国际生物制品学杂志 2015年 38卷

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1. C端截短的乙型肝炎病毒核心抗原的原核表达及免疫原性
张鹏艳 叶琳
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 1-5.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.001
摘要16)      PDF(pc) (1310KB)(1219)    收藏
 目的   原核表达C端截短的乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)〔HBcAg(aa 1-149)〕,并研究其在小鼠中的免疫原性。方法   用聚合酶链反应扩增C端截去34个氨基酸的HBcAg基因片段,构建含HBcAg(aa 1-149)基因的克隆质粒及表达质粒,在大肠杆菌Rossatta2中以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白的表达。表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹法鉴定。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,用ELISA法检测血清抗-HBc水平。结果   重组原核表达质粒pET15b HBcAg(aa 1-149)经双酶切和SDS-PAGE鉴定证明构建正确。重组HBcAg(aa 1-149)在大肠杆菌中获得高效表达,表达形式主要为可溶性蛋白。蛋白质印迹法显示在预期位置(相对分子质量约17 000位置)出现特异性条带。纯化后的重组蛋白纯度较高(>90%),并可在小鼠中诱生较高水平的抗-HBc。结论   重组HBcAg(aa 1-149)在原核系统中获得成功表达,并可在小鼠中诱导抗体应答。
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2. 单克隆抗体在肺炎球菌多糖疫苗多糖含量检测中的应用
雷永红 庞鉴勇 童钦 王欣 陈磊 蔡芳 朱朗 王新立 高强
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 6-9.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.002
摘要20)      PDF(pc) (1038KB)(1384)    收藏
 目的  考察能否用单克隆抗体(单抗)替代多克隆抗体(多抗)血清检测23价肺炎球菌多糖疫苗中各型多糖的含量。方法   使用8个血清型(2、3、4、6B、9N、17F、18C、23F)的小鼠抗肺炎球菌荚膜多糖单抗和丹麦国家血清研究所(Statens Serum Institut, SSI)的兔血清多抗,以速率散射免疫浊度法测定23价肺炎球菌多糖疫苗中相应血清型的多糖含量。通过重复性和专属性试验确定单抗的可用性。采用t 检验对单抗和多抗测定结果进行比较。结果   各型单抗与多糖标准品反应标准曲线的相关系数均>0.985 0。用单抗重复检测疫苗多糖3次,质量浓度为40.8~62.1 μg/ml,3次检测结果变异系数均<8.00%。各型多糖回收率为81.6%~124.2%。分别用8个血清型单抗检测其余各型多糖含量,结果均低于或接近于检测下限。单抗与SSI多抗血清的检测结果差异均无统计学意义,t 值为0.210 3~1.926 0,P 值均>0.05。结论   单抗检测重复性好、特异性高,与多抗血清检测结果相仿,因此,单抗可以替代SSI多抗血清用于测定23价肺炎球菌多糖疫苗中的多糖含量。
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3. 幽门螺杆菌黏附素基因(hpaA)的表达及重组蛋白的免疫原性检测
杨芸 孔超 徐帆洪 李笑梅
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 10-12.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.003
摘要64)      PDF(pc) (1134KB)(1624)    收藏
 目的   研究幽门螺杆菌黏附素 A(adhesin A of Helicobacter pylori,HpaA)基因在大肠杆菌中的表达和检测纯化 HpaA 的免疫原性。方法   将hpaA/pET28a表达质粒转入大肠杆菌BL21(RP)株并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,通过Ni2+亲和层析和分子筛层析纯化表达蛋白。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表达蛋白的相对分子质量,用蛋白质印迹法对表达蛋白进行特性确认。将纯化HpaA腹腔注射Balb/c小鼠,并检测小鼠的抗体水平。结果   表达蛋白的相对分子质量约为30 000,与HpaA相符。纯化的表达蛋白可与抗HpaA抗体发生特异性反应。腹腔注射HpaA的小鼠与对照小鼠间的血清抗HpaA IgG抗体水平差异存在统计学意义(t=8.367,P<0.01)。结论   HpaA在大肠杆菌BL21(RP)株中得到成功表达,且纯化HpaA具有较好的免疫原性。
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4. 安徽省2011年0~6岁儿童抗百日咳毒素抗体水平监测
陈霞 周淑洁 刘丹青 沈永刚 赵月萍 唐继海
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 13-16.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.004
