目的 评价组分无细胞百日咳-白喉-破伤风（百白破）（diphtheria, tetanus, component acellular pertussis，DTacP）-Sabin株灭活脊髓灰质炎病毒（Sabin strain inactivated poliovirus vaccine，sIPV）联合疫苗在模拟运输振动条件下的稳定性。方法  选取3批DTacP-sIPV，设计振动条件模拟疫苗运输过程进行稳定性评价。分别于振动前和振动后取样，按照中国药典2020年版三部和内部制造检定规程要求进行成品检测（包括外观、装量、pH、渗透压摩尔浓度、铝含量、游离甲醛含量、戊二醛含量、鉴别、sIPV D抗原含量、百白破效价、无菌、内毒素含量、特异性毒性、异常毒性和毒性逆转检测）、sIPV效力试验、Zeta电位测定、上清液中抗原测定及电子显微镜观察。 结果  振动前后，3批DTacP-sIPV的检测结果均符合质量标准要求，百白破效价与D抗原水平以及sIPV效力试验结果差异无统计学意义（t值分别在0.21~0.73、0.05~1.34和0.16~1.90，P值均>0.05）；Zeta电位以及上清液中抗原（百日咳毒素、丝状血凝素、黏附素）含量与振动前结果差异无统计学意义（t值分别为0.49和0.20~0.80，P值均>0.05）；电子显微镜观察结果与振动前比较无明显变化。结论  DTacP-sIPV联合疫苗在模拟运输振动条件下稳定性良好。

目的 探究口服轮状病毒活疫苗在高温保存和冻融后的病毒滴度变化趋势。方法 选取2022年生产的3批口服轮状病毒活疫苗，于37 ℃放置0、7、9、11和14 d或-20 ℃-室温冻融0、1、2、3、4、5次，进行病毒滴度检测；选取2022年生产的5批口服轮状病毒活疫苗原液，于37 ℃放置0、3、5、7、9和11 d或-20 ℃-室温冻融0、1、2、3、4、5次，进行病毒滴度检测。结果 口服轮状病毒活疫苗于37 ℃保存9 d时病毒滴度大于5.5 lgCCID₅₀/ml；口服轮状病毒活疫苗原液于37 ℃保存9 d时病毒滴度不低于5.5 lgCCID₅₀/ml；口服轮状病毒活疫苗5次冻融，病毒滴度不低于5.8 lgCCID50/ml；口服轮状病毒活疫苗原液5次冻融，病毒滴度不低于6.0 lgCCID₅₀/ml；均符合质量标准。第1次冻融后口服轮状病毒活疫苗滴度明显降低，但不大于1 lg，后续4次反复冻融对滴度未产生明显影响。结论 口服轮状病毒活疫苗在37 ℃最多可保存9 d，5次冻融后滴度仍符合质量标准。

目的  研究国产细胞培养用球状微载体应用于肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）灭活疫苗生产的可行性。方法  将进口与国产2种微载体置于40 L反应器中培养Vero细胞并接种EV71，对比2种微载体的细胞贴壁效率、细胞生长状况、培养病毒的抗原含量及病毒滴度的差异。结果  在40 L反应器培养阶段，2种微载体中细胞密度（t=1.05，P=0.354）、细胞的贴壁效率（t=1.65，P=0.173）以及种毒后96 h病毒滴度（t=0.39，P=0.732）间差异均无统计学意义。在120 h时，国产微载体上的细胞数量为进口微载体的90.11%。种毒后96 h，国产微载体的抗原含量为进口微载体的89.41%。结论  综合对比结果及制造、运输成本，国产微载体具有应用于EV71灭活疫苗生产的可行性。

目的  初步评价醛化鹅红细胞用于百日咳菌液血凝滴度测定的可行性，并确定其使用有效期。方法 以新鲜鹅红细胞作为对照，筛选出测定百日咳菌液血凝滴度的最佳醛化鹅红细胞浓度。用3批醛化鹅红细胞分别检测3批百日咳菌液血凝滴度，考察与新鲜鹅红细胞检测结果的一致性。观察不同放置期的醛化鹅红细胞发生溶血的情况，并考察血凝滴度检测结果与新鲜鹅红细胞的一致性。 结果  用于百日咳菌液血凝滴度测定的最佳醛化鹅红细胞浓度为0.33%。不同批次醛化鹅红细胞检测百日咳菌液血凝滴度的结果均与新鲜鹅红细胞检测结果一致。醛化鹅红细胞在2~8 ℃存放90 d仍能准确检测百日咳菌液血凝滴度，120 d后发生溶血现象。结论  0.33%的醛化鹅红细胞可用于百日咳菌液血凝滴度测定，醛化鹅红细胞使用有效期为90 d。

