目的  评价以1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸盐（1-cyano-4-dimethylamino pyridinium tetrafluoroborate，CDAP）活化多糖制备的1型肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合物原液的稳定性。方法  以CDAP作为活化剂，连续制备3批多糖-蛋白结合物原液，分别放置于（37±2）℃和2～8 ℃，定期取样检测，并评价其稳定性。结果  多糖-蛋白结合物原液在（37±2）℃条件下保存21 d，2～8 ℃条件下保存12个月，其主要检测指标均符合质量要求，游离多糖和游离蛋白含量分别低于30.0%和5.0%，分配系数≤0.35的多糖回收率均>65%。结论  确定了不同条件下1型肺炎球菌多糖-破伤风类毒素结合物原液的有效保存时间。

目的  评价13价肺炎球菌结合疫苗（13-valent pneumococcal conjugate vaccine，PCV-13）在小鼠中的安全性及免疫原性。方法  将90只小鼠随机分为3组，分别免疫PCV-13、市售7价肺炎球菌结合疫苗（PCV-7）及生理盐水。于0、14、28 d分别进行皮下注射，观察免疫后小鼠的体重及状态变化至35 d。每组小鼠随机取10只在第14天时进行眼眶采血，其余20只在第35天采血。采血后进行血清分离于-40℃以下保存。用ELISA法检测小鼠血清抗各类型肺炎链球菌荚膜多糖IgG抗体水平。结果  PCV-13免疫小鼠体重增加未受到抑制，且未观察到其他不良反应，疫苗的安全性良好，3针免疫后，PCV-13免疫小鼠的抗各型多糖抗体滴度都有上升，表明PCV-13具有良好的免疫原性。PCV-13与已市售PCV-7对共同的7个血清型得免疫原性相同（t=0.004，p＞0.05）。结论  PCV-13在小鼠中具有良好的安全性和免疫原性，这为该疫苗的临床前研究提供了一定的理论依据。

 目的  通过将鼠疫耶尔森菌的F1抗原和重组V抗原组成的鼠疫疫苗免疫食蟹猴，对疫苗的免疫效果进行评价。方法  将20只食蟹猴随机分成低剂量组、高剂量组和生理盐水对照组，分别于0和2周肌内免疫，并于首1剂后2周和2剂后2周采血。用ELISA检测免疫动物血清中的总IgG抗体；另外，分离外周血淋巴细胞，用酶联免疫斑点试验检测分泌IFN-γ的外周血淋巴细胞。用t检验对结果进行比较。结果  免疫后，对照组均未产生抗体，而疫苗组产生了较强的抗体应答。2剂免疫后2周，低、高剂量组的抗F1抗原IgG抗体几何平均滴度分别为（4.71±0.32）lg和（5.09±0.21）lg（t=-2.76，P<0.05），两组的抗重组V抗原IgG抗体几何平均滴度分别为（4.75±0.52）lg和（5.12±0.58）lg（t=-1.37，P>0.05）。经F1和V抗原体外刺激产生IFN-γ的外周血淋巴细胞，细胞数均无明显增加。F1抗原刺激后，低、高剂量组分泌IFN-γ的外周血淋巴细胞数分别为（1±1）/10⁶和（1±2）/10⁶（t=-0.16，P>0.05）。重组V抗原刺激后，两组分别为（7±15）/10⁶和（6±7）/10⁶（t=0.88，P>0.05）。结论  鼠疫疫苗在食蟹猴模型中能诱导较强的体液免疫应答，但不能诱导明显的细胞免疫应答。

目的  通过应用低浓度对照品，对定量伤寒Vi多糖疫苗O-乙酰基含量的药典方法（O-乙酰基测定法）进行改良，并验证该法的可行性。方法  以含0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 μmol溴化乙酰胆碱的对照品溶液制作改良O-乙酰基测定法的标准曲线，并对该法的标准曲线线性、准确度、精密度、专属性和耐用性进行验证。结果  改良O-乙酰基测定法的标准曲线线性良好，决定系数>0.998。该法的准确度、精密度和专属性良好，O-乙酰基回收率为99.8%～101.3%，实验间和实验内相对标准偏差均<4%，O-乙酰基加样回收率均>96%。该法测定O-乙酰基的定量限为0.070 mmol/L。结论  应用低浓度对照品的改良O-乙酰基测定法可用于定量伤寒Vi多糖疫苗O-乙酰基含量。

