当前新型冠状病毒肺炎（COVID-19）疫情仍在全球大流行，确诊病例和死亡人数仍不断攀升，如何有效控制病毒的传播，降低传染率和死亡率是目前全人类亟待解决的问题。一方面需要快速、可靠、经济的检测方法及时发现新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）感染者，另一方面需要寻找新颖、有效的COVID-19治疗及预防策略。各种基于成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白（clustered regularly interspaced short palindromic repeat and associated protein，CRISPR-Cas）系统的新一代基因编辑技术以其快速、便携、经济、高效的特点为COVID-19快速分子诊断提供了解决方案。CRISPR-Cas系统具有可准确识别并降解SARS-CoV-2病毒核酸的特点，为研发针对COVID-19的新型治疗及预防手段提供了一种潜在的技术方案。此文对目前COVID-19诊断及治疗现状进行了分析，对基于CRISPR-Cas系统的COVID-19分子诊断、治疗及预防策略研究及其新进展进行了简述。

疫苗是预防和控制传染病最经济、有效的手段，疫苗接种是通过诱导机体产生保护性免疫反应来预防和控制人类和动物疾病的常规方法。面对当今重大、复杂、突发、高变病原体，传统疫苗学方法难以满足需求，新型疫苗技术是应对未来全球健康挑战的有利武器。未来疫苗技术要着眼于更合理、更精准和更高效，保证安全性的同时，最大程度提高疫苗效力。此文梳理了目前疫苗技术的研究进展，并指出了未来的发展趋势，有利于提升对未知病原体的探索和主动防御的共识，促进创新性疫苗技术体系的发展。

目的  构建并鉴定表达新型冠状病毒核衣壳（nucleocapsid，N）蛋白的基因重组BCG。方法  利用PCR技术从质粒pUC57-N(kan⁺抗性)中获得新型冠状病毒N蛋白基因。将N蛋白基因连接到大肠埃希菌-BCG穿梭表达质粒pMV261，进行酶切、PCR及测序鉴定。重组质粒经电转化导入感受态BCG，通过蛋白印迹法鉴定目的基因在重组BCG中的表达。结果   经过PCR扩增获得1 260 bp的N蛋白基因，构建的重组表达质粒pMV261-N序列完整，插入的基因片段与美国国家分子生物学信息资源中心报道的新型冠状病毒N蛋白基因的大小及序列一致。重组质粒能够在BCG中表达相对分子质量约为46 000的目的蛋白，蛋白印迹法显示该蛋白能被抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体识别。结论  构建的重组BCG能稳定表达新型冠状病毒N蛋白，为开发新型冠状病毒N蛋白基因重组BCG疫苗奠定了基础。

目的   利用仓鼠模型探究新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）感染后是否存在抗体依赖性感染增强（antibody-dependent enhancement，ADE）现象，为疫苗研发和接种提供实验依据。方法   实验室构建SARS-CoV-2感染仓鼠模型，分成对照组、感染组、二次感染组、免疫组，ELISA法检测仓鼠血清总抗体以及细胞因子IL-6和转化生长因子-β含量；中和试验法检测仓鼠血清病毒中和抗体；免疫印迹法和定量逆转录PCR检测仓鼠肺组织病毒含量；苏木精-伊红染色法观察仓鼠肺组织病理变化；分离培养仓鼠腹腔原代巨噬细胞，检测仓鼠免疫血清能否促进SARS-CoV-2对巨噬细胞的感染。结果   二次感染组和免疫组仓鼠血清总抗体滴度差异无统计学意义（P>0.05）；但免疫组中和抗体水平显著低于二次感染组（P<0.001）；与感染组相比，二次感染组和免疫组仓鼠感染病毒后体质量保持稳定（P<0.01），肺组织炎症反应轻，仅免疫组在感染后第2天的肺组织中检出病毒；各组仓鼠血清中促炎因子IL-6和抗炎因子转化生长因子-β的含量差异无统计学意义（P>0.05）；在有或无仓鼠免疫血清的条件下，SARS-CoV-2均不能感染仓鼠腹腔巨噬细胞，但可被吞噬。结论   基于仓鼠感染模型的初步实验结果，不支持SARS-CoV-2感染中存在巨噬细胞介导的ADE现象。