摘要10)      PDF(pc) (1040KB)(1214)    收藏
 目的  了解安徽省≤6岁健康儿童抗百日咳毒素(pertussis toxin,PT)抗体水平,为评价疫苗接种效果提供依据。 方法   采用多阶段随机抽样方法,在全省16个市0~6岁7个年龄组人群中抽取健康儿童1 787人,用ELISA定量检测血清抗PT IgG抗体。各组之间抗体阳性率差异比较采用χ2检验,抗体几何平均浓度(GMC)差异比较采用F检验。结果   2011年安徽省0~6岁儿童中,几乎所有采集的血清均呈现不同的抗体水平,以0岁组最高(10.33 IU/ml)。抗体GMC随免疫后时间的延长有下降的趋势。不同年龄组之间抗体阳性率和GMC差异均有统计学意义(χ2=15.06,P<0.05;F=7.96,P<0.01)。不同性别之间抗体阳性率和GMC差异均无统计学意义(χ2=0.98,P>0.05;Z=0.852,P=0.394)。 结论   安徽省0~6岁儿童抗PT IgG抗体水平随年龄的增加而降低,是否需要加强免疫需作进一步研究。
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5. 静脉注射人免疫球蛋白工艺中的病毒灭活方法初探
吴玮 段星宇 金晶 郑炎
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 17-21.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.005
摘要27)      PDF(pc) (1234KB)(1556)    收藏
 目的   研究静脉注射人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)工艺中辛酸处理联合20 nm膜过滤的病毒灭活/去除方法。方法   分别将脂包膜Sindbis病毒和伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)加入pH(4.6±0.1)和pH(5.3±0.1)IVIG中间品(辛酸沉淀后上清液),在(7.47±0.39)、(14.47±0.39)和(22.47±0.39) mmol/L辛酸条件下维持(25±1) ℃处理120 min;将非脂包膜猪细小病毒(porcine parovirus,PPV)加入pH(6.0±0.2)IVIG中间品(层析流穿液),用20 nm膜过滤。检测所有样品处理前后的病毒滴度。 结果   (25±1) ℃处理120 min后,pH(4.6±0.1) IVIG中间品经(7.47±0.39)和(14.47±0.39) mmol/L辛酸钠处理后的残余病毒滴度均≤0.50lg,pH(5.3±0.1) IVIG中间品分别经(14.47±0.39)和(22.47±0.39) mmol/L辛酸处理后的残余病毒滴度均≤0.50lg;20 nm膜过滤可使IVIG中间品的PPV滴度下降≥4.00lg。2种处理方法的结果均符合相关规定的要求。结论   在一定条件下,辛酸处理联合20 nm膜过滤可有效灭活/去除IVIG生产过程的相关病毒。
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6. 肠道病毒71型全病毒灭活疫苗临床研究进展
林惠娟 王一平 毛群颖 周旭 梁争论
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 22-26.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.006
摘要18)      PDF(pc) (1024KB)(1309)    收藏
 肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是引起严重手足口病的主要病原体,研发安全有效的疫苗是控制手足口病的关键措施。目前我国(香港、澳门和台湾地区除外)已有3家公司完成了EV71全病毒灭活疫苗的Ⅲ期临床试验,结果显示疫苗在婴幼儿中安全性良好,预防EV71引起手足口病的保护率达到90%以上,预防EV71其他相关疾病的保护率达到80%以上。此文对这些EV71疫苗临床试验情况做一综述。
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7. IgM特点及应用研究进展
张慧颖 楼觉人
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 27-30.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.007
摘要36)      PDF(pc) (1149KB)(1405)    收藏
 免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)M作为血液循环中的主要抗体之一, 与IgG共同参与中和抗原和促进抗原吞噬等重要的体液免疫反应。富含IgM的免疫球蛋白制剂在临床上主要用于抗细菌感染,尤其是革兰阴性菌引起的脓毒症的预防和治疗。由于IgM较难纯化,从而限制了富含IgM的免疫球蛋白制剂在临床上的广泛应用。此文主要对IgM的特点及研究进展做一概述。
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8. 重组人凝血因子Ⅶ的研究进展
朱琳 楼觉人
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 31-35.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.008