目的  建立肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）抗原的定量检测方法，用于EV71疫苗生产过程中EV71抗原含量的监测。方法  用EV71抗原免疫新西兰兔制备抗EV71多克隆抗体，纯化后用辣根过氧化物酶标记。采用双抗体夹心ELISA法建立抗原检测系统。以EV71国家抗原标准品为定量标准，建立剂量反应曲线，确定该方法的线性范围和定量限，并对该方法的特异性、精密度、准确性、稳定性及适用性等进行验证。结果  建立的ELISA方法线性范围为5～80 U/ml，定量限为5 U/ml，线性决定系数均大于0.990 0；不同浓度样品回收率为85.0%～110.0%，变异系数均小于15%；置于2～8 ℃及37 ℃ 3、6 d的抗体包被板对不同浓度样品的检测值变异系数均小于15%；该方法可特异性检测EV71原液，与非EV71样品无交叉反应。结论  建立了EV71抗原定量检测方法，为EV71疫苗生产工艺过程的质量控制奠定了基础。

目的  对上海生物制品研究所有限责任公司（上海公司）采用二次病毒灭活工艺生产的人凝血因子Ⅷ（human coagulation factor Ⅷ，FⅧ ）进行上市后安全性观察和分析。   方法  采用双中心、开放、单组设计进行FⅧ上市后安全性观察：符合入选条件的247例血友病A患者接受1次FⅧ输注，以问卷调查的方式收集FⅧ输注后30 min和1个月的不良反应，包括体温变化、过敏反应、输液反应等临床安全性指标。 结果  FⅧ输注后30 min，无一受试者报告发生过敏和输液反应，仅4例受试者（2.26%）报告出现短时37.1~37.5 ℃的轻度发热。FⅧ输注后1个月，所有受试者均未报告有新出现的相关不良反应。 结论  上海公司采用二次病毒灭活工艺生产的FⅧ上市产品具有良好的安全性。 

目的  利用猪血浆制备高纯度凝血酶。方法  使用DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析分离猪血浆获得凝血酶原后，用C_aCl₂激活凝血酶原生成凝血酶。获得的凝血酶粗制品经2次SP-Sepharose FF阴离子交换层析获得高纯度凝血酶。结果  2次层析后的凝血酶的比活为2 546 IU/mg，是凝血酶粗制品的8倍，得率为54%。快速蛋白液相层析检测表明，2次层析后的凝血酶纯度达89%。结论  猪血浆通过1次DEAE-Sepharose FF和2次SP-Sepharose FF离子交换层析可得到高纯度凝血酶。

目的  应用pET表达系统原核表达红色荧光蛋白变种mCherry，分析重组mCherry表达与荧光变化的关系，为其纯化及作为原核报告系统应用提供依据。方法  根据GenBank中收录的mCherry氨基酸序列合成其编码基因，构建pET-mCherry表达质粒，转化入大肠埃希菌BL21(DE3)表达宿主。在不同诱导时间点，考察菌株荧光强度、mCherry表达量、培养上清液mCherry泄漏情况。诱导10 h后提取重组mCherry，利用荧光强度估算提取收率，并通过凝胶电泳分析提取液的蛋白纯度。结果  成功构建pET-mCherry表达载体，并在BL21(DE3)中得到高效诱导表达。荧光检出滞后于mCherry的表达，随诱导时间延长重组mCherry不断泄漏至培养液中。初步提取的重组mCherry纯度达到95%以上。结论  应用pET表达系统可高效表达mCherry，过表达mCherry可泄漏至胞外，方便其纯化。mCherry作为原核报告系统应用时，合理的诱导时间可能是关键影响因素。

 柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16，CA16）是手足口病的主要病原体之一。近年来手足口病的不断暴发和流行使CA16日益引起人们的重视。此文就CA16的流行病学、蛋白的结构和功能、实验室检测方法和疫苗开发4个方面进行阐述，希望对手足口病的认识和防控起到促进作用。

