目的  建立麻疹、腮腺炎、风疹、水痘联合减毒活疫苗（combined live attenuated measles，mumps，rubella and varicella vaccine，MMRV）的生产工艺。方法  根据现有疫苗病毒原液生产工艺，将麻疹病毒沪-191纯化株、腮腺炎病毒S79株、风疹病毒BRD-Ⅱ株和水痘-带状疱疹病毒Oka株在原代鸡胚成纤维细胞或人二倍体细胞MRC-5株中制备高滴度病毒原液，并超低温保存。筛选无明胶冻干稳定剂配方。按国外已上市同类产品的病毒配比，研究MMRV中4种病毒的原液配制滴度及成品配制比例，建立最佳冻干工艺。结果  用筛选出的适合于MMRV的无明胶冻干稳定剂配方进行试验，确定病毒原液的配制滴度为，麻疹4.6 lg半数细胞培养感染量（50% cell culture infective dose，CCID₅₀）/ml、腮腺炎5.8 lgCCID₅₀/ml、风疹4.3 lgCCID₅₀/ml、水痘4.8 lg噬斑形成单位（plaque forming unit，PFU）/ml。使成品中腮腺炎病毒滴度至少达到麻疹和风疹和水痘病毒的10倍，水痘病毒滴度高于现有单价水痘疫苗。连续制备3批MMRV，平均病毒滴度为，麻疹4.5 lgCCID₅₀/ml、腮腺炎5.1 lgCCID₅₀/ml、风疹4.3 lgCCID₅₀/ml、水痘4.6 lgPFU/ml；平均水分为1.2%。其他项目检定均合格。结论  建立了MMRV的生产工艺，可以稳定生产出达到国外同类产品质量标准并符合我国4种单价减毒活疫苗国家标准的产品。

目的  对疫苗生产车间半成品配制区域的悬浮粒子进行动态监测和数据分析。方法  采用便携式悬浮粒子采样仪，于2016和2017年对乙型脑炎减毒活疫苗生产洁净车间进行日常悬浮粒子检测，其中A、B级洁净区域为班次检测，C级洁净区域为每周检测。对2年的检测数据制作单值-移动极差控制图，并进行t检验比较。结果  3个级别洁净区域的悬浮粒子数或均值如下，A级区≥0.5 μm的粒子数均<1，≥5.0 μm的粒子数均为0。B级区≥0.5 μm的粒子数均值：2016年为46.82（0～143.21），2017年为38.83（0～125.33）；≥5.0 μm的粒子数均值：2016年为2.52（0～7.83），2017年为2.41（0～7.15）。C级区≥0.5 μm的粒子数均值：2016年为214.64（0～679.16），2017年为209.81（0～619.31）；≥5.0 μm的粒子数均值：2016年为15.04（0～47.13），2017年为14.16（0～39.24）。3个洁净区域的悬浮粒子数均小于95%置信上限且均符合GMP范围要求。2016和2017年检测数据的差异无统计学意义（t值为0.14～1.02，P值均>0.05）。结论  疫苗生产车间半成品配制区的悬浮粒子动态监测结果符合GMP标准。

 目的  研究0.5%硫代硫酸钠、10%胰蛋白胨大豆肉汤（tryptic soy broth， TSB）培养基、10%Letheen肉汤培养基对实验室常用的4种消毒剂的中和效果，为疫苗生产和检定中科学选择中和剂提供依据。 方法  取生长良好的Vero细胞接种于96孔培养板，每组8个复孔，置于37 ℃、5% CO2培养过夜。将3种中和剂分别与杀孢子剂、0.5%“84”消毒液、酸性苯酸盐、碱性苯酚盐4种消毒剂中和后，接种于单层生长的Vero细胞，显微镜下观察细胞生长情况。结果  0.5%硫代硫酸钠分别与杀孢子剂、0.5%“84”消毒液中和后接种细胞，8孔细胞全部存活；而0.5%硫代硫酸钠分别与酸性苯酚盐和碱性苯酚盐的中和产物接种细胞后，细胞全部死亡。10% TSB培养基分别与酸性苯酚盐、碱性苯酚盐中和后接种细胞，8孔细胞全部存活；而10% TSB培养基分别与杀孢子剂和0.5%“84”消毒液的中和产物接种细胞后，细胞全部死亡。10%Letheen肉汤培养基接种细胞后，8个孔细胞全部死亡。结论  0.5%硫代硫酸钠可中和杀孢子剂和0.5%“84”消毒液的消毒作用，10%TSB培养基可中和酸性苯酚盐和碱性苯酚盐的消毒作用。10%Letheen肉汤培养对Vero细胞有毒性作用。