目的  建立并部分验证水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E（glycoprotein E, gE）ELISA。方法  用中国仓鼠卵巢细胞表达体系表达水痘-带状疱疹病毒的gE抗原，3步层析纯化后，混合弗氏佐剂免疫BALB/c小鼠和日本大耳白兔，制备抗gE特异性多克隆抗体。制备的抗体经Protein A亲和层析纯化后，用于建立双抗体夹心ELISA检测gE抗原。考察方法的线性范围、特异性、准确性、重复性和中间精密度等。结果  表达的gE经3步层析纯化后，纯度达到99%以上。该方法在gE浓度2^﹣2~2⁵ μg/ml范围内线性关系良好，决定系数大于0.99；该方法可特异性识别gE，与中国仓鼠卵巢细胞上清液或牛血清白蛋白溶液无交叉反应；高、中、低浓度gE内部参考品检测均值回收率分别为99.44%、94.35%、94.37%，变异系数分别为6.07%、4.28%、12.62%；重复性验证变异系数为8.24%，中间精密度验证变异系数为7.55%。结论  建立的双抗体夹心ELISA可以用于水痘-带状疱疹病毒gE的定量检测及疫苗质量标准的建立。

目的  验证和评价猪纤维蛋白原生产工艺中有机溶剂/去污剂（solvent/detergent，S/D）法联合干热法灭活病毒的有效性。方法  以辛德比斯病毒、乙型脑炎病毒和伪狂犬病毒为指示病毒，验证猪血浆S/D法灭活病毒的有效性；以脑心肌炎病毒和猪细小病毒为指示病毒，验证猪纤维蛋白原冻干制剂干热法灭活病毒的有效性。结果  S/D法中，辛德比斯病毒、乙型脑炎病毒和伪狂犬病毒清除滴度下降均大于4 lg；干热法中，脑心肌炎病毒和猪细小病毒清除滴度下降均大于4 lg。结论  S/D法和干热法联合能有效灭活上述指示病毒，可提高猪纤维蛋白原产品的安全性。

目的 评价马破伤风免疫球蛋白F(ab´)₂的免疫亲和层析纯化工艺对猪细小病毒（porcine parvovirus，PPV）的去除效果。方法  分别采用首次装填和重复使用100次的层析柱，对3批中试规模生产的中间品进行缩小规模的层析工艺去除病毒效果评价。将PPV指示病毒加至层析前的料液中，分别于层析纯化上样前、流穿、洗脱、在位清洗阶段取样进行病毒滴度检测。结果  新装填的免疫亲和层析柱对PPV的去除效果符合要求，洗脱液病毒平均降低量≥4.30 lgTCID₅₀/0.1 ml。免疫亲和层析柱重复使用100次，对PPV的去除效果仍符合要求，洗脱液病毒平均降低量≥4.33 lgTCID₅₀/0.1 ml。结论  马破伤风免疫球蛋白F(ab´)₂的免疫亲和层析纯化工艺具有良好的PPV去除效果，层析柱重复使用100次与首次使用的病毒去除效果无明显差别。