程序性死亡分子1（programmed death-1，PD-1），1种T细胞表面的免疫抑制分子，可与程序性死亡配体1（programmed death ligand-1，PD-L1）组成信号通路。PD-1/PD_L1信号通路可抑制T细胞的活化，并对肿瘤免疫逃逸起关键作用。靶向PD-1信号通路的单克隆抗体包括抗PD-1和PD-L1抗体，它们通过阻断PD-1与PD-L1的相互作用来增强机体内源性抗肿瘤免疫效应，在临床试验中，该类单克隆抗体在各类肿瘤患者中表现出令人惊喜的疗效，成为一类有希望的肿瘤免疫治疗药物。此文就靶向PD-1信号通路的单克隆抗体的生物学功能及其临床应用等方面的研究进展做一综述。

此文介绍了WHO对于减轻疫苗接种疼痛所推荐的一般措施和特别措施。

目的  对乙型脑炎减毒活疫苗（乙脑疫苗）的稳定性进行评价。方法   选取2种规格（1、5次人用剂量）的成品乙脑疫苗进行（25±2）、（37±2）℃条件下保存的加速稳定性试验，以及2～8 ℃条件下的长期稳定性考察，检定关键质量指标，并对长期稳定性数据进行回归分析。结果  4批1次人用剂量、2批5次人用剂量疫苗于（25±2） ℃、相对湿度（60±5）%存放3个月，（37±2） ℃、相对湿度（75±5）%存放14 d，其外观、病毒滴度、水分、pH值均符合质量标准。9批1次人用剂量、7批5次人用剂量疫苗在2～8 ℃存放24个月的检定结果均符合质量标准。回归分析显示，在2～8 ℃存放时间每增加1个月，1、5次人用剂量疫苗的病毒滴度分别平均减少0.020和0.017 蚀斑形成单位/ml，水分分别平均增加0.055%和0.047%。根据回归方程因变量均值95%置信区间计算出的乙脑疫苗有效期远长于现行注册标准规定的18个月。结论   被检乙脑疫苗质量稳定性良好，产品安全可靠。

目的  应用自动化系统进行水痘疫苗的半成品配制，以降低劳动强度，提高产品均一性。 方法   采用自动化系统完成水痘疫苗的原液稀释和半成品分装，并与人工操作方法进行比较，包括两种方法的清洁、灭菌和保温效果以及疫苗半成品、成品的检定结果。 结果   自动化操作可使工作人员减少60%，工时缩短80%。两种方法对容器或罐体的清洗和灭菌效果均达到工艺要求。采用自动化方法保温时温度可控。用自动化操作系统制备的半成品疫苗，其滴度差异小于人工操作方法，变异系数分别为0.00%和2.17%。两种方法生产的成品疫苗的稳定性试验结果均达到标准〔病毒滴度不低于3.3 lg蚀斑形成单位（plaque-forming unit，PFU）/0.5 ml〕。自动化和人工方法生产的成品疫苗于37 ℃放置7 d，病毒滴度分别为3.7和3.6 lgPFU/0.5 ml；于2～8 ℃放置18个月分别为3.5和3.4 lgPFU/0.5 ml。 结论   将自动化系统应用于水痘疫苗的原液稀释、半成品分装，可降低劳动强度，提高产品的均一性。

目的   建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型（porcine circovirus type 1，PCV1）感染非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）的检测方法。方法  培养感染PCV1的Vero细胞6 d后，通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜（电镜）检查和原位杂交检测PCV1的复制与增殖。结果  从感染PCV1的Vero细胞培养物提取的DNA，其PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见特异性条带；定量PCR检测显示，感染6 d后病毒总拷贝数是感染前的794.3倍；定性和定量PCR的最低检出浓度均为10^2.0拷贝/ml；电镜观察到PCV1特征性形态病毒颗粒；原位杂交检测到出现深色阳性信号的PCV1阳性细胞。结论  PCV1感染Vero细胞后的复制增殖可以通过上述方法进行检测。