摘要38)      PDF(pc) (1035KB)(1702)    收藏
 人凝血因子Ⅶ(human coagulation factor Ⅶ,hFⅦ)是参与血液凝血级联反应的蛋白之一,在凝血过程中发挥极其重要的作用。hFⅦ主要用于治疗和预防先天性或获得性血友病患者的出血,还可用于非血友病患者的创伤性大出血。通过基因工程技术制备hFⅦ不仅安全,而且还易于大规模生产。已有文献报道在利什曼原虫、昆虫细胞、多种哺乳动物细胞以及转基因兔乳腺中成功表达重组hFⅦ。因此,开发能高效表达重组hFⅦ的表达系统,将使大规模生产hFⅦ成为可能。
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9. 复方苦参注射液的抗肿瘤作用研究进展
王宇 蒋梦影 刘竞研 朱枫
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 36-38.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.009
摘要149)      PDF(pc) (967KB)(1833)    收藏
 复方苦参注射液是由苦参和白土茯苓制成的抗肿瘤中药,属非特异性细胞毒药物,具有止血、止痛、抑制肿瘤细胞扩散等功能,同时还可以改善造血功能、增加机体免疫力,且无明显毒副作用。此文就复方苦参注射液在肿瘤治疗中的临床应用研究进展作一综述。
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10. WHO关于百日咳疫苗选择的指南(修订版)
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 46-47.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.011
摘要13)      PDF(pc) (931KB)(1486)    收藏
 此文介绍了百日咳疫苗指南的背景、流行病学研究及WHO对疫苗选择的意见。
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11. 世界抗体-药物偶联物峰会
国际生物制品学杂志    2015, 38 (1): 48-49.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.01.012
摘要15)      PDF(pc) (971KB)(976)    收藏
 2013年10月15—16日,世界抗体-药物偶联物峰会在美国旧金山召开。会上来自多个公司的代表进行了主旨发言,还讨论了抗体-药物偶联物的探索、开发以及化学、生产及控制的优化方面的问题,来自多个生物技术公司、制药公司及合约研究或生产组织的探索与工艺科学家、监管专家、学者及临床医生参加了会议。
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12. ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗的研制
孙芳芳 韩俊杰 周第 赵晨 王海涛 马建 李工 陈靖 王颖 李世慧 魏静
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 53-57.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.001
摘要37)      PDF(pc) (901KB)(1853)    收藏
 目的  通过研究冷酚与粗糖的混合比例、粗糖提纯时的质量浓度和乳糖保护剂的用量来制备符合规定的ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗。  方法  发酵细菌,提取A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖粗制品,以不同的纯化工艺纯化A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖。将4种纯化的多糖原液按一定比例混合,加入乳糖作为保护剂,冷冻干燥制成ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗。 结果  通过比较不同纯化工艺制备的多糖,确定最佳提纯条件为多糖与冷酚的体积比为1:1,粗糖提纯时的质量浓度为6g/L。检测按此纯化条件制备的ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗显示3批疫苗的水分含量分别为1.7%、2.0%和2.1%,疫苗的A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖含量和回收率分别都≥50μg/剂和80%,符合相关规定的要求。  结论  按确定的工艺成功制备ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗。
 
 
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13. 乙型流感疫苗生产用毒株NYMC BX-51B主要抗原的基因特征及传代稳定性研究
刘朝阳 程鹏飞 闫现伟 郁佳俊 毛树宝
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 58-62.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.002
摘要11)      PDF(pc) (1053KB)(1617)    收藏
 目的 了解2013年流感疫苗生产用乙型病毒株NYMC BX-51B主要抗原血凝素 