目的 探讨纳米膜过滤的最佳实验条件，构建静注人免疫球蛋白的纳米膜过滤工艺模型。方法 分析影响纳米膜过滤效率的因素，利用正交实验对纳米膜预过滤系统、制品蛋白质量浓度、pH值、保护剂相关实验参数进行优化。结果 选择过滤载量更高的预过滤器。pH值对纳米膜过滤载量影响显著；低蛋白质量浓度条件下，蛋白浓度对过滤载量影响不显著；保护剂对过滤载量影响不显著。预过滤器与纳米膜的最佳面积比为1:1。优化条件下，纳米膜的最大过滤载量达13.6 kg/m2。结论 通过优化工艺组成条件和预过滤可以提高静注人免疫球蛋白过滤载量，进而降低生产过程中纳米膜过滤成本。

轮状病毒（rotavirus，RV）是全球范围内导致婴幼儿腹泻的主要病原体之一。研究表明干净的水源和良好的卫生环境不能阻断RV传播，且目前尚无特异性治疗RV性腹泻的药物，使用RV疫苗是唯一有效的防控手段。此文对RV疫苗的使用现状、研发进展及面临的挑战做一综述。

人二倍体细胞是WHO认可的更安全的疫苗生产用细胞基质，已成为全世界疫苗生产首选的细胞基质。我国自主研制的二倍体细胞KMB17株和2BS株来源于人胚肺细胞，因其无致癌性、无外源因子污染，且细胞性状比较稳定，越来越多地在人用疫苗研发与生产中使用。由于KMB17细胞和2BS细胞对多种病毒具有敏感性，因此也作为细胞基质被应用于许多病毒性疫苗的研究开发。目前，用这两种人二倍体细胞生产的疫苗，包括甲型肝炎疫苗、脊髓灰质炎疫苗和肠道病毒71型灭活疫苗等，已在我国大量上市。

由于重组疫苗抗原结构以及生产工艺的复杂性，对疫苗的质量控制提出了更高的要求。重组疫苗抗原保持天然构象的程度直接决定其诱导免疫应答的程度，从而最终影响疫苗的有效性。对抗原开展多角度、多尺度、多方位的结构研究不仅能够完成抗原的结构确证，还有助于了解产品的关键质量属性，从而建立有效的质量控制体系。此文综述了三维结构测定、抗原表位鉴定及颗粒性分析等多种结构分析技术，以及结构分析在重组疫苗质量研究中的应用。

随着现代生物技术的发展，重组蛋白疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗不断涌现，迫切需要安全有效的佐剂来增强其免疫原性。水包油型乳剂是新型佐剂中的一个研发热点，如MF59和AS03已在欧盟和美国获批用于人用疫苗，且均被证实具有良好的效果和可靠的安全性。此文就水包油型佐剂的研究进展做一综述，以期为开发高效、低毒的新型佐剂提供参考。

IFN-α/β是机体对抗外来病原体的第一道防线，其产生和后续激活的细胞信号转导可诱导具有抑制病毒感染和复制作用的IFN刺激基因的表达。然而，大多数病毒可通过表达一种或多种蛋白抵抗宿主细胞的抗病毒反应。流感病毒非结构蛋白1（nonstructural protein 1，NS1）作为多功能毒力因子，在流感病毒感染过程中起重要作用。此文概述了NS1的结构与功能及抑制IFN-α/β产生和抗病毒效应作用的机制，为研究流感病毒致病机理提供参考。