目的  探讨不同标准品、样品预处理方式、稀释液对人凝血因子Ⅸ（human coagulation factor Ⅸ，FⅨ）制剂中FⅨ效价检测的影响，建立最优的FⅨ效价检测方法，并对该方法进行验证。方法  选用人凝血酶原复合物（human prothrombin complex，PCC）标准品和欧洲药典FⅨ标准品，分别采用生理盐水和乏FⅨ血浆预处理方式稀释标准品和FⅨ制剂，以及分别采用Owren-Koller稀释液和药典稀释液作为上机稀释液对FⅨ制剂效价进行检测，比较得出最优FⅨ效价检测方法，并对该方法的初步应用、专属性、准确度、中间精密度和线性进行检测。  结果    采用PCC标准品和欧洲药典FⅨ标准品定标检测FⅨ效价时，FⅨ效价检测值与标示量的比值范围分别为0.94~1.14、0.96~1.03；乏FⅨ血浆预处理方式的FⅨ效价检测值相比生理盐水预处理方式更接近于标准值；Owren-Koller稀释液相比药典稀释液作为上机稀释液的检测结果更接近标示量，因此选用PCC标准品、乏FⅨ血浆预处理方式及Owren-Koller稀释液建立FⅨ效价检测方法。该方法对于广东双林生物制药有限公司FⅨ制剂样品和FⅨ上市产品同样适用，灭活后与未经灭活FⅨ制剂稀释的标准品溶液测得的效价的比值为0.96，4组不同相对效价水平的FⅨ制剂效价检测值的相对偏倚均在±20%范围内，检测值的几何变异系数均≤20%，线性回归方程的相关系数均≥0.98，以上检测值均在可接受范围内。 结论  采用PCC标准品、乏FⅨ血浆预处理方式及Owren-Koller稀释液建立了最优的FⅨ效价检测方法，该方法具有良好的专属性、准确度、中间精密度和线性。

目的 应用ACL-TOP300全自动凝血仪建立人凝血因子Ⅷ效价测定方法并验证。方法 根据基于人凝血因子Ⅷ国家标准拟修订中国药典2020年版三部一期法要求，应用ACL-TOP300全自动凝血仪建立符合修订要求的人凝血因子Ⅷ效价测定方法，并与同类型设备比较置信区间、可信限率、误差项和平行管重复性。结果 建立的方法准确度和精密度良好；方法回收率为91.0%~96.4%，重复性和精密度的相对标准偏差均<5%；与主流检测设备相比，ACL-TOP300具有平行管差异小、误差项小和置信区间窄的特点。结论 用ACL-TOP300全自动凝血仪建立的人凝血因子Ⅷ效价测定方法的准确度、精密度、置信区间和可靠性均满足中国药典2020年版三部修订稿和国家标准要求。

2023年11月13—16日，WHO在印度尼西亚登巴萨举办了“WHO抗体检测二级标准品制备手册培训”，培训中WHO专家对抗体检测用二级标准品的制备提出了要求和建议。该培训使各国参会代表充分了解了抗体检测用二级标准品研究、使用过程中应注意的问题，加强了各国与WHO的交流，对于我国正在开展的相关工作和加强国际交流具有重大意义。我国应根据WHO对抗体检测用二级标准品制备的要求及建议，进一步做好我国抗体检测用二级标准品的制备工作。

铁死亡作为一种独特的调节性细胞死亡形式，其特征是铁依赖的脂质过氧化物的清除受损或过度产生导致其积累达到致死水平。近年来铁死亡在临床疾病领域的研究成为了热点，在自身免疫性疾病中的研究也逐渐增多。此文就铁死亡的重要概念、调控机制以及铁死亡在几种常见自身免疫性疾病的作用进行综述。

抗体偶联药物（antibody–drug conjugate，ADC）是一类由单克隆抗体通过化学接头共价连接细胞毒性药物形成的新型生物治疗药物。ADC利用单克隆抗体将细胞毒性药物递送至肿瘤细胞，实现了对肿瘤细胞的精准杀灭，具有靶向性强和不良反应小的优势。美国FDA批准上市的15款ADC中，有3款用于治疗乳腺癌。此文主要对近年来应用于乳腺癌治疗的ADC的研究进展作一综述。

目的 研究乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗冻干稳定剂中各组分（蔗糖乳糖溶液、尿素、人血白蛋白、明胶）对病毒滴定方法（噬斑法）的影响，进一步确定该方法的专属性。方法 采用噬斑法对不同浓度的乙脑疫苗稳定剂各组分分别进行滴定，考察各组分对BHK₂₁细胞的影响。取3批乙脑疫苗原液与稳定剂各组分分别混合为实验组，与病毒稀释液混合为对照组，采用噬斑法检测实验组与对照组的病毒滴度并进行统计分析。结果 稳定剂中各组分对BHK₂₁细胞无影响。将乙脑病毒完全中和后，细胞板上没有噬斑形成。实验组与对照组病毒滴度差异无统计学意义，t值分别为蔗糖乳糖溶液0.24，明胶-0.09，尿素-0.15，人血白蛋白-0.05，P值均大于0.05。结论 噬斑法检测乙脑病毒的专属性良好，可用于乙脑疫苗的病毒滴度检测。