目的  研究重组4-1BB配体（recombinant 4-1BB ligand，r4-1BBL）作为佐剂对治疗性重组人乳头瘤病毒16型（human papiilomavirus type 16，HPV16）蛋白疫苗（HPV16蛋白疫苗）免疫效果的影响。方法  对4-1BBL胞外功能区进行密码子优化，并通过NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点将其插入pET28a表达载体。将获得的重组表达载体转化大肠埃希菌BL21(DE3)，并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达。用蛋白质印迹法对重组蛋白进行鉴定，并用非还原性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和电镜分析重组蛋白结构。用CCK-8试剂盒检测纯化r4-1BBL对小鼠T细胞体外增殖的影响。同时将r4-1BBL与HPV16蛋白疫苗联合免疫C57BL/6小鼠，用酶联免疫斑点试验检测小鼠的细胞免疫应答水平，观察r4-1BBL对HPV16蛋白疫苗抑制肿瘤生长的影响。结果  密码子优化的4-1BBL胞外功能区能在重组表达载体中表达，且表达产物同时以包涵体和可溶性形式存在。可溶性产物的结构主要为二聚体，电镜下可以观察到类似亚单位的结构。纯化r4-1BBL可促进小鼠脾淋巴细胞的体外增殖。与单纯HPV16蛋白疫苗相比，r4-1BBL联合HPV16蛋白疫苗能诱导更强特异性细胞免疫应答（t=3.525，P=0.024）和产生更明显的肿瘤生长抑制作用（t=2.534，P=0.021）。结论  r4-1BBL能在小鼠中提高HPV16蛋白疫苗的免疫效果，具有作为HPV16蛋白疫苗佐剂的潜力。

目的   以响应面法优化MDCK-siat7e细胞培养条件。方法  以MDCK-siat7e细胞培养的起始氨浓度、乳酸浓度、渗透压和活细胞密度（viable cell density，VCD）为因子，以MDCK-siat7e细胞培养的72 h细胞比生长率、细胞活率、乳酸比生成率和氨比生成率为响应值，采用全因子实验设计和响应面分析来研究这些因子对MDCK-siat7e细胞培养的影响。结果  在MDCK-siat7e细胞培养过程中，对72 h细胞比生长率有显著影响的因子是起始VCD（t=3.43，P<0.05）；对72 h细胞活率有显著影响的因子是起始乳酸浓度（t=4.32，P<0.05）和氨浓度（t=2.86，P<0.05）；对72 h乳酸比生成率有显著影响的因子是起始乳酸浓度（t=8.92，P<0.05）、渗透压（t=4.11，P<0.05）和VCD（t=2.66，P<0.05），其中乳酸浓度起主要作用；对72 h氨比生成率有显著影响的因子是起始氨浓度（t=2.63，P<0.05）。结论  采用响应面法优化MDCK-siat7e细胞培养工艺可对MDCK-siat7e细胞培养过程中的条件控制起指导作用。

目的  建立一种定量葡萄糖中铅含量的原子吸收分光光度法，并验证该法的可行性。方法  采用标准加入法，建立定量葡萄糖中铅含量的原子吸收分光光度法，并对建立的方法进行线性、准确度/精密度和重复性验证。结果  用标准加入法得到的标准曲线线性良好，决定系数>0.998。铅加样回收率为95%～103%，测定结果的相对标准偏差为4%，表明该法的准确度/精密度和重复性良好。该法测定铅的定量限为1.6×10^-7。结论  建立了测定葡萄糖中铅含量的原子吸收分光光度法，且该法的线性、精密度、重复性和定量限均符合现行中国药典的要求。

 艾滋病是一种传染性强、传播速度快、传播范围广、病死率高的传染病。抗逆转录病毒药物可以抑制感染者体内病毒的复制，但不能将其完全清除。研究显示，以痘病毒为载体，经过局部基因修饰后研制的预防性艾滋病疫苗具有较好安全性和一定免疫原性。此文对痘病毒载体艾滋病疫苗的研究进展进行综述。

壳聚糖是一种有效的黏膜疫苗佐剂和递送载体，但因其水溶性差，应用受到一定限制。通过对壳聚糖进行不同的化学修饰可得到各类壳聚糖衍生物，这些衍生物不仅溶解性较好，而且保持了壳聚糖良好的生物相容性、生物降解性、免疫刺激活性等优势，为黏膜疫苗，尤其是经口、鼻途径递送的疫苗提供了新型候选佐剂和递送载体。此文对修饰壳聚糖的主要方法以及其衍生物在口鼻黏膜疫苗中的应用做一综述。