国际生物标准化联盟于2017年9月28—30日在美国马里兰州罗克维尔市举办了第二届人体挑战试验研讨会，旨在审查并促进人体挑战试验或受控人体感染的应用，重点推进受控人体感染在新疫苗和疫苗改进研发中的应用。在此次会议中，与会者讨论了有关人体挑战试验的多方面内容，达成一项共识：在合乎伦理、保证安全且知情同意前提下，可通过实施人体挑战试验以促进和加速疫苗研发。

 目的  比较以1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸盐（1-cyano-4-dimethylamino pyridine tetrafluoroborate，CDAP）和溴化氰（cyanogen bromide，CNBr）为活化剂制备的4型肺炎球菌多糖（type 4 pneumococcal polysaccharide，PS4）-白喉类毒素（diphtheria toxoid，DT）结合物（PS4-DT）原液的免疫原性。方法  分别以CDAP或CNBr为活化剂，各制备1批PS4-DT原液，并对原液的相关质量指标进行检测。分别用2种PS4-DT原液，间隔2周皮下注射NIH小鼠3次，末次免疫1周后采集血清，用ELISA检测血清抗体水平，比较不同方法制备的2种PS4-DT原液的免疫原性。结果  2种PS4-DT原液的主要质量指标均符合相关规定的要求，结合PS4的含量分别为257.1和203.1 μg/ml。2种PS4-DT原液均可与PS4抗血清发生特异性反应。抑制ELISA检测显示，2种PS4-DT原液对PS4抗血清的抑制率均达到100%。2种PS4-DT原液免疫小鼠产生的抗PS4抗体水平相近，抗体几何平均滴度分别为970.06和844.49。 结论  不同种方法制备的2种PS4-DT原液在小鼠中的免疫原性相似，且均可诱导小鼠产生较高水平的抗体。

目的  通过强制降解试验观察冻干b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）结合疫苗在高温、高湿、强光照射下的稳定性，为疫苗生产工艺、包装材料和贮存条件的确定提供科学依据。 方法  分别采用40 ℃温度、（75±5）%相对湿度、（4 500 ±500）lx光照处理冻干Hib结合疫苗，取样进行疫苗的全部项目检测。 结果  疫苗经40 ℃处理10 d，水分由2.0%上升至2.9%，多糖分子大小（分配系数小于0.2的洗脱液回收率）由94%下降至85%，但仍分别符合≤3.0%和＞60%的质量标准；而高分子结合物含量由87%降至75%，不符合≥80%的质量标准。（75±5）%相对湿度和（4 500±500）lx光照处理10 d对疫苗的影响不明显，疫苗质量指标仍符合规定。结论  高温是影响冻干Hib结合疫苗稳定性的主要因素。

目的 建立A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺。方法 采用陶瓷羟基磷灰石和DEAE Sepharose FF层析柱，在PBS体系中纯化A群多糖。以0.5%脱氧胆酸钠预处理C群多糖，用陶瓷羟基磷灰石层析柱在PBS体系中纯化C群多糖。以含有脱氧胆酸钠的平衡缓冲液溶解Y和W135群多糖，再用Capto Adhere和Capto DEAE层析柱串联纯化。纯化的多糖经Sephadex G-25 Medium层析柱脱盐后冻干，按中国药典2015年版三部的要求进行检定。结果  经过层析纯化，A、C、Y、W135群多糖的蛋白质含量分别降至3.7、4.2、5.4和5.3 mg/g，核酸含量分别降至1.2、3.0、1.1和0.8 mg/g，均符合药典要求。此外，磷、唾液酸和O-乙酰基含量等指标亦均符合药典标准。结论 建立了A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖的层析纯化工艺。