目的   通过Meta分析明确静注人免疫球蛋白（human immunoglobulin for intravenous injection，IVIG）对于新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的疗效和安全性。方法 计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库自2020年1月1日至2021年7月31日发表的关于IVIG治疗COVID-19的中、英文随机对照试验及队列研究。根据Cochrane系统评价员手册进行质量评价，采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果 共纳入11个符合标准的临床研究，包含4个随机对照试验和7个队列研究。Meta分析结果发现：IVIG能显著降低危重型COVID-19患者的死亡率〔相对危险度（RR）=0.67，95%置信区间（CI）：0.52~0.85，P=0.001，I²=7%〕；在重型患者中，IVIG也能带来潜在的生存率改善，但差异无统计学意义〔RR=0.78，95% CI：0.52~1.18，P=0.24，I²=49%〕。IVIG在COVID-19患者中的不良反应发生率在0.0%~5.9%之间，以轻至中度不良反应为主，表现为心悸、头晕、皮疹、注射部位水肿等。结论   IVIG安全性良好，能显著提高危重型COVID-19患者生存率。在重型患者中需进一步探索IVIG的使用时机和推荐剂量，以更好地指导临床治疗。

 目的  采用40层细胞工厂(40-layer cell factory, CF40)工艺培养原代地鼠肾(primary hamster kidney, PHK)细胞，优化乙脑减毒活疫苗的生产工艺。 方法  用不同浓度新生牛血清培养不同接种密度PHK细胞，比较各组PHK细胞数量，确定CF40工艺的PHK细胞接种密度和新生牛血清浓度。通过对比CF40和15 L转瓶采用不同新生牛血清的PHK细胞培养情况，比较两种工艺对新生牛血清的选择性。对4个厂家CF40培养的PHK细胞数量进行单因素方差分析，判定对CF40的选择性。结果  CF40工艺的最有条件为PHK细胞接种密度为6.1×10⁵ ml^-1、新生牛血清浓度6%。CF40工艺对新生牛血清的选择性较低，能比转瓶工艺更稳定地培养更多的PHK细胞。4个厂家CF40培养的PHK细胞数量之间的差异无统计学意义（F=0.23，P＞0.05），对CF40选择性低。 结论  采用CF40可以制备出满足乙脑减毒活疫苗生产要求的PHK细胞。

 目的  优化金黄色葡萄球菌α-毒素（α-toxin，AT）溶血活性测定方法，用于无毒突变AT（non-toxic mutant AT，mAT）特异性血清抗体体外功能性评价和中和抗体滴度测定。方法  使用AT裂解兔红细胞，释放血红蛋白，通过分光光度法检测溶血活性，并对该方法中的孵育时间、兔红细胞终浓度、Triton X-100浓度进行优化，同时验证方法重复性。对mAT特异性血清抗体进行体外功能性评价，绘制AT溶血曲线，计算AT 溶血率50% 时的浓度，检测血清半数中和抗体滴度。结果  AT溶血活性最适检测条件为：孵育时间90 min，兔红细胞终浓度为2%（V/V），Triton X-100浓度为0.25%。此条件下，分别加入mAT和含mAT的多价抗原血清抗体，对AT溶血活性均起到明显的抑制作用。AT 溶血率50%时浓度为1.75 μg/ml，变异系数3.75%。mAT和含mAT的多价抗原血清抗体的半数中和抗体滴度初步结果均为1∶64。结论  优化的AT溶血活性检测方法重复性良好，且检测时间较短，可用于特异性血清抗体体外功能性评价和中和抗体滴度测定。

目的  重组表达人MHC Ⅰ类链相关蛋白A α3结构域（MHCⅠchain related protein A α3 domain，MICA-α3）蛋白及自然杀伤细胞受体2D（natural killer group 2D，NKG2D）蛋白，制备抗MICA-α3单克隆抗体，并检测其结合功能。方法  构建MICA-α3及NKG2D蛋白表达载体，经转化大肠埃希菌BL21菌株表达重组蛋白，通过分子筛、组氨酸标签蛋白层析纯化。用重组MICA-α3蛋白免疫小鼠，采用杂交瘤技术筛选单克隆抗体，用细胞ELISA检测单克隆抗体功能。结果  重组蛋白在大肠埃希菌BL21菌株中以包涵体形式表达。筛选得到5株能和表达MICA-α3的MDA-MB-453细胞结合的单克隆抗体,且不影响MDA-MB-453细胞与NKG2D结合。结论  制备的抗MICA-α3单克隆抗体能与肿瘤细胞结合，同时不影响肿瘤细胞与NKG2D结合。