 目前成功的病毒性疫苗大多通过诱导广谱有效的中和抗体来保护机体免受感染，因此检测血清中和抗体水平对疫苗的免疫效果评价具有重要意义。中和抗体检测的传统方法包括微量细胞病变抑制法、蚀斑减少试验等，均需进行活病毒操作。近年来，随着逆转录病毒载体和重组病毒表达技术的发展，假病毒得到越来越多的研究，并被广泛应用在新型疫苗研发、中和抗原表位鉴定、细胞嗜性研究、抗病毒药物筛选、中和抗体检测、基因治疗等方面。此文主要对假病毒在中和抗体检测中的应用进行综述，并总结相关领域的研究进展。

此文介绍了登革热疫苗的特性、免疫原性、效果、保护作用持续时间、安全性、同时接种和成本效益以及WHO对登革热疫苗接种的意见。

 目的  考察在现行工艺规定的2～8 ℃储存条件下，乙型脑炎减毒活疫苗（乙脑活疫苗）单一病毒收获液病毒滴度的稳定性。方法  取常规生产中收获的高、中、低滴度的单一病毒收获液各6批，按正常生产程序和工艺条件储存于2～8 ℃，自第5天起每隔1 d无菌取样，进行病毒滴定，采用极差控制图、线性回归、单因素方差分析等方法对收获液的病毒滴度结果进行统计分析。结果  常规生产中高、中、低滴度段的单一病毒收获液在2～8 ℃储存21 d，各单一病毒收获液的病毒滴度均呈下降趋势，并且不同滴度段病毒收获液间的日均下降滴度差异无统计学意义（F=1.67，P=0.222），总体日均下降滴度为0.036 lg蚀斑形成单位/ml。结论  掌握了单一病毒收获液在工艺规定储存条件下的滴度下降趋势及日均下降水平，为乙脑活疫苗半成品的点配制及其病毒滴度的一致性控制提供了数据支持。

目的  研究以免疫刺激复合物（immune stimulating complex，ISCOM）或Al(OH)3为佐剂的含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗在HBV转基因小鼠中诱导的免疫应答。方法  将纯化的含PreS1、PreS2和S抗原的重组HBsAg（SS1S2）分别辅以ISCOM或Al(OH)3佐剂制成疫苗。HBV转基因小鼠每月肌内注射1针疫苗，共注射7针。免疫前及每针后1个月称量小鼠体重，观察小鼠生长情况。免疫前及每针后1个月采血，用ELISA检测HBV S、PreS1、PreS2抗原及其相应抗体。7针后1个月分离小鼠脾淋巴细胞，用酶联免疫斑点试验分别测定分泌IL-4、IL-5、IFN-γ的效应T细胞频数。结果  小鼠生长状况良好，每针后体重均有增长。首针后1个月，10只ISCOM+SS1S2免疫鼠分别有3和1只抗S和PreS1抗体阳转，无一小鼠抗PreS2抗体阳转；10只Al(OH)3+SS1S2免疫鼠的抗体均为阴性。7针后1个月，10只ISCOM+SS1S2免疫鼠的抗S和PreS1抗体均阳转，8只抗PreS2 抗体阳转；10只Al(OH)3+SS1S2免疫鼠分别有9、7和1只抗S、PreS1和PreS2 抗体阳转；ISCOM+SS1S2组和Al(OH)3+SS1S2组的抗S抗体几何平均滴度分别为1:15 647和1:1 039，差异有统计学意义（t=5.18，P=0.000)。7针后1个月，ISCOM+SS1S2组和Al(OH)3+SS1S2组分泌IL-4的斑点细胞数分别为219和78斑点形成细胞（spot-forming cell，SFC）/10⁶细胞（t=10.50，P=0.000)，分泌IL-5的斑点细胞数分别为286和34 SFC/106细胞（t=19.53，P=0.000 )，差异有统计学意义。结论  含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗辅以ISCOM或Al(OH)3佐剂在HBV转基因小鼠中均具有免疫原性，且ISCOM+SS1S2的免疫原性强于Al(OH)3+SS1S2。