目的 评估风疹病毒BRDⅡ减毒株（BRDⅡ株）E1区在人二倍体细胞2BS株（2BS细胞）中的连续传代稳定性。方法 将BRDⅡ株28代病毒在2BS细胞中连续传10代分别获得第29—38代病毒，依据中国药典2020年版三部对不同代次病毒进行生物学特性检测，将28代病毒（主种子批）、31代病毒（工作种子批）以及38代病毒进行全基因测序后对其核苷酸序列进行分析比对。结果 BRDⅡ株28代病毒在2BS细胞中连续传10代，其细胞病变程度基本稳定。基因测序发现，结构蛋白E1区第8281nt位点共出现1个突变，为同义突变。结论 BRDⅡ株在2BS细胞中自28代连续传至38代，病毒蛋白主要功能区E1区的氨基酸序列高度保守，具有良好的传代稳定性。

目的 制备1株抗黑猩猩腺病毒68型（chimpanzee adenovirus type 68，AdC68）六邻体（hexon，hex）蛋白重组单克隆抗体（单抗）。方法 表达并纯化AdC68-hex蛋白，免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA及细胞免疫染色法筛选得到1株分泌抗AdC68-hex蛋白单抗的杂交瘤细胞。抽提杂交瘤细胞RNA进行测序，获得单抗重链与轻链可变区序列，分别与小鼠重链与轻链恒定区序列拼接得到小鼠全长IgG1κ抗体重链与轻链，并构建至真核细胞高效表达质粒。将重链与轻链质粒共同转染至哺乳动物细胞表达并纯化得到抗AdC68-hex重组单抗。将抗体用于滴定AdC68、重组AdC68及AdC68重组疫苗，并开展方法学验证。结果 表达制备的AdC68-hex蛋白能有效诱导小鼠的病毒产生抗AdC68-hex抗体。抗AdC68-hex重组单抗用于重组AdC68滴定具备良好的专属性、耐用性，在4.56~9.57 lg感染单位/ml范围内具备良好的线性、准确度和精密度。结论 制备的重组抗AdC68-hex单抗适用于AdC68及AdC68重组疫苗载体相关的基因治疗药物及疫苗等的检测。

目的 研究西林瓶和预灌封注射剂吸附破伤风疫苗在非临床阶段的安全性差异，为预灌封注射剂型临床使用的安全性提供参考。方法 对西林瓶和预灌封注射剂吸附破伤风疫苗分别进行体外溶血试验、主动全身过敏试验和肌肉刺激试验以评价其制剂安全性。取兔1只进行体外溶血试验，观察样品的溶血情况；取豚鼠36只进行主动全身过敏试验，观察豚鼠出现的全身反应及死亡情况；取兔16只进行肌肉刺激试验，观察注射局部的刺激反应，并进行组织病理学检查。 结果 2种吸附破伤风疫苗在体外溶血试验中，对兔红细胞皆有凝聚作用，未见溶血；主动全身过敏试验中，在0.1 ml和0.5 ml致敏剂量下均未见过敏反应；肌肉刺激试验中，单次注射0.5 ml后注射部位肌肉可见轻度刺激性，停药后可恢复，与疫苗中含有铝佐剂相关。 结论 西林瓶和预灌封注射剂吸附破伤风疫苗安全性均良好。

目的 验证聚乙二醇修饰的干扰素（培干扰素）α1b原液中残留DNA检测的实时荧光定量PCR（quantitative PCR，qPCR）。方法 提取4批培干扰素α1b原液的残留DNA，使用qPCR检测试剂盒进行扩增反应，绘制标准曲线，建立残留DNA的qPCR检测方法，对建立的方法进行线性、重复性、准确性、精密度、定量限和耐用性的验证，并与探针杂交法进行比较。结果 qPCR检测在300 pg/μl~30 fg/μl浓度范围内线性关系良好。6次检测相对标准偏差为7.45%；加标回收率为95.67%~129.28%；不同人员检测相对标准偏差小于30%；定量限为30 fg/μl。不同孵育温度条件下检测结果无明显差异，耐用性良好。探针杂交法与qPCR的检测结果均小于中国药典2020年版规定的10 ng/剂。结论 qPCR检测培干扰素α1b原液中DNA残留具有良好的线性、重复性、准确性、精密度和耐用性，适用于该项检测。

