂量的蛋白和mRNA，转染不同细胞系检测相应抗原表达情况，以及免疫动物检测血清的特异性抗体效价。结果　类病毒结构疫苗在包裹较小剂量mRNA（10~20 μg/剂）并装载蛋白（5 μg/剂）的情况下，能够特异性地激活小鼠树突状细胞，同时激活天然免疫及获得性免疫保护。结论　此研究的类病毒结构疫苗在小鼠实验中具有良好的免疫原性和抗体诱导功能，具有成为新型疫苗的可能性。

目的 研究乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗冻干稳定剂中各组分（蔗糖乳糖溶液、尿素、人血白蛋白、明胶）对病毒滴定方法（噬斑法）的影响，进一步确定该方法的专属性。方法 采用噬斑法对不同浓度的乙脑疫苗稳定剂各组分分别进行滴定，考察各组分对BHK₂₁细胞的影响。取3批乙脑疫苗原液与稳定剂各组分分别混合为实验组，与病毒稀释液混合为对照组，采用噬斑法检测实验组与对照组的病毒滴度并进行统计分析。结果 稳定剂中各组分对BHK₂₁细胞无影响。将乙脑病毒完全中和后，细胞板上没有噬斑形成。实验组与对照组病毒滴度差异无统计学意义，t值分别为蔗糖乳糖溶液0.24，明胶-0.09，尿素-0.15，人血白蛋白-0.05，P值均大于0.05。结论 噬斑法检测乙脑病毒的专属性良好，可用于乙脑疫苗的病毒滴度检测。

目的 评价组分无细胞百日咳-白喉-破伤风（百白破）（diphtheria, tetanus, component acellular pertussis，DTacP）-Sabin株灭活脊髓灰质炎病毒（Sabin strain inactivated poliovirus vaccine，sIPV）联合疫苗在模拟运输振动条件下的稳定性。方法  选取3批DTacP-sIPV，设计振动条件模拟疫苗运输过程进行稳定性评价。分别于振动前和振动后取样，按照中国药典2020年版三部和内部制造检定规程要求进行成品检测（包括外观、装量、pH、渗透压摩尔浓度、铝含量、游离甲醛含量、戊二醛含量、鉴别、sIPV D抗原含量、百白破效价、无菌、内毒素含量、特异性毒性、异常毒性和毒性逆转检测）、sIPV效力试验、Zeta电位测定、上清液中抗原测定及电子显微镜观察。 结果  振动前后，3批DTacP-sIPV的检测结果均符合质量标准要求，百白破效价与D抗原水平以及sIPV效力试验结果差异无统计学意义（t值分别在0.21~0.73、0.05~1.34和0.16~1.90，P值均>0.05）；Zeta电位以及上清液中抗原（百日咳毒素、丝状血凝素、黏附素）含量与振动前结果差异无统计学意义（t值分别为0.49和0.20~0.80，P值均>0.05）；电子显微镜观察结果与振动前比较无明显变化。结论  DTacP-sIPV联合疫苗在模拟运输振动条件下稳定性良好。

目的 探究口服轮状病毒活疫苗在高温保存和冻融后的病毒滴度变化趋势。方法 选取2022年生产的3批口服轮状病毒活疫苗，于37 ℃放置0、7、9、11和14 d或-20 ℃-室温冻融0、1、2、3、4、5次，进行病毒滴度检测；选取2022年生产的5批口服轮状病毒活疫苗原液，于37 ℃放置0、3、5、7、9和11 d或-20 ℃-室温冻融0、1、2、3、4、5次，进行病毒滴度检测。结果 口服轮状病毒活疫苗于37 ℃保存9 d时病毒滴度大于5.5 lgCCID₅₀/ml；口服轮状病毒活疫苗原液于37 ℃保存9 d时病毒滴度不低于5.5 lgCCID₅₀/ml；口服轮状病毒活疫苗5次冻融，病毒滴度不低于5.8 lgCCID50/ml；口服轮状病毒活疫苗原液5次冻融，病毒滴度不低于6.0 lgCCID₅₀/ml；均符合质量标准。第1次冻融后口服轮状病毒活疫苗滴度明显降低，但不大于1 lg，后续4次反复冻融对滴度未产生明显影响。结论 口服轮状病毒活疫苗在37 ℃最多可保存9 d，5次冻融后滴度仍符合质量标准。