目的    探索滤板压滤法、复合膜法和离子交换层析法对静注人免疫球蛋白中残留IgA的去除效果。方法  对3种过滤方法进行多批次的规模化生产静注人免疫球蛋白中分子大小分布、蛋白回收率和IgA含量的考察，分析不同过滤方法的去除效果。结果  3种过滤方法平均IgA去除率分别为86.6%、92.7%和97.9%；平均蛋白回收率为81.6%、95.3%和97.1%。通过单因素方差分析，发现3种方法并无明显统计学差异。结论  3种过滤方式各有其优缺点，滤板压滤法应用范围管但去除量有限；复合膜法使用方便但成本较高；离子交换层析法分离效果好但审批手续繁琐，不同企业应选择适合自己的过滤方式。

CD22是特异性表达于B淋巴细胞上的Ⅰ型跨膜糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族中唾液酸黏附素家族成员，其作为抑制性辅助受体在B细胞的调节与体液免疫中发挥重要作用。自身免疫病是由自身免疫失调所致，B细胞异常激活以及致病性自身抗体的生成是自身免疫病的重要特征之一。通过抗CD22单克隆抗体治疗B细胞异常增殖活化介导为主的自身免疫病，如系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎等，已引起关注。此文就CD22的分子特征、功能以及靶向CD22治疗自身免疫相关性疾病的研究进展进行综述。

新型冠状病毒肺炎大流行在全球范围内造成严重的公共卫生危机。为预防新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）对健康带来的不利影响，不同类型、不同生产工艺的SARS-CoV-2疫苗相继被研发，包括减毒活疫苗、核酸疫苗、病毒载体疫苗、灭活疫苗和重组蛋白疫苗等，而病毒表面的刺突蛋白是SARS-CoV-2疫苗的研究热点。此文主要介绍SARS-CoV-2刺突蛋白的结构、功能与免疫学特性，以及SARS-CoV-2疫苗的研究情况、安全性、适用性等，并讨论潜在问题解决措施。

目的  探讨不同性质的磷酸铝佐剂对9V型肺炎球菌多糖(Streptococcus pneumococcal 9V polysaccharide,9V-PS)结合物的免疫促进作用，及琥珀酸对免疫应答的影响。方法  采用3种磷酸铝佐剂与9V-PS结合物制备疫苗，另外在相同配方的疫苗中加入琥珀酸，同时将无佐剂的9V-PS结合物作为对照。用所制疫苗皮下免疫小鼠，收集不同针次免疫后血清，ELIS A测定免疫后小鼠血清中抗9V- PS IgG抗体浓度。结果  采用不同磷酸铝佐剂的3种疫苗之间比较，小鼠血清中抗9V- PS IgG抗体浓度差异无统计学意义(t值为0.38~0.86，P值均>0.05)。磷酸铝佐剂配伍的疫苗与无佐剂组相比，小鼠血清中抗9V-PS IgG抗体浓度均显著提高，差异有统计学意义(t值为3.75~4.35，P值均<0.05);佐剂A和B组加入琥珀酸与未加入比较，小鼠血清中抗9V- PS IgG抗体浓度差异无统计学意义(t值分别为1.39、0.45，P值均>0.05)。结论  磷酸铝佐剂可以显著提高9V-PS结合物的免疫应答。不同磷酸铝佐剂的免疫促进作用无明显差异。添加琥珀酸对免疫应答不产生明显影响。