目的  对采用不同配制方式制备的，含不同剂量Sabin株脊髓灰质炎（脊灰）灭活疫苗（Sabin strain inactivated poliovirus vaccine，sIPV）的DTaP-sIPV联合疫苗中sIPV的免疫原性进行研究。 方法  按照2种不同方式配制含高、低剂量sIPV的DTaP-sIPV联合疫苗。将70只大鼠按简单随机法分成7组，分别为F1H（DTaP-sIPV高剂量组，配制方式1）、F2H（DTaP-sIPV高剂量组，配制方式2）、sIPV-H（sIPV高剂量组）、F1L（DTaP-sIPV低剂量组，配制方式1）、F2L（DTaP-sIPV低剂量组，配制方式2）、sIPV-L（sIPV低剂量组）、赛诺菲巴斯德五联疫苗潘太欣组。每组10只大鼠，间隔3周双侧后腿肌内注射，0.5 ml/只，共免疫3针。于第0、3、6、9、13、17、21、25周眼眶采血、分离血清，采用微量细胞病变效应抑制法分别测定血清中抗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰病毒中和抗体滴度，并进行多样本均数方差分析。结果  每针免疫后，各组抗各型中和抗体滴度均持续上升，第9周均达到最高水平，第13周开始显著下降，至第25周仍维持在一定水平。3针免疫完成后3周，F2H组的抗Ⅰ型脊灰病毒中和抗体几何平均滴度显著高于潘太欣组（F=0.988，P=0.027）；抗Ⅱ型中和抗体，F2H组显著高于F1H组，sIPV-H组显著高于F1H和潘太欣组（F=2.391，P值均<0.05）；抗Ⅲ型中和抗体，各组间差异均无统计学意义。3针基础免疫后各时间点F2H组抗各型中和抗体滴度均为最高，但除第9周其抗Ⅱ型中和抗体显著高于F1H组外，其他差异均无统计学意义。结论  DTaP-sIPV联合疫苗免疫大鼠后可以诱导产生抗各型中和抗体，且其滴度和持续时间均优于或等同于潘太欣组。DTaP-sIPV诱导的中和抗体滴度不低于相应剂量的sIPV。虽然配制方式2可能更佳，但2种配制方式间sIPV的免疫原性差异无统计学意义。

目的  建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。方法  提取Vero细胞基因组DNA，制备地高辛标记探针。比较样品不同处理方式的检测差异。对建立的残留DNA检测方法进行特异性、灵敏度和稳定性验证。结果  Vero 细胞基因组DNA的质量浓度为295 μg/ml，260 nm与280 nm波长处的吸光度比值为1.88。探针灵敏度达到0.01 pg/μl。采用苯酚抽提方式处理DNA参考品，检测灵敏度为1 ng；而用碘化钠处理DNA参考品，灵敏度达到10 pg。特异性检测表明，探针与非同源DNA无杂交。灵敏度和稳定性检测结果显示，探针于–70 ℃保存9个月，灵敏度仍为10 pg。 结论  建立了Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。采用碘化钠提取DNA，回收率高，操作简单，适用于Vero细胞的残留DNA检测。

目的  比较四参数模型与平行线分析法在Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin inactivated poliovirus vaccine，sIPV）D抗原和肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）抗原生物检定统计中的应用。方法  对sIPV-D抗原和EV71抗原检测数据分别进行四参数模型和平行线分析法的方法验证，并将两种方法应用于不同含量样品检测结果的分析计算。结果  sIPV-D抗原检测数据四参数曲线拟合度好（决定系数为0.998，残差值≤0.059），平行性分析可靠（线性回归：参比品F=727.49，P<0.01；样品F=1 169.44，P<0.01。平行性方差分析F=0.24，P>0.05）。EV71抗原四参数曲线拟合度好（决定系数为1.000，残差值≤0.025），平行性分析可靠（线性回归：参比品F=126.63，P<0.01；样品F=192.74，P<0.01。平行性方差分析F=4.00，P>0.05)。对于sIPV和EV71不同抗原含量的生物检定统计，两种方法计算结果的差异无统计学意义（t=0.248～1.023，P值均>0.05）。 结论  四参数模型和平行线分析法均能较好地应用于sIPV-D抗原和EV71抗原的ELISA检测体系。

甲型肝炎（甲肝）是由甲肝病毒引起的以肝脏损害为主的急性、自限性肠道传染病。主要通过污染的水源和食物或人与人接触经粪-口途径传播。甲肝疫苗是对抗甲型肝炎最有效的方法。甲肝疫苗的开发和应用对甲肝的预防和控制起到了重要的作用。此文就甲肝的流行病学、疫苗的使用现状及新型疫苗的研发等方面进行综述。