目的  比较检测A群脑膜炎球菌多糖疫苗中磷含量的中国药典（2015年版）方法（方法1）与欧洲药典（8.0版）方法（方法2）的差异，为今后的方法选择及进一步优化提供参考。方法  分别用方法1和方法2检测标准磷溶液和A群脑膜炎球菌多糖疫苗中的磷含量，比较这2种方法的标准曲线、定量限、准确度、精密度、耐用性（溶液稳定性）的差异。 结果  方法1和方法2标准曲线的决定系数均值分别为0.997 3和0.999 3，定量限分别为3.97和2.16 μg。检测同一批A群脑膜炎球菌多糖疫苗显示，磷含量检测结果的相对标准偏差，方法1和方法2分别为10.3%和7.6%；磷加样回收率，方法1为87.8%～113.1%，方法2为97.1～103.6%。分别将反应溶液放置0、30、60 min后开始比色，方法1和方法2每30 min吸光度升高均值分别为0.059和0.003。结论  2种方法均可用于A群脑膜炎球菌多糖疫苗中磷含量的检测。与方法1相比，方法2的标准曲线线性更佳、检测定量限更低、准确度和精密度更高、耐用性（溶液稳定性）更好。

目的 观察国产皮内注射用卡介苗（卡介苗）的稳定性。方法 取26批上海生物制品研究所有限责任公司（上海公司）2007－2018年生产的卡介苗，按照国家食品药品监督管理总局批准的卡介苗注册标准和中国药典的要求进行各项检定：在0个月进行热稳定性试验，在0和24个月进行鉴别试验、外观、装量差异、渗透压摩尔浓度（2015年12月以后的制品）、水分、纯菌检查、效力测定、无有毒分枝杆菌试验。在0、12、24个月进行活菌数测定。同时对新、老车间生产的各3批疫苗进行加速稳定性与长期稳定性试验，重点考察水分和活菌数。结果 卡介苗在有效期内各项指标检定结果均符合注册标准和药典要求。新、老车间生产的疫苗质量相似。疫苗水分都不高于3.0%。活菌计数均在1.0×106～8.0×106 菌落形成单位/mg。结论 上海公司生产卡介苗的质量是安全、有效、稳定、均一的。

目的  对发生场地变更的皮内注射用卡介苗产品进行关键质量要素对比和分析，确认变更后产品质量与变更前一致。方法  对新老车间卡介苗产品关键质量指标进行分析，同时对卡介苗成品稳定性、卡介菌结构特异性、卡介苗成品动物安全性等方面进行比较研究。结果  新老车间卡介苗产品的关键质量指标均符合相关规定要求，其中新车间卡介苗半成品沉降率在4.55%~10.00%，半成品活菌数在（1.82~2.32）×10⁷ 菌落形成单位/mg，成品活菌数在（3.34~4.97）×10⁶ 菌落形成单位/mg，均在老车间历史数据警戒限范围以内。新老车间生产的卡介苗成品的稳定性、卡介菌结构特异性和产品安全性等实验结果均符合相关规定要求。结论  卡介苗生产场地变更未对产品质量产生不利影响。

此文介绍了自2015年实施《WHO终止结核病策略（2016—2035）》以来的全球结核病状况，结核病疫苗研究的挑战和建议，以及结核病疫苗技术、临床前研究和临床试验的最新进展。

目前，国内许多疫苗生产厂家都在致力于研制以无细胞组分百日咳-白喉-破伤风疫苗（diphtheria，tetanus，acelluar component pertussis vaccine，DTacP）为基础的联合疫苗，而国外不同厂家该类联合疫苗的临床试验，其免疫后抗体检测方法和保护性评判标准有较大差异。此文旨在通过比较不同DTacP-灭活脊髓灰质炎病毒疫苗的临床免疫原性结果，包括血清保护率/血清转换率和不同方法测定的抗体几何平均滴度，为临床试验方案设计提供依据和思路。

霍乱疫苗是防控霍乱的重要工具之一。市售霍乱疫苗Shanchol为口服双价全细胞灭活疫苗，具有良好的免疫原性和安全性，现已用于防控霍乱的大规模接种运动。此文就Shanchol疫苗的免疫原性和应用现状、影响疫苗接种效果的因素以及疫苗在特殊人群中的安全性等相关研究进行综述。