目的 评价流感病毒H7N9血凝素（hemagglutinin，HA）亚单位疫苗在动物中的免疫效果。方法 利用杆状病毒表达系统表达分泌型的HA片段，单独或联合Al(OH)₃佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠后，对小鼠进行H7N9毒株的攻击。分析重组H7N9 HA（rH7HA）的免疫保护效果。结果 rH7HA 加Al(OH)₃佐剂与rH7HA单独免疫相比，在血清中诱导了更高的IgG滴度。最高剂量（1.500 μg）rH7HA加佐剂组诱导IgG滴度达2¹⁵，单独诱导IgG滴度达2¹³，但两者之间差异无统计学意义，说明免疫小鼠的rH7HA量达到1.5 μg即能够对同源病毒的感染提供保护。结论 杆状病毒系统表达的分泌型HA通过腹腔注射能够保护小鼠抵抗致死性剂量的同源病毒的感染。

目的 通过检测献血浆者血浆中循环免疫复合物（circulating immune complex，CIC）补体成分3d（complement component 3d，C3d）含量，分析破伤风特异性免疫对献血浆者CIC含量的影响。方法 选取2020年8月25日至9月4日期间，在山东省夏津泰邦单采血浆站和山亭泰邦单采血浆站的献血浆者，分为普通组、常规免疫组和强化免疫组，采用CIC-C3d ELISA试剂检测献血浆者血浆CIC-C3d含量。结果 3组献血浆者CIC-C3d浓度均＜16 μg/ml，3组献血浆者CIC-C3d浓度间差异无统计学意义（F=1.00，P=0.37）。结论 破伤风特异性免疫对献血浆者体内CIC浓度无明显影响。

目的  优化层析-比色法，并对该方法进行分析方法验证；比较优化层析-比色法和层析-积分法，评价两方法测定伤寒Vi精制多糖分子大小的适用性。方法  优化比色法O-乙酰基标准曲线浓度范围，对该方法进行准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性的验证；应用优化层析-比色法和层析-积分法检测多批次伤寒Vi精制多糖分子大小，对结果进行统计学分析。结果 优化层析-比色法准确度回收率均为100%；样品的重复性相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）分别为2.4%和0.0%，中间精密度RSD均为3.4%，连续5次测定标准曲线，决定系数均大于0.999 0，耐用性RSD为4.6%。优化层析-比色法和层析-积分法在检测伤寒Vi精制多糖分子大小时，差异无统计学意义（t=-1.372，P＞0.05）。结论  优化的比色法具有良好的准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性，两种方法均可用于检测伤寒Vi精制多糖分子大小。

目的  制备抗柯萨奇病毒A组2型( coxsackievirus A2,CV-A2)单克隆抗体（单抗），建立CV-A2抗原检测方法。方法  用纯化后的CV-A2全病毒颗粒免疫小鼠，筛选获得抗CV-A2单抗。建立CV-A2抗原检测方法，确定线性范围，对其准确度、精密度、稳定性、专属性进行验证。用 ELISA检测病毒颗粒纯化过程中样品的抗原含量。结果  制备了高效价的抗CV-A2单抗并建立 ELISA抗原检测方法，检测范围为5.00~320.00 ng/ml。高、中、低3个浓度样品准确度验证回收率在89.58%~104.78%之间。重复性验证变异系数分别为2.10%、2.47%、6.18%。中间精密度验证变异系数分别为2.89%、2.69%、1.94%。耐用性验证回收率在84.26%~114.21%之间。包被微孔板于37℃放置3d,样品回收率在90.31%~103.11%之间。专属性验证结果显示该方法只识别CV-A2抗原，与其他抗原均无交叉反应。结论  建立并验证了CV-A2 ELISA抗原检测方法，可应用于病毒纯化过程中样品的抗原检测，还可应用于含CV-A2的手足口病多价疫苗的CV-A2抗原含量检测。

目的  建立准确可靠检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗中三氯甲烷残留量的方法。方法  采用顶空气相色谱进行三氯甲烷残留量检测，用外标法计算三氯甲烷含量。对方法的专属性、线性、范围、准确度、精密度、定量限和耐用性进行验证。结果  三氯甲烷峰5次进样峰面积的相对标准偏差小于5%,且与其他峰分离度大于1.5。阳性对照溶液在相应保留时间处可见三氯甲烷峰，阴性对照溶液无三氯甲烷峰。三氯甲烷的浓度在10~1 000 ng/ml范围内与峰面积成线性关系。浓度为600 ng/ml的供试品溶液回收率在91.3%~99.0%之间，含量相对标准偏差均小于4%。定量限浓度为0.022 g/ml。结论  建立的三氯甲烷残留量检测方法具有良好的专属性、线性、范围、准确度、精密度和耐用性，符合定量检测的需求。