目的 探索一种简便、快捷、准确检测自动移液工作站移液性能的方法。方法 用校准后的移液器移取系列体积的重铬酸钾原液，配制成等体积不同浓度酶标检测稀释液，读取吸光度值，拟合原液体积-稀释液吸光度值回归方程。选取实验室最常用移液量50 μl作为测试点，用96通道自动移液工作站移取50 μl重铬酸钾原液配制稀释液，读取吸光度值，根据回归方程计算出各通道实际原液移取体积，对自动移液工作站的移液准确性、重复性和通道一致性进行分析。结果 原液体积与稀释液吸光度值成线性关系，相关系数为1.000。在50 μl量程点，96个通道的准确性均符合偏差不超出±3%的标准，7次重复性实验结果符合变异系数≤1.5%的标准，一致性符合不超出设定量×（100±5）%的标准。结论 建立的方法简便、快捷、准确，可用于实验室自动移液工作站移液性能的日常监测。

目的 通过比较RJ300型和GE450型层析柱对人凝血因子Ⅷ（human coagulation factor Ⅷ，F Ⅷ）的纯化效果，探究GE450型层析柱纯化FⅧ的适用性。方法 分别采用2种层析柱各制备3批FⅧ制品，按照中国药典2020年版三部的要求对制品进行检测，比较2种层析柱制备的FⅧ原液的回收率、比活性、洗脱峰的峰形差异、杂蛋白去除效果以及成品的检定结果，并进行产品稳定性考察。 结果 RJ300型和GE450型层析柱纯化后的FⅧ原液回收率分别为(63.8±4.8)%和(61.0±4.3)%，相对标准偏差分别为7.5%和7.0%，原液比活性分别为(100.7±5.8) 和(114.0±12.2)国际单位（international unit, IU）/mg，2种层析柱洗脱峰的峰形差异无统计学意义（F=0.42，P＞0.05），2种层析柱均能有效去除杂蛋白，成品检定结果均合格，成品比活性分别为(38.6±5.5) IU/mg和(39.4±6.2) IU/mg。2种层析柱制备的FⅧ的稳定性研究结果均符合中国药典规定。结论 GE450型层析柱能实现较好的FⅧ纯化效果，成品安全有效、稳定性良好，适合商业规模化生产。

目的 研究氨水法制备氢氧化铝佐剂时工艺中使用超滤替代透析工艺去除NH₄⁺的可行性。 方法 取氨水法制备的氢氧化铝胶体溶液稀释并超滤至氨质量浓度低于0.04%，浓缩定量至起始体积；另取等体积氢氧化铝胶体溶液透析至氨含量质量浓度低于0.04%。超滤或透析后，收集氢氧化铝胶体溶液进行高压蒸汽灭菌。依据中国药典2020年版三部及《预防用含铝佐剂疫苗技术指导原则》对2种工艺制备的佐剂进行外观、pH、铝含量、吸附率、沉降率、等电点、粒径大小及分布、X-射线衍射等质量指标检测。结果 超滤工艺制备的3批佐剂pH为4.63±0.04、铝含量为（4.963±0.027）mg/ml、平均粒径为（123.2±7.3） nm、粒径分布为（40~500） nm、等电点为10.9±0.1、回收率为 91.4%±0.5%；透析工艺制备的3批佐剂pH为4.86±0.25、铝含量为（4.959±0.340） mg/ml、平均粒径为（120.6±6.2） nm、粒径分布为（40~500） nm、等电点为10.9±0.4、回收率为91.5%±2.5%。2种工艺制备的氢氧化铝佐剂质量指标差异无统计学意义(t值为﹣1.58~0.46，P值为0.251~0.918)。 结论 相较于透析工艺，采用超滤工艺制备的氢氧化铝佐剂所有质量指标未改变，且质量一致性更好。

C-C 基序趋化因子受体 8（C-C motif chemokine receptor 8，CCR8）是一种调控免疫细胞趋化迁移的7次跨膜蛋白，在肿瘤微环境中高表达于Treg表面。由于CCR8⁺ Treg能强烈抑制肿瘤免疫，因此CCR8是一种扭转抑制型肿瘤微环境的理想靶点。目前有多种在研的靶向CCR8抗体药物，可在多种肿瘤模型中特异性清除肿瘤浸润CCR8+ Treg、扭转免疫抑制，展现出良好的抗肿瘤活性。此文对CCR8⁺ Treg促进肿瘤进展的基础研究和靶向药物应用进行综述，以期为该靶点肿瘤免疫治疗研究提供参考。