目的  研究国产细胞培养用球状微载体应用于肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）灭活疫苗生产的可行性。方法  将进口与国产2种微载体置于40 L反应器中培养Vero细胞并接种EV71，对比2种微载体的细胞贴壁效率、细胞生长状况、培养病毒的抗原含量及病毒滴度的差异。结果  在40 L反应器培养阶段，2种微载体中细胞密度（t=1.05，P=0.354）、细胞的贴壁效率（t=1.65，P=0.173）以及种毒后96 h病毒滴度（t=0.39，P=0.732）间差异均无统计学意义。在120 h时，国产微载体上的细胞数量为进口微载体的90.11%。种毒后96 h，国产微载体的抗原含量为进口微载体的89.41%。结论  综合对比结果及制造、运输成本，国产微载体具有应用于EV71灭活疫苗生产的可行性。

目的  初步评价醛化鹅红细胞用于百日咳菌液血凝滴度测定的可行性，并确定其使用有效期。方法 以新鲜鹅红细胞作为对照，筛选出测定百日咳菌液血凝滴度的最佳醛化鹅红细胞浓度。用3批醛化鹅红细胞分别检测3批百日咳菌液血凝滴度，考察与新鲜鹅红细胞检测结果的一致性。观察不同放置期的醛化鹅红细胞发生溶血的情况，并考察血凝滴度检测结果与新鲜鹅红细胞的一致性。 结果  用于百日咳菌液血凝滴度测定的最佳醛化鹅红细胞浓度为0.33%。不同批次醛化鹅红细胞检测百日咳菌液血凝滴度的结果均与新鲜鹅红细胞检测结果一致。醛化鹅红细胞在2~8 ℃存放90 d仍能准确检测百日咳菌液血凝滴度，120 d后发生溶血现象。结论  0.33%的醛化鹅红细胞可用于百日咳菌液血凝滴度测定，醛化鹅红细胞使用有效期为90 d。

目的  建立并部分验证水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E（glycoprotein E, gE）ELISA。方法  用中国仓鼠卵巢细胞表达体系表达水痘-带状疱疹病毒的gE抗原，3步层析纯化后，混合弗氏佐剂免疫BALB/c小鼠和日本大耳白兔，制备抗gE特异性多克隆抗体。制备的抗体经Protein A亲和层析纯化后，用于建立双抗体夹心ELISA检测gE抗原。考察方法的线性范围、特异性、准确性、重复性和中间精密度等。结果  表达的gE经3步层析纯化后，纯度达到99%以上。该方法在gE浓度2^﹣2~2⁵ μg/ml范围内线性关系良好，决定系数大于0.99；该方法可特异性识别gE，与中国仓鼠卵巢细胞上清液或牛血清白蛋白溶液无交叉反应；高、中、低浓度gE内部参考品检测均值回收率分别为99.44%、94.35%、94.37%，变异系数分别为6.07%、4.28%、12.62%；重复性验证变异系数为8.24%，中间精密度验证变异系数为7.55%。结论  建立的双抗体夹心ELISA可以用于水痘-带状疱疹病毒gE的定量检测及疫苗质量标准的建立。

目的 对冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）进行动物肌内单次给药毒性、肌内重复给药毒性伴随局部刺激性和免疫原性、主动全身过敏性评价，以考察其安全性。方法 采用ICR小鼠肌内注射单次给药毒性试验评价制品的急性毒性；采用SD大鼠和食蟹猴肌内注射6周重复给药毒性伴随局部刺激性、免疫原性试验评价制品的长期毒性；采用豚鼠主动全身过敏试验评价制品的致敏性。结果 ICR小鼠单次肌内注射，所有动物未见与疫苗相关的异常反应，疫苗的最大耐受量>125 国际单位（international unit, IU）/kg，为临床拟用剂量的3 472.2倍，等效剂量的268.8倍；除伴随的轻度局部刺激反应外，SD大鼠6周重复给药毒性伴随局部刺激试验和免疫原性试验的安全剂量为37.5 IU/kg，为临床拟用剂量的1 041.7倍，等效剂量的182.0倍；食蟹猴最大无毒性反应剂量为1.875 IU/kg，是临床拟用剂量的52.1倍，等效剂量的18.0倍；疫苗剂量为0.1剂（0.05 ml/只）和1剂（0.5 ml/只）时，豚鼠主动全身过敏反应结果均为阳性。结论 冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）显示出良好的安全性，但肌内给药可能引起过敏反应，临床应用需密切关注。