目的 优化层析-比色法，并对该方法进行分析方法验证；比较优化层析-比色法和层析-积分法，评价两方法测定伤寒Vi精制多糖分子大小的适用性。方法 优化比色法O-乙酰基标准曲线浓度范围，对该方法进行准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性的验证；应用优化层析-比色法和层析-积分法检测多批次伤寒Vi精制多糖分子大小，对结果进行统计学分析。结果 优化层析-比色法准确度回收率均为100%；样品的重复性相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）分别为2.4%和0.0%，中间精密度RSD均为3.4%，连续5次测定标准曲线，决定系数均大于0.999 0，耐用性RSD为4.6%。优化层析-比色法和层析-积分法在检测伤寒Vi精制多糖分子大小时，差异无统计学意义（t=-1.372，P＞0.05）。结论  优化的比色法具有良好的准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性，两种方法均可用于检测伤寒Vi精制多糖分子大小。

目的  建立采用国产填料纯化四价流感疫苗病毒的生产工艺。 方法  分别使用进口填料Sepharose 4FF 和国产填料Seplife 4FF，对多价流感疫苗进行纯化。对纯化后的病毒液经过单向免疫扩散检测、ELISA、电子显微镜（电镜）观察，综合评估分离纯化效果。 结果 在50 cm/h流速时，Seplife 4FF对血凝素的回收率高于Sepharose 4FF，卵清蛋白的去除率相当，4个型别流感病毒的卵清蛋白去除率和血凝素回收率的95%置信区间分别为91.5%～94.6%和92.4%～100.8%，两种填料纯化的电镜观察结果一致。 结论  成功建立了用国产填料高效纯化流感病毒的方法。

鲍曼不动杆菌为革兰阴性杆菌，是导致医院感染的常见条件致病菌之一。由于其易产生耐药性及植入性医疗操作的增加，鲍曼不动杆菌生物膜导致的院内感染成为临床医师的极大挑战。因此，了解鲍曼不动杆菌的耐药机制具有重要的意义，分析其生物膜对耐药性的影响及其机制有助于开发新的联合治疗方案。此文从细菌生物膜的角度归纳鲍曼不动杆菌的耐药机制研究进展，讨论鲍曼不动杆菌生物膜的形成过程、调节因素以及对耐药性的影响，概述了亚致死剂量抗生素对鲍曼不动杆菌耐药形成的影响，为针对鲍曼不动杆菌生物膜所致感染制定适宜的治疗方案和防控耐药菌株传播提供参考。

 支气管肺发育不良（broncho-pulmonary dysplasia，BPD）是早产儿最常见的并发症之一，也是影响早产儿预后的重要因素。然而目前临床对BPD的治疗方法有限且疗效不佳，寻找BPD新的防治方案迫在眉睫。近些年，基础实验及临床研究均发现间充质干细胞移植对BPD有一定疗效，极可能成为治疗BPD新的有效手段。此文从基础和临床研究两个层面总结间充质干细胞对BPD防治作用，并对其远景进行展望。

目的 研究抗新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）卵黄抗体（egg yolk immunoglobulin，IgY）在体外对SARS-CoV-2及其变异株的中和抑制作用，探讨其作为鼻腔/口腔喷雾剂用于预防和阻断SARS-CoV-2感染的可能性。方法 采用间接ELISA检测抗SARS-CoV-2 IgY原液及成品对刺突（spike，S）蛋白的抗体效价；用微量细胞病变法检测其对SARS-CoV-2的中和活性；用萤光素酶发光法检测其对SARS-CoV-2假病毒的中和作用。结果 抗SARS-CoV-2 IgY原液的抗S抗原效价为1:32 000~1:64 000，成品的效价为1:16 000~1:32 000；两批原液对活病毒的中和效价分别为1:128和1:256，相应的抑制中浓度（median inhibitory concentration，IC₅₀）分别为36.22和36.50 μg/ml；成品对SARS-CoV-2假病毒的IC₅₀均值分别为4.571 μg/ml（WT）和6.07 μg/ml（D614G）；对变异株假病毒的IC₅₀分别为15.09~29.94 μg/ml（B.1.1.7）、41.71~55.56 μg/ml（B.1.351）和16.66~32.33 μg/ml（B.1.617.2）。结论 抗SARS-CoV-2 IgY与SARS-CoV-2重组S蛋白具有良好的结合活性，在体外能显著地中和SARS-CoV-2活病毒、假病毒及变异株假病毒，有望用于SARS-CoV-2感染的预防和阻断。