人肠道致病菌具有高度传染性，可引起多种疾病。目前已有多种肠道细菌灭活疫苗和减毒活疫苗通过安全性评价上市；重组蛋白疫苗、结合疫苗和亚单位疫苗等新型疫苗的研究已获得较好的结果。此文对人肠道致病菌及其相关新疫苗的研究进展做一综述。

我国是结核病高负担国家。在结核病免疫预防方面，参考WHO的建议，对新生儿在出生时立即接种卡介苗[1-3]。因此，卡介苗是目前接种者年龄最小的疫苗，也是接种后异常反应报告较多的疫苗[4]。鉴于卡介苗接种人群的特殊性，卡介苗的质量至关重要，而疫苗质量保证的关键是风险识别与控制。本文对卡介苗成品的质量风险进行评估，并提出相应控制措施，以期减少卡介苗上市后的质量风险。

第五届全球结核病疫苗论坛于2018年2月20－23日在印度新德里召开。来自30多个国家的近350人参加了会议。论坛讨论了进入临床试验的新疫苗、新给药途径、新检测方法和研发中的生物标志物，并展示了使用H4:IC31候选疫苗的首个预防感染的临床试验以及BCG复种的结果。

目的  研究苯酚提取法对A 群脑膜炎球菌多糖料液中细菌内毒素含量的影响。方法  用苯酚对A 群脑膜炎球菌多糖料液进行提取，比较粗制多糖不同溶解倍数、苯酚提取过程中采用不同搅拌转数、提取次数、提取温度等因素对多糖细菌内毒素含量的影响。  结果  粗制多糖采用4.5%醋酸钠溶液1∶100（质量体积比）溶解后进行苯酚提取的多糖细菌内毒素含量最低。同时，综合考虑多糖料液中蛋白含量、多糖回收率的检定结果，确定用苯酚进行提取的最佳条件为搅拌转数为400 转/min，提取次数为3次，温度为13～15 ℃，可有效降低多糖料液中细菌内毒素的含量。  结论  苯酚提取法可明显降低A 群脑膜炎球菌粗制多糖料液中的细菌内毒素含量。

目的  评价杀孢子剂、“84”消毒液、酸性苯酚盐、碱性苯酚盐对Sabin株脊髓灰质炎病毒的杀灭效果。方法  首先采用中和剂鉴定试验鉴定消毒剂的中和剂，然后通过悬液定量病毒杀灭试验比较4种消毒剂对Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅱ型的杀灭效果。杀灭对数值>4.0 lg半数细胞培养感染量（50% cell culture infective dose，CCID50）/ml，表示达到消毒效果。结果  中和剂鉴定结果表明，0.5% 硫代硫酸钠可有效中和杀孢子剂和“84”消毒液对病毒的杀灭作用，10%胰蛋白胨大豆肉汤培养基可有效中和酸性苯酚盐和碱性苯酚盐对病毒的杀灭作用。杀孢子剂和1.0%“84”消毒液分别与病毒作用30 min，平均杀灭对数值均>4.0 lgCCID50/ml，达到消毒效果。0.5%“84”消毒液、酸性苯酚盐、碱性苯酚盐分别与病毒作用45 min，平均杀灭对数值仍<4.0 lgCCID50/ml，没有达到预期的消毒效果。结论  杀孢子剂和氯含量较高的“84”消毒液对Sabin株脊髓灰质炎病毒的杀灭效果远大于氯含量较低的“84”消毒液以及酸性和碱性苯酚盐。

目的  建立一种定量检测异丙醇消毒剂含量的气相色谱法。方法  采用DB-1气相色谱柱，尺寸为30 m（长）×0.53 mm（内径）×3.00 µm（膜厚）。色谱条件如下：程序升温；以氮气为载气，恒定流速5 ml/min；进样口温度为200 ℃，检测器温度为275 ℃；分流进样，进样量1 µl。对该法进行专属性、准确性、重复性、耐用性验证。结果  异丙醇气体和正丁醇气体完全分离，分离度为25.4。该法在考察范围内线性良好，决定系数为0.999 977。正丁醇稀释液色谱图中没有干扰峰出现。3个浓度级异丙醇测试液的回收率为98%～101%。2名分析员分别检测同一样品的6个平行测试液，测定结果的相对标准偏差为0.5%。结论  建
立的方法专属性、准确性、重复性和耐用性良好，可用于异丙醇消毒剂的定量检测。