目的 研制以Vero细胞为生产基质的SA14-14-2乙型脑炎（乙脑）减毒活疫苗候选毒株。方法 将SA14-14-2株原始病毒在Vero上传代并进行空斑克隆，对克隆株病毒进行Vero细胞培养，使用3周龄小鼠及3日龄乳鼠对脑内致病力进行测定，并进行乳鼠脑内回传、弱毒稳定性实验及免疫力实验等。结果 挑选到10个病毒克隆株，通过全面对比后，筛选到1株病毒滴度高（＞6.0 lgPFU/ml）且稳定的毒株SA14-14-2 VC₆。将该株与SA14-14-2原始株进行主要指标对比，结果表明，VC₆株全基因序列与原株相比仅有1个位点发生突变（S66L），对小鼠和乳鼠脑内致病力、弱毒稳定性、免疫原性均与原株相同。结论 筛选到的SA14-14-2 VC₆株符合中国药典乙脑减毒活疫苗生产毒种的要求。各项主要指标不劣于SA14-14-2生产用毒种，是可应用Vero细胞培养生产的乙脑疫苗候选株。

目的 探索以阳离子脂质体为载体和佐剂的HBV DNA疫苗的免疫效果。方法 用阳离子脂质体包裹HBV DNA疫苗pVAX/HBs形成脂质-pVAX/HBs复合物，肌肉注射免疫小鼠，同时分别注射质粒pVAX/HBs和pVAX1。在初次免疫前和初次免疫2周后每周对免疫小鼠眼眶采血，检测小鼠血清中乙型肝炎表面抗体的效价，并用流式细胞仪检测免疫小鼠脾脏细胞中CD4⁺、CD8⁺ T细胞数量。结果 脂质-pVAX/HBs组小鼠抗体水平高于pVAX/HBs组，且差异有统计学意义（t=3.92, P<0.01），CD4⁺ T细胞数量和CD4⁺/CD8⁺也均高于pVAX/HBs组及pVAX1组，且差异有统计学意义(F=4.67，P<0.05)。结论 阳离子脂质体可显著增强HBV DNA疫苗的体液免疫和细胞免疫效果。

探讨抗肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）中和血清效价与EV71滴度之间的中和试验量效反应关系。方法  将EV71收获液进行系列梯度稀释后，加入不同动物来源的不同效价的血清进行中和试验，观察细胞病变情况，找到能够完全中和不同滴度病毒所需的最低血清效价。 结果  随着病毒滴度的增加，需要完全中和病毒所对应的血清效价也相应增加，但血清效价增加的趋势较病毒增加的趋势慢，当病毒滴度增加约120 000倍时，所需的血清效价增加约1 000倍。不同来源的血清对EV71的中和能力相当。结论  初步确立了EV71中和血清与EV71滴度间的中和量效关系。

目的 评价8型肺炎球菌荚膜多糖（capsular polysaccharide of Streptococcus pneumoniae type 8，CPS8）分子大小对多糖蛋白结合物物理化学（理化）性质的影响，并对结合效果最优的多糖蛋白结合物进行抗原一致性评价。方法 采用高压均质法制备不同分子大小的CPS8；采用1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸酯活化法，制备以白喉类毒素无毒突变体CRM197为载体的CPS8蛋白结合物CPS8-CRM197，并检定其理化性质；采用核磁共振氢谱及核磁共振碳谱分析降解前后多糖糖链结构的变化情况，同时采用抑制ELISA评价CPS8-CRM197结合物的抗原一致性。 结果 高压均质法制备的CPS8相对分子质量在69 000～268 000；CPS8相对分子质量>200 000时会过度交联，＜100 000时结合效果较差；CPS8在相对分子质量100 000～200 000之间的CPS8-CRM197结合物游离多糖含量均<10%，游离蛋白含量均<5%。核磁共振氢谱及核磁共振碳谱结果表明，降解前后多糖糖链结构未发生改变，特异基团得到完整的保留；抑制ELSIA表明不同CPS8-CRM197结合物对8型肺炎球菌抗血清抑制的半数效应浓度在同一数量级内，分别为0.005、0.003、0.005 μg/ml，抗原性具有一致性。 结论 多糖结合疫苗制备工艺中，应将CPS8分子大小控制在相对分子质量100 000～200 000之间，该范围内多糖所制备的多糖蛋白结合物理化性质较优、抗原一致性较好。