目的 对比破伤风疫苗在BALB/c与NIH小鼠中的免疫效果，探讨将BALB/c小鼠用于破伤风疫苗效力实验的可能。方法 将破伤风毒素系列稀释至适当的浓度范围，根据小鼠存活情况摸索合适的毒素浓度，重复实验，测定BALB/c和NIH小鼠的破伤风毒素半数致死量（median lethal dose，LD₅₀）。分别用BALB/c和NIH小鼠的破伤风毒素2 LD₅₀同时攻击BALB/c与NIH小鼠，考察BALB/c和NIH小鼠对破伤风毒素的敏感性。将破伤风疫苗稀释50、100、200倍，分别作为高剂量组、中剂量组、低剂量组免疫BALB/c和NIH小鼠，免疫4周后用50 LD₅₀破伤风毒素攻毒，观察小鼠死亡情况。结果   BALB/c小鼠的破伤风毒素2 LD₅₀为0.16 μg/ml；NIH小鼠的破伤风毒素2 LD₅₀为0.23 μg/ml。用0.16 μg/ml的破伤风毒素分别注射BALB/c和NIH小鼠各3组，每组6只，BALB/c小鼠死亡动物数为3、3、2，NIH小鼠死亡动物数为0、0、0。用0.23 μg/ml的破伤风毒素分别注射BALB/c和NIH小鼠各3组，每组6只，BALB/c小鼠死亡动物数为6、6、6，NIH小鼠死亡动物数为3、2、3。3批破伤风疫苗免疫后的BALB/c与NIH小鼠采用相同攻毒剂量，每组14只，BALB/c小鼠攻毒后，高剂量组存活数为13、14、14，中剂量组存活数为10、10、9，低剂量组存活数为4、3、4；NIH小鼠攻毒后，高剂量组存活数为10、10、10，中剂量组存活数为6、7、6，低剂量组存活数为0、0、1。结论   BALB/c小鼠比NIH小鼠对破伤风毒素具有更高的敏感性，能更好地对破伤风疫苗产生免疫应答，在破伤风疫苗效价测定实验中是一种较为理想的小鼠品系。

目的 考察皮内注射用卡介苗与其直接接触的包装容器的相容性，评估疫苗现用包装容器低硼硅玻璃安瓿的适宜性。方法 分别检测已包装的皮内注射用卡介苗在加速条件及长期规定储存条件下，疫苗及低硼硅玻璃安瓿的外观、安瓿中有毒有害金属离子（As、Sb、Pb、Cd） 迁移量、安瓿内表面脱片风险等，同时分析安瓿对疫苗质量的影响程度及安瓿是否被疫苗腐蚀受损。结果 3 批皮内注射用卡介苗在23~27 ℃放置 6个月，2～8 ℃放置30个月，安瓿中有毒有害金属离子迁移至疫苗中的量远低于安全限值，As迁移量为0.001~0.006 μg/支、Sb迁移量≤0.005 μg/支、Pb迁移量为0.028~0.080 μg/支、Cd迁移量为0.007~0.018 μg/支，低硼硅玻璃安瓿内表面被疫苗腐蚀脱片的风险较低。3批皮内注射用卡介苗在23~27 ℃放置6个月和2~8 ℃放置27个月，疫苗及低硼硅玻璃安瓿外观与0个月一致；关键质量检定结果水分为1.5%~-2.4%、渗透压摩尔浓度为342~378 mOsmol/kg、活菌数为（3.61~7.75）×10⁶  CFU/mg、效力为15~20 mm，均合格。结论 皮内注射用卡介苗与低硼硅玻璃安瓿发生相互作用的风险可接受，相容性良好，表明现用低硼硅玻璃安瓿是适宜的。