目的 建立一种简便、快速的尿酸氧化酶四聚体提取纯化的方法，以适应大规模生产需求。方法 首先通过基因工程的方法获得可以稳定发酵生产尿酸氧化酶的大肠埃希菌菌株，再通过一步萃取法从破碎菌体沉淀中获得尿酸氧化酶蛋白混合物，通过硫酸铵沉淀、离子交换和分子筛层析，最终获得纯化的活性尿酸氧化酶四聚体。结果 通过优化发酵及提取条件，每升发酵液可得到尿酸氧化酶四聚体蛋白约400 mg，其纯度>95%，比活>10 U/mg。结论 建立了一种新的尿酸氧化酶四聚体高效提取纯化的方法。

目的  建立洁净区环境监测微生物数据库，统计分析悬浮粒子动态监测变化情况，确认疫苗分装区的洁净度符合疫苗生产要求。方法  对疫苗分装区进行空气调节系统性能再验证环境监测，对该区域的培养基灌装试验进行在线环境监测，对以上所有环境监测获得菌进行菌型分析，建立环境监测微生物数据库。结果  在分装前准备、分装中产品入柜和排除故障、分装后清场期间，悬浮粒子浓度变化明显，出现峰值（≥0.5 μm悬浮粒子浓度最大值1 624 粒/m3），但整体水平仍较低。监测到的微生物主要菌型包括里拉/藤黄微球菌、蜡样芽孢杆菌、人葡萄球菌、科氏葡萄球菌科氏亚种、沃氏葡萄球菌等。结论  疫苗分装区洁净度符合无菌药品生产要求，环境监测微生物数据库的建立和悬浮粒子监测结果的统计分析，为制定有效的无菌药品生产质量控制措施提供了必要且针对性较强的依据。

目的  利用响应面法对Fractogel EMD TMAE介质在静注人免疫球蛋白层析纯化中的应用条件进行优化，确立最佳层析参数。方法  采用双因素三水平响应面法设计层析参数pH值和电导率，用双缩脲法和高效液相色谱法分别测定蛋白浓度和分子大小分布，以蛋白回收率、单体＋二聚体含量评价纯化效果，获得最优层析参数并进行验证。结果  优化的层析纯化平衡和上样条件为pH 5.40，电导率1.05 mS/cm。在该条件下以血浆组分Ⅱ为原料，层析后蛋白回收率为（96.6±3.1）%，IgG单体＋二聚体比例为（99.98±0.02）%，IgA含量为（2.6±1.1）mg/L，IgM含量为（4.5±1.4）mg/L。结论  采用经响应面法优化后的Fractogel EMD TMAE层析条件，可用于纯化血浆组分Ⅱ制备静注人免疫球蛋白制品。

目的 对比用低温乙醇蛋白分离工艺制备的静注人免疫球蛋白（pH4）和两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白（10%）产品质量指标，分析制备工艺对产品质量的影响。方法 对2种工艺的产品进行IgA含量、分子大小分布、抗-HBs效价、蛋白空间结构、Fc片段活性、抗体谱和IgG亚型分布等指标的检测和对比分析。结果 两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白的IgA含量（5.30 μg/ml）明显低于低温乙醇分离制备的（281.95 μg/ml），而分子大小分布、抗-HBs效价、蛋白空间结构、Fc片段活性、抗体谱、亚型分布指标没有明显差别。结论 两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白（10%）具有更高的安全性。

 目的  研究一步离子交换层析法制备人凝血因子Ⅷ（factor Ⅷ，FⅧ）/血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）混合物的最适层析条件。方法  以含不同浓度氯化钠的缓冲液进行线性递度洗脱来确定层析缓冲液的最适离子强度和pH值，同时研究上样体积对该法的影响。结果  以pH 7.0的含250 mmol/L氯化钠的洗涤缓冲液液和含400 mmol/L氯化钠的洗脱缓冲液液进行离子交换层析，所得产物的FⅧ与vWF效价比约为1∶1，FⅧ回收率为76.51%。结论  采用一步离子交换层析法制备FⅧ/vWF混合物，可使FⅧ与vWF效价比达到约1∶1。