真皮和表皮具备独特的免疫特性，含有丰富的APC，如表皮朗格汉斯细胞和真皮树突状细胞。研究发现，由于皮内接种疫苗可显著提高细胞介导的免疫应答，特别是CD4⁺和CD8⁺ T细胞应答，因此皮内接种作为常规肌内接种的代替途径受到了持续关注。相比标准剂量的肌内接种途径，皮内接种可诱导相当的免疫应答，却只需要较少的疫苗剂量，尤其是在常规肌内接种后免疫应答较弱的特殊人群中。在疫苗的扩大范围接种时，皮内接种方式较肌内接种相对有优势。此文就皮内免疫相关研究成果，包括皮内免疫细胞的组成特征、皮内免疫机制以及皮内接种途径在病毒疫苗研究中的应用等进行了汇总分析，对包括流感疫苗、狂犬病疫苗和新型冠状病毒疫苗等的临床研究结果与实验设计进行总结，以期为疫苗的皮内给药研究提供参考。

手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是由多种肠道病毒感染引起的急性传染病，在全世界尤其是亚太地区多次暴发、持续流行，给儿童的生命健康带来了严重威胁。HFMD病原谱较广，且主要肠道病毒血清型病原谱不断发生变化，单价疫苗无法预防由不同血清型病毒感染引起的HFMD，多价疫苗是防控HFMD的主要手段。此文对HFMD病原学及多价疫苗的研发进展进行综述。

目的　探讨新型冠状病毒类病毒结构疫苗中的mRNA和蛋白使用剂量对小鼠免疫效果的影响，以期确定最佳的mRNA和蛋白使用剂量及成药可能性。方法　用ADT-脂质纳米颗粒递送系统装载和包封不同剂量的蛋白和mRNA，转染不同细胞系检测相应抗原表达情况，以及免疫动物检测血清的特异性抗体效价。结果　类病毒结构疫苗在包裹较小剂量mRNA（10~20 μg/剂）并装载蛋白（5 μg/剂）的情况下，能够特异性地激活小鼠树突状细胞，同时激活天然免疫及获得性免疫保护。结论　此研究的类病毒结构疫苗在小鼠实验中具有良好的免疫原性和抗体诱导功能，具有成为新型疫苗的可能性。

目的　通过比较转瓶和反应器工艺制备的CTN-1V株狂犬病病毒在Vero细胞上适应性传代的最佳感染复数（multiplicity of infection，MOI），评价应用反应器工艺规模化制备狂犬病病毒工作种子批的可行性。方法　复苏Vero细胞后按照1:4比例传代至生产代次，接种不同MOI的CTN-1V株狂犬病病毒并培养。转瓶工艺毒种MOI为0.005、 0.010、 0.050、 0.100、0.500；反应器工艺毒种MOI为0.010、0.030、0.050、0.080、0.100。在培养过程中分别采用ELISA和小鼠脑内滴定法进行狂犬病病毒G蛋白抗原含量和狂犬病病毒滴度检测，确定最佳MOI，并将最佳MOI分别应用于300 L反应器规模化病毒培养工艺。单次病毒收获液取样进行病毒G蛋白抗原含量和病毒滴度的检测，并进行连续3批次确认试验。结果　转瓶工艺毒种工作种子批（批号20181201）与反应器工艺毒种工作种子批（批号20201001），在T225瓶中的最佳MOI均为0.050。将2批毒种分别用于300 L反应器灌流培养48 h后，每批病毒收获液的G蛋白抗原含量连续9 d均达到1.0 国际单位/ml以上，病毒滴度均达到6.0 lg半数致死剂量/ml以上，符合工艺标准。结论　根据MOI比较结果，反应器工艺可以替代原有的转瓶工艺制备狂犬病病毒工作种子批，并应用到规模化生产中。