HCV感染是全球范围的严重公共卫生问题。尽管在新一代直接抗HCV药物上市以后，丙型肝炎的治愈率有了显著提高，但一种能有效预防HCV感染的疫苗对于最终消灭丙型肝炎依然非常重要。此文对制约丙型肝炎疫苗研究的因素进行了分析，并对进入临床试验的主要疫苗的类型、特征进行了概述。

 肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）是导致手足口病的主要病原体之一，近年来在我国持续流行，对婴幼儿的健康造成了严重威胁。安全有效的疫苗是控制EV71流行的重要手段。全球有多家研究机构正在开展EV71疫苗的相关研究，目前由我国自主研发的3种EV71疫苗已获准上市。同时，为保证疫苗的安全性、有效性和质量可控性，已在研发中建立了合适且规范的质量标准。

疫苗接种是预防流感最有效的方法。流感病毒的变异给疫苗研制带来了极大的困难，而减毒活疫苗能够使机体获得持久免疫力，成为防治流感的重要疫苗。然而，目前研发的减毒活疫苗仍存在制备条件苛刻、安全性较差等问题。鉴于miRNA是调控宿主和病毒相互作用的关键因子，miRNA介导的减毒活疫苗能给流感疫苗研发提供新的思路。此文对近年来基于miRNA的流感疫苗研究进展做一综述。

当前广泛使用的季节性流感疫苗的主要抗原成分包括2个重要的流感病毒表面糖蛋白，血凝素和神经氨酸酶(neuraminidase, NA)。研究表明NA抑制性抗体虽然不能防止流感病毒感染，但能有效抑制病毒扩散，因此基于NA设计的疫苗开始受到重视。NA的相对保守性也使此类疫苗有潜力成为广谱流感疫苗。目前基于NA的多种形式流感疫苗，包括DNA疫苗、病毒样颗粒疫苗、重组载体疫苗、重组亚单位疫苗以及联合其他流感病毒蛋白的疫苗等，在动物模型中均表现出诱导交叉保护的能力。此文综述了近年来发表的有关基于NA的流感病毒疫苗的研究。

2016年9月—2017年2月，全球分离到2009年大流行甲型H1N1（甲型H1N1pdm09）、甲型H3N2和乙型流感病毒。对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明，几乎所有新近分离的甲型H1N1pdm09流感病毒的抗原性都与疫苗病毒A/California/7/2009和A/Michigan/45/2015难以区分，大多数新近流行的病毒属于进化亚枝6B.1。大多数新近分离的甲型H3N2流感病毒的抗原性与细胞培养病毒A/Hong Kong/4801/2014相关，且大多属于进化亚枝3C.2a1。新近分离的B/Victoria/2/87谱系病毒的抗原性和遗传性与B/Brisbane/60/2008和B/Texas/2/2013密切相关，B/Yamagata/16/88谱系病毒与B/Phuket/3073/2013密切相关。

目的  建立19A型肺炎链球菌多糖（Streptococcus pneumoniae type 19A polysaccharide，19APS）结合物中游离PS含量的测定方法。方法  在一定条件下分别用1、3和5 g/L脱氧胆酸钠（sodium deoxycholate，DOC）溶液（pH 7.3）沉淀不同浓度的破伤风类毒素（tetanus toxoid，TT），确定不同浓度DOC沉淀载体蛋白TT的浓度范围。以1 g/L DOC分离结合19APS（19APS-TT）和游离19APS，测定上清液中的游离PS含量，并验证该DOC沉淀法的准确度和精密度。结果  分别以1和3 g/L DOC沉淀19APS-TT时，TT浓度最好分别控制在＜150和＜200 μg/ml。该DOC沉淀法的准确度和精密度均良好，加标PS回收率为94.0%~107.2%，相对标准偏差均＜4%。结论  成功建立了19APS-TT中游离PS含量的测定方法。