目的 在大肠埃希菌中建立同时进行PCR克隆和重组蛋白质快速表达的方法。方法 通过TA载体将包含目的基因和全部蛋白表达元件的蛋白表达单位引入大肠埃希菌后，无需使用任何限制性酶，直接在大肠埃希菌中表达编码的蛋白质。结果 通过小规模或大规模表达多种不同蛋白质，证实了该方法的有效性和可靠性。使用标准光谱（280 nm）定量方法分析纯化的蛋白质，发现绿色荧光蛋白的可溶性蛋白表达量达到30 mg/L，血管内皮生长因子特异性 VH的可溶性蛋白表达量达到20 mg/L。结论 该方法设计灵活，且易于进行多种蛋白质的并行表达，为快速筛选理想的蛋白突变体提供了一新途径。

目前，国内许多疫苗生产厂家都在致力于研制以白喉-破伤风-无细胞组分百日咳疫苗（diphtheria，tetanus，acelluar component pertussis vaccine，DTacP）为基础的联合疫苗，而国外不同厂家该类联合疫苗在临床试验中的免疫后抗体检测方法和保护性评判标准有较大差异。此文旨在通过比较不同DTacP-灭活脊髓灰质炎疫苗的临床免疫原性结果，包括血清保护率/血清阳转率和不同方法测定的抗体几何平均滴度，为临床试验方案设计提供依据和思路。

人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）感染在人群中十分普遍，一般无严重临床症状，但在新生儿、器官移植接受者或HIV感染者等机体免疫水平较低的人群中会造成严重的病理损伤。至今尚无HCMV疫苗上市。亚单位疫苗（含多肽疫苗）是HCMV疫苗研发的一个重要方向。此文就HCMV感染机制和HCMV亚单位疫苗研究进展进行综述。

膀胱癌是泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤，中、高危非肌层浸润性膀胱癌的标准治疗方式为单纯经尿道膀胱肿瘤切除术＋膀胱灌注治疗。在众多膀胱灌注药物中，BCG膀胱灌注以其明显的抗肿瘤疗效得到广泛使用。但部分高危患者即使进行了BCG标准灌注治疗，仍会发生膀胱癌复发和/或进展，且后续可供选择的治疗方式很少。近几年随着肿瘤免疫学研究的进展，新型免疫治疗药物的开发为膀胱癌的治疗带来了重大突破。此文对非肌层浸润性膀胱癌TURBT术后BCG等免疫调节剂膀胱灌注及其失败后的免疫治疗方法进行综述。

庆祝新中国成立70周年卫生健康主题宣传

目的 观察国产流感病毒裂解疫苗（流感疫苗）的稳定性。方法 取58批上海生物制品研究所有限责任公司（上海公司）2011－2018年生产的流感疫苗，按照国家食品药品监督管理总局批准的流感疫苗注册标准和中国药典的要求进行各项检定，在0月和12个月做全项检定，在3、6、9个月进行血凝素含量检测。结果 流感疫苗在有效期内各项指标检定结果均符合注册标准和药典要求。各型流感病毒株血凝素含量均为配制量的80%~120%。结论 上海公司生产的流感疫苗质量稳定。