目的　建立吸附无细胞百日咳（三组分）-白喉-破伤风联合疫苗〔diphtheria, tetanus and acellular pertussis (three components) combined vaccine, adsorbed，DTacP〕内毒素含量的定量检测方法，并对其进行验证。方法　采用动态显色法（美洲鲎试剂）检测DTacP的内毒素含量，并对该方法的线性与范围、专属性、准确度、中间精密度、重复性、定量限进行验证，并与凝胶法结果进行比较。结果　动态显色法的线性相关系数的绝对值大于0.99；DTacP稀释100倍和1 000倍，对试验均无干扰作用；3批DTacP内毒素检测结果的准确度回收率分别为56％、75％、80％，重复性的变异系数分别为5.59%、7.14%、5.81%；不同操作人员在不同时间检测3批DTacP中内毒素结果的变异系数分别为15.93%、8.48%和7.43%；将光密度反应阈值 30 毫吸光度单位增减3 毫吸光度单位，耐用性的相对偏差均小于15%。DTacP中内毒素含量检测的定量限为30 内毒素单位（endotoxin unit，EU）/ml。动态显色法检测3批DTacP中内毒素含量的检测结果与凝胶法结果一致，均小于限定值200 EU/ml。结论　建立了定量检测DTacP中内毒素含量的动态显色法，该法具有良好的线性、专属性、准确度、中间精密度以及重复性，可用于DTacP中内毒素含量的定量检测。

目的　建立邻苯二甲醛（O-phthalaldehyde，OPA）柱前衍生化反相高效液相色谱法（reversed phase high performance liquid chromatography，RP-HPLC）并验证，以检测百日咳抗原中间产物中氨基酸的含量。方法　采用OPA柱前衍生化RP-HPLC检测百日咳抗原中间产物百日咳毒素脱毒液中L-天冬氨酸钠盐、丝状血凝素脱毒液中甘氨酸及黏附素脱毒液中L-赖氨酸的含量，并对该方法的专属性、系统适用性、线性、准确度、耐用性、检测限和定量限进行验证。结果　OPA柱前衍生化RP-HPLC检测配置溶液，对照品和供试品溶液可见对应的氨基酸色谱峰，供试品溶液的保留时间和峰面积相对标准偏差均小于2.0%。氨基酸浓度在5~100 μg/ml时，浓度与峰面积线性关系良好，检测氨基酸样品的加标回收率均在80%~120%之间。用磺基水杨酸和盐酸稀释剂处理供试品后，2种稀释剂检测值之间的相对误差在±5%范围内。定量限为5 μg/ml，检测限为2 μg/ml。结论　成功建立了检测百日咳抗原中间产物中氨基酸含量的OPA柱前衍生化RP-HPLC检测方法，该方法的专属性、系统适用性、线性、准确度、耐用性良好。

目的　对Lowry法2检测百日咳抗原中百日咳毒素（pertussis toxin, PT）、丝状血凝素（filamentous hemagglutinin, FHA）、黏附素（pertactin,Prn）含量进行方法学验证。方法　将PT、FHA、Prn国家标准品系列稀释，在0~50 µg/ml浓度范围内建立标准曲线。在已知浓度的PT、FHA、Prn精制液中加入国家标准品配制加标样品，采用Lowry法2检测蛋白含量，考察准确度和精密度。对原液生产中使用的400 mmol/L PBS进行专属性试验。分别在检测后10、20、30 min再进行检测以考察方法的耐用性。结果　回收率介于91.1%~110.7%；准确度相对标准偏差为1.8%~9.2%，批间精密度相对标准偏差为2.6%~6.2%；400 mmol/L PBS对样品测定无干扰；检测样品在30 min内读取数据有效。结论　该法具有良好的线性、准确性、精密性、专属性和耐用性，可用于百日咳抗原中PT、FHA、Prn含量的测定。

目的　建立治疗性单克隆抗体（单抗）SIBP-A电荷异构体全柱成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis，icIEF）测定方法，并进行验证。方法　针对尿素浓度、两性电解质范围及浓度和聚焦时间对icIEF方法进行条件优化，并应用优化条件对该单抗电荷异构体进行分析，验证专属性、稳定性指示性、重复性、中间精密度、线性与范围、准确度、定量限及处理后样品的稳定性。结果　优化后icIEF条件：3 mol/L尿素、1% MC胶、3%两性电解质载体Pharmalyte 3-10与Pharmalyte 8-10.5按1:1混合，电压1 kV、预聚焦1 min，电压3 kV、聚焦分离6 min。专属性实验中，空白组在样品出峰处无明显干扰峰，对照组正常出峰且电荷异构体正常；稳定性指示性实验中，可以检测出40 ℃放置7 d的样品正常出峰而且电荷异构体发生显著变化，与对照样品明显不同；重复性实验中，酸性峰、主峰及碱性峰相对百分含量的相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）分别为0.48%、0.00%和4.03%，主峰等电点RSD为0.012%；中间精密度实验中，酸性峰、主峰及碱性峰相对百分含量的RSD分别为0.89%、0.45%和6.14%，主峰等电点RSD为0.072%；在蛋白终浓度0.50~1.50 mg/ml范围内具有良好的线性，线性决定系数为0.996 8，且回收率在95.03%～104.35%内；该方法的定量限为0.003 0 mg/ml；10 ℃条件下样品酸性峰、主峰、碱性峰相对百分含量的RSD分别为0.56%、0.00%和8.61%，主峰等电点RSD为0.056%；室温条件下3 h酸性峰电荷异构体开始发生明显变化。结论　研究建立的检测方法可以有效检测单抗SIBP-A的电荷异构体及等电点，专属性、稳定性指示性、重复性、中间精密度、线性与范围、准确度、定量限和10 ℃条件下样品的稳定性均良好，可用于该抗体的放行检测及稳定性检测。