目的  建立疫苗生产车间环境监测微生物数据库，分析生产车间微生物的分布情况。 方法  从2012至2016年，每年按一定频次对乙型脑炎减毒活疫苗生产洁净车间进行动态环境监测。对收集的微生物进行鉴别和分类，建立微生物数据库。对5年的数据进行统计和分析。结果  2012—2016年，A级洁净区微生物阳性率均为0.00%；B级洁净区微生物阳性率分别为2.89%、1.32%、1.27%、1.03%和1.04%；C级洁净区微生物阳性率分别为12.96%、10.14%、7.63%、4.43%和4.56%；D级洁净区微生物阳性率分别为31.20%、33.41%、28.04%、19.58%、22.02%。洁净区表面菌阳性率（1.21%～2.62%）低于沉降菌阳性率（2.29%～4.02%）和浮游菌阳性率（2.09%～3.67%）；沉降菌阳性率和浮游菌阳性率相似。里拉/藤黄微球菌、葡萄球菌属、蜡样芽胞杆菌容易出现在洁净车间环境中。结论  建立的环境监测微生物数据库和对微生物的分布情况分析，对于疫苗生产过程的无菌控制具有指导意义。

目的  分析使用两种纳米膜（A、B）除病毒过滤对静注人免疫球蛋白生产的影响。方法  选取使用A和B纳米膜过滤的静注人免疫球蛋白各10批次，比较过滤流速、产品收率及产品主要质量指标（蛋白含量、pH值、纯度、抗补体活性、分子大小分布）。结果  B纳米膜单位膜面积过滤流速高于A纳米膜（t=16.98，P=0.000）。在一个全批次量的静注人免疫球蛋白纳米膜过滤中，使用B纳米膜的产品收率高于使用A纳米膜（t=8.87，P=0.000）。使用两种纳米膜过滤后，产品的蛋白含量（t=1.49，P=0.171）、pH值（t=0.19，P=0.853）、纯度（t=0.00，P=1.000）、抗补体活性（t=0.08，P=0.934）和分子大小分布（t=0.21，P=0.840）无统计学差异。结论  在静注人免疫球蛋白进行除病毒过滤生产过程中，使用B纳米膜的过滤效率高于使用A纳米膜。两种纳米膜过滤后的产品质量无显著差异。

目的  优化基于中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CHO）细胞表达的Fc融合蛋白制备工艺。方法  对于上游细胞培养工艺，先在摇瓶中分别对培养基配比和流加培养方案进行优化，再将优化工艺放大到生物反应器规模并确认其可行性。对于下游蛋白纯化工艺，分别对A蛋白亲和层析的洗脱条件和阴离子交换层析的平衡条件进行优化。结果  对于上游细胞培养工艺，以种子培养基∶基础培养基（CD OptiCHO）∶基础培养基（CDM4Mab）为2∶1∶1的配比配制培养基，并以3、6和9 d补料的流加培养方案进行细胞培养，可获得理想的细胞密度和活率，且成本较低。对于下游蛋白纯化工艺，以pH 3.3的洗脱液进行A蛋白亲和层析纯化时，Fc融合蛋白的回收率为94.7%，纯度为98.64%；以pH 5.0～pH 5.5的平衡液进行阴离子交换层析纯化时，Fc融合蛋白的回收率达到98%以上、纯度达到99%。结论  基于CHO细胞表达的Fc融合蛋白制备工艺的上游细胞培养和下游蛋白纯化工艺得到成功优化，这为此类抗体药物制备工艺的优化提供了思路。

当前流感疫苗主要为肌内注射灭活疫苗和滴鼻减毒活疫苗。对于预防呼吸道传播的流感，抗原特异性黏膜免疫应答非常重要。现有资料显示，两种疫苗都存在不可避免的局限性，为解决这个问题，需要对黏膜佐剂流感疫苗进行深入的研究。此文主要对进入临床试验的流感疫苗黏膜佐剂进行综述。

儿童结核病易导致严重后果，现已成为严重的公共卫生问题。虽然欧洲结核病发病率总体较低，但在少数聚集场所时有结核病暴发，加上近期移民、难民流入增加，容易导致结核病扩散。此文对近期欧洲儿童结核病的流行特征及临床特征进行综述。

识别保护性B细胞抗原表位从而引发中和抗体产生和体液免疫，是特异性免疫反应的物质基础，因此研究可被中和抗体识别的保护性B细胞抗原表位对促进基础免疫学发展、感染诊断、相关疫苗特别是多肽疫苗的研发、药物靶点筛选等具有积极意义。虽然此类表位多为构象型，研究难度较大，但随着免疫学和生物信息学技术的发展，已出现许多有效思路与方法。此文综述目前构象型B细胞抗原表位的研究方法及进展。