目的  评价口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞）的稳定性。方法  将3批疫苗直立和倒立分别于—20 ℃以下存放30个月、（5±3）℃存放15个月、开瓶后（5±3）℃存放28 d、（25 ±2）℃存放5周、（37 ±2）℃存放5 d，另外，将疫苗冻融7次，检测病毒滴度及其他疫苗稳定性主要指标。结果  疫苗于－20  ℃以下存放30个月、（5 ±3）℃存放15个月、开瓶后（5 ±3）℃存放28 d、（25 ±2）℃存放4周、（37 ±2）℃存放4 d，以及冻融6次，总病毒滴度≥6.18 lg半数细胞培养感染量（50% cell culture infective dose，CCID50）/0.1 ml、Ⅰ型病毒滴度≥6.0 lgCCID50/0.1 ml、Ⅲ型病毒滴度≥5.6 lgCCID50/0.1 ml，均符合标准要求（总病毒和Ⅰ、Ⅲ型病毒滴度应分别不低于6.12、6.0、5.5 lgCCID50/0.1 ml）。疫苗于（37 ±2）℃放置2 d的热稳定性试验显示，病毒滴度下降≤0.50 lgCCID50/0.1 ml，符合标准要求（不高于0.50 lgCCID50/0.1 ml）。其他各项稳定性指标检查也均合格。结论  口服Ⅰ型Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗在本研究条件下稳定性良好。

目的  建立并初步验证吸附DTaP-脊髓灰质炎灭活疫苗（inactivated poliovirus vaccine，IPV）（DTaP-IPV）D抗原检测预处理的解吸附方法。方法  选用4种不同解吸附剂，在相同条件下对DTaP-IPV进行解吸附，用间接ELISA检测IPV D抗原。根据各型D抗原的检测结果，确定最适解吸附剂和解吸附条件，并对建立的方法进行初步验证。结果  对分别用4种解吸附剂处理的同批疫苗检测D抗原显示，乙二胺四乙酸二钠（ethylenediamine tetraacetic acid disodium，EDTA-2Na）解吸附剂和200 g/L柠檬酸三钠解吸附剂的解离效果好于另2种解吸附剂。进一步对解离效果较好的2种解吸附剂进行作用时间和温度研究显示，EDTA-2Na解吸附剂于25 ℃处理16~20 h的解离效果最好，IPV I、II、III型D抗原的回收率分别为102%、101%、103%。建立的方法的重复性和中间精密度良好，经该法解吸附的DTaP-IPV的I、II、III型D抗原检测结果的变异系数均小于10%。结论  建立的解吸附方法能有效解吸附DTaP-IPV，可用于DTaP-IPV D抗原检测预处理。

目的 研究PCR和限制性内切酶分析突变（mutant analysis by PCR and restriction enzyme cleavage，MAPREC）技术和猴体神经毒力试验（monkey neurovirulence test，MNVT）评价同一批Ⅰ型Sabin株脊灰病毒神经毒力的结果差异。方法 采用MAPREC技术，检测Ⅰ型Sabin株脊灰病毒神经毒力关键位点480和525位点突变率；采用MNVT病理切片分析，评价Ⅰ型Sabin株脊灰病毒神经毒力。结果 MAPREC检测待测样品核酸480和525位点突变率均值为0.460%，低于高突变参考品的1.288%。MNVT切片结果分析表明，有效猴病变分值差合格。结论 对同一批样品，MAPREC与MNVT分析结果一致。

目的 比较15 L转瓶及40层细胞工厂工艺制备腮腺炎减毒活疫苗的病变情况、病毒滴度和原液各项质量指标。方法 分别采用15 L转瓶及40层细胞工厂培养原代鸡胚细胞1～3 d后感染S79株腮腺炎病毒，继续培养至5～7 d收获病毒液。两种培养方式收获的腮腺炎病毒单次收获液分别合并后获得疫苗原液，并进行相关检定。结果 转瓶收获的单次病毒液0和21 d检定的平均滴度分别为6.6、6.1 lg半数细胞培养感染量（50% cell culture infective dose，CCID₅₀）/ml。细胞工厂收获的单次病毒液0和21 d检定的平均滴度分别为6.8、6.2 lgCCID₅₀/ml。两种方式制备的腮腺炎减毒活疫苗原液各项质量指标均合格。结论 应用40层细胞工厂工艺制备腮腺炎减毒活疫苗的细胞病变情况及单次病毒收获液滴度均优于15 L转瓶培养工艺，此实验为40层细胞工厂制备腮腺炎减毒活疫苗的大规模生产及工艺改进奠定了基础。