目的  验证和评价人抗凝血酶Ⅲ（human antithrombin Ⅲ，AT-Ⅲ）生产工艺中有机溶剂/去污剂（solvent/detergent，S/D）法联合纳米膜过滤法灭活／去除病毒的可行性。方法  采用S/D法作为AT-Ⅲ病毒灭活工艺，纳米膜过滤法（20 nm孔径）作为其病毒去除工艺，分析病毒灭活／去除工艺对AT-Ⅲ活性的影响；以伪狂犬病毒、辛德毕斯病毒、猪细小病毒、脑心肌炎病毒作为指示病毒，对上述工艺进行病毒灭活／去除工艺效果的验证。结果   S/D法联合纳米膜过滤法可有效灭活／去除脂包膜病毒和非脂包膜病毒，指示病毒滴度下降均>4 lg；且AT-Ⅲ的生物活性及其他各项指标未发生明显改变，活性变化<10%。结论  研究建立的S/D法联合纳米膜过滤法可有效灭活／去除AT-Ⅲ中的指示病毒，该方法为凝血因子类制品的病毒灭活验证工艺提供了参考。

目的   对定量检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗中细菌内毒素含量的动态浊度法进行验证。方法   采用动态浊度法定量检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗中细菌内毒素含量，并对分析方法的线性、专属性、准确度、重复性、中间精密度和耐用性进行验证。结果  动态浊度法的线性相关系数绝对值为0.996；最大有效稀释倍数下专属性回收率为68.81%~73.80%；准确度回收率为53.50%~77.77%；3名实验人员重复性相对标准偏差分别为2.0%、3.6%、2.0%；中间精密度相对标准偏差为7.6%；耐用性回收率为66.49%~108.34%。 结论   动态浊度法检测冻干甲型肝炎中的细菌内毒素含量的方法具有良好的专属性、准确度、线性、重复性、中间精密度和耐用性，符合定量检测和数据完整性的要求。

目的  考察一次性储液袋材质的耐受性、冻存原液的病毒活力和工艺可操作性，确认一次性储液袋用于腮腺炎病毒原液冻存工艺的可行性。方法 使用两种品牌（TH和AB）的一次性储液袋和1 L玻璃瓶各冻存3批腮腺炎病毒原液，并对冻存原液开展稳定性研究。结果  使用TH、AB品牌一次性储液袋冻存的原液置－20 ℃以下保存，至15个月病毒滴度平均下降幅度分别为0.10和0.13 lgCCID₅₀/ml，两者间差异无统计学意义，预估稳定期均大于15个月，远超现有原液有效期；用1 L玻璃瓶冻存3批原液在同等条件保存，至15个月病毒滴度平均下降幅度为0.17 lgCCID₅₀/ml。两种工艺冻存的病毒滴度均符合标准（6.1~7.5 lgCCID₅₀/ml），且差异无统计学意义。结论  一次性储液袋可替代现有1 L玻璃瓶用于腮腺炎病毒原液的冻存，在无菌性、有效性等方面更贴合腮腺炎减毒活疫苗的生产要求。

 目的  建立标准化的布鲁菌Tb噬菌体效价噬斑测定方法。方法  通过比较单层琼脂平板法与双层琼脂平板法，对宿主菌接种浓度、吸附时间及培养时间等参数，标准化布鲁菌Tb噬菌体效价测定方法，并分析其精密性。结果  虽然两种方法测定的噬菌体结果无差别，但双层琼脂平板法的噬斑背景背景更清晰，易于结果观察。经优化后确定布鲁菌Tb噬菌体效价测定条件：宿主菌的最适接种浓度为1.0×10⁹ ml^-1，宿主菌与噬菌体混合后不需吸附，培养3~5 d后进行噬菌斑计数。建立的标准检测方法具有较好的精密性。结论  建立了布鲁菌Tb噬菌体效价噬菌斑测定方法，为布鲁菌Tb噬菌体及布鲁菌活疫苗质量控制奠定了基础。