目的　建立用电位滴定法测定生物制品中氯化钠含量的方法并进行初步应用。方法　以氯化钠基准物质为对照，根据硝酸银滴定液滴定电位测定样品中氯化钠含量并验证方法。分别用不同方法测定同一样品并比较。结果　在6~15 mg/ml范围内，氯化钠浓度与消耗的硝酸银滴定液体积呈良好的线性关系，回归方程的决定系数为0.999 9；脑膜炎球菌多糖疫苗培养基、破伤风抗毒素原液、b型流感嗜血杆菌结合疫苗、疫苗用氢氧化铝佐剂中氯化钠平均回收率分别为100.0%、99.8%、100.2%、100.3%，表明电位滴定法具有良好的准确度；同批次供试品6次测定结果的相对标准偏差最大为0.7%，表明电位滴定法具有很好的重复性；将供试品在稀释后分别放置5和30 min后再检测，对结果无明显影响，表明该方法具有良好的耐用性；对电位滴定法和中国药典2020年版采用的福尔哈德法所得结果进行统计学分析，从t检验结果可知，2种方法测定结果差异无统计学意义（t值在-2.12~2.50，P>0.05）。结论　建立了用电位滴定法测定生物制品中氯化钠含量的方法，该方法线性范围良好、重复性好、定量准确，适用于生物制品中氯化钠含量的检测。

定量PCR（quantitative PCR，qPCR）被广泛应用于mRNA表达、病原体检测和病毒滴定等领域，具有快速、敏感、污染概率低和可重复的特点。此文主要对qPCR法检测各种病毒滴度的研究进展进行综述，介绍qPCR在RNA病毒以及DNA病毒检测中的应用，并与其他检测方法进行对比，展现qPCR检测病毒滴度的应用前景。

狂犬病病毒（rabies virus，RABV）感染导致的狂犬病是人兽共患的中枢神经系统急性传染病，而接种疫苗是防治狂犬病的主要方式。RABV糖蛋白和核蛋白是2种有效的候选疫苗抗原，但其蛋白疫苗或核酸疫苗仍存在一些缺陷，有必要探索载体介导的RABV疫苗。此文概述了腺病毒、痘病毒、α病毒、疱疹病毒、植物乳杆菌和根癌农杆菌等载体介导的RABV蛋白疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究现状。

低白蛋白血症是腹部胃肠大手术预后不良的独立预测因子。为避免腹部术后低蛋白血症的发生，人血清白蛋白在腹部术后并低白蛋白血症患者中的应用比较普遍。但是，腹部术后应用人血清白蛋白是否具有临床获益，目前尚存在争议。此文综述当前白蛋白在腹部围术期中的作用、病理生理变化、临床治疗获益以及营养价值等，旨在加强临床医师对白蛋白的正确认识及合理应用，以利于患者的术后管理，降低用药费用。

目前，已上市的预防治疗A型血友病的非因子类产品只有重组人源化IgG4双特异性单克隆抗体（单抗）艾美赛珠单抗，此产品具有良好的安全性和有效性，不受人凝血因子Ⅷ抑制物影响，并具有给药频率低等特点。此药于2017年首次在美国获批上市，2018年相继在欧盟、日本和中国获批上市。此文对艾美赛珠单抗的基本情况、组成结构与药理毒理学特性、临床研究、同类药品研发进展等方面进行综述，以供国内相似药物研发参考。