流感是一种由流感病毒感染引起的急性呼吸道传染病，每年冬春季在全球范围内有不同程度的流行，造成了严重的社会负担，接种流感疫苗是重要的流感预防策略。长期以来使用的三价流感疫苗由WHO推荐的2个甲型疫苗株（甲型H1N1、甲型H3N2）和1个乙型疫苗株组成。流感乙型毒株的两种株系易发生错配或交差循环感染，从而导致乙型疫苗株的保护率下降、感染发病率和死亡率升高。鉴于以上情况，2012年2月WHO推荐使用包含2个乙型疫苗株的四价流感疫苗，随后国内外多种四价流感疫苗相继获批上市。此文就四价流感疫苗的临床研究进展进行综述。

树突状细胞（dendritic cell，DC）是一种专职APC，来源于造血干细胞。近年来的研究发现，DC能高效摄取、加工、呈递抗原。其中，未成熟DC具有较强的迁移能力；成熟DC能有效激活初始T细胞，适时适度地启动机体的适应性免疫应答。此文综述DC的起源、分化与特征和免疫调节能力，同时回顾DC在肿瘤、动脉粥样硬化和巨细胞病毒感染等疾病中的重要研究进展。

膜蛋白是与细胞膜磷脂双分子层结合的蛋白质，在生命活动中具有重要作用，也是重要的药物靶点。为了解膜蛋白生化反应的机制和设计新的药物靶点，膜蛋白的纯化方法显得尤为重要。完整的膜蛋白疏水性较强，在膜裂解过程中容易形成沉淀，复杂的纯化工艺会导致膜蛋白回收率较低，并且膜蛋白本身在天然宿主中低表达。因此选择不仅能高效提取膜蛋白，还能保持膜蛋白分子天然空间结构和理化性质的纯化方法十分重要。此文主要对膜蛋白的提取、去污剂的选择、膜蛋白的纯化、去污剂的去除等方面的研究进展进行概述。

目的 制备抗汉城病毒（Seoul virus，SEOV）荧光单克隆抗体（单抗），并初步应用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液的病毒灭活验证。 方法  以SEOV L-99株灭活病毒原液为免疫原，采用小鼠杂交瘤细胞融合技术，筛选抗SEOV特异性单抗杂交瘤；小鼠体内诱生法制备单抗腹水，蛋白A亲和层析纯化单抗，并以蛋白质印迹法鉴定其特异性；间接ELISA测定单抗效价和相对亲和力；纯化单抗采用搅拌法标记异硫氰酸荧光素，并分别采用直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法对Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行病毒灭活验证。结果 共筛选出4株特异性抗SEOV L-99株杂交瘤1D5、2E3、3A4及5B7。蛋白质印迹法鉴定4株单抗均与SEOV L-99株核衣壳蛋白发生特异性反应；间接ELISA测定腹水效价为3.13×10^-8~ 1.25×10^-7；相对亲和力顺序为1D5>3A4>2E3>5B7；纯化抗体纯度>95%；异硫氰酸荧光素标记1D5株单抗的结合比率为3.4；直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法检测盲传3代的Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液，病毒灭活验证结果一致。结论 成功筛选到高效价特异性抗SEOV单抗，并制备成荧光单抗，可用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗生产工艺中的病毒灭活验证。

 目的  评价进行工艺优化后的注射用A型肉毒毒素（0.1 ml分装量）与注射用冷冻干燥无菌粉末用氯化丁基橡胶塞（覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜）的相容性。方法  完成包装的注射用A型肉毒毒素于（25±2）℃、相对湿度（60±5）%的条件下保存6个月，对元素杂质、抗氧剂、硬脂酸和棕榈酸、氟化物进行检测，考察胶塞成分是否会向制品中迁移；对制品进行效价、pH、水分、右旋糖酐和蔗糖、氧含量的测定及无菌检查，评价药品质量是否仍然可控。 结果 胶塞中元素杂质、抗氧剂、硬脂酸和棕榈酸、氟化物未见向制品中迁移，制品效价为104~119 IU/瓶，pH为5.94~6.07，水分最大值为2.5%，右旋糖酐和蔗糖含量稳定，氧含量最大值为3.4%，均无菌生长，符合质量标准。结论  注射用A型肉毒毒素与胶塞相容性良好，胶塞可用于生产。