 (hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的基因特征,并研究该疫苗株的传代稳定性。 方法  对制备的乙型流感病毒株主种子批、工作种子批及收获液病毒进行全面的生物学特性检定。采用逆转录 —PCR法从主种子批工作种子批及疫苗病毒收获液中扩增HA及NA基因片段,并进行全基因序列测定及分析。对7株不同年份的乙型疫苗株及野毒株的HA氨基酸序列进行比对,绘制氨基酸种系发生树。 结果  该毒株主种子批和工作种子批的抗原性与WHO 2013年推荐的毒株一致,种子批和收获液病毒的生物学特性均符合我国2010年版药典标准。HA基因序列长度为1 755bp,编码584个氨基酸;NA基因序列长度为1 401bp,编码466个氨基酸。各代次流感病毒HA和NA的基因核苷酸和氨基酸序列均相同,与GenBank发布的序列完全一致,同源性为100%。2013年乙型疫苗株的HA氨基酸序列与2010和2012年相比,同源性分别为94.3%和98.4%。 结论  2013年乙型流感疫苗株NYMC BX-51B主要抗原基因传代稳定,一般生物学特性符合我国药典要求。2013年疫苗株的HA氨基酸序列与2010年相比进化距离较远。
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14. 分析仪器确认规范在实时荧光定量PCR仪确认中的实施
许敬敏 吕冰凌 刘菊 潘海龙
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 63-66.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.003
摘要15)      PDF(pc) (684KB)(1365)    收藏
 目的  通过对实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RTFQ-PCR)仪实施确认,了解分析仪器确认的具体步骤。方法  根据药品生产质量管理规范的要求,对该RTFQ-PCR仪分别进行安装确认、运行确认和性能确认,以及年度再确认。在性能确认中,通过定量PCR法和环介导恒温(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)法检测分枝杆菌核酸来验证该仪器的准确性和重复性。结果  RTFQ-PCR仪的安装符合要求,各项测试操作均达到规定的标准。当采用定量PCR法检测TB进行RTFQ-PCR仪性能确认时,结核杆菌(tubercle bacillus,TB)核酸浓度的对数与循环阈值(cycle threshold,Ct)之间呈现良好的线性关系,相关系数绝对值达0.999 9;TB核酸回收率为97%~105%;对2个TB样品分别进行3次检测获得的Ct值的变异系数(CV)均小于5%。当采用LAMP法检测分枝杆菌进行RTFQ-PCR仪性能确认和再确认时,对分枝杆菌阳性对照和样品分别进行3次检测获得的Ct值的CV均小于5%。结论  该RTFQ-PCR仪得到成功确认,各方面均符合规定的要求。
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15. 《国际生物制品学杂志》2010—2014年载文分析
陈敏 邹力 徐冰
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 67-71.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.004
摘要10)      PDF(pc) (663KB)(1482)    收藏
 目的  分析《国际生物制品学杂志》2010—2014年的载文特点,了解该刊的学术水平。方法  以《国际生物制品学杂志》2010—2014年5卷共30 期杂志作为统计源,采用文献计量学方法,分别对载文量、栏目、基金论文、引文、作者等项目进行逐项统计和分析。结果  《国际生物制品学杂志》5年共刊载论文352篇,期均发文数为11.73篇,篇均页数为4.59页。该刊的平均引文率为89.77%,篇均引文数为20.59条。作者来自国内22个省、自治区和直辖市,上海作者最多,为78人,占27.46%。第一作者主要来自科研院所,占54.23%,作者合作度为3.62人/篇,合著率为96.48%。 结论  《国际生物制品学杂志》的影响范围较大,是读者获取生物制品领域信息的主要学术期刊。
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16. 埃博拉病毒疫苗研究进展
吴浩飞 陈静 孟胜利 杨晓明
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 72-76,97.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.005
摘要21)      PDF(pc) (719KB)(1462)    收藏
 埃博拉出血热是埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)引起的人类和非人灵长类动物急性出血性传染病,目前尚无治疗药物和疫苗获得批准。科研人员正在进行EBOV疫苗的研发,包括病毒样颗粒疫苗、DNA疫苗和病毒载体疫苗等。虽然这些疫苗的免疫机制各不相同,但部分疫苗在非人灵长类动物中能有效对抗EBOV,提示有望成功研制出EBOV疫苗。
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17. 人乳头瘤病毒及相关治疗性疫苗研究进展
邝林林 楼觉人
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 77-81.   DOI: 10. 3760/cma. j. issn. 1673-4211. 2015.02.006
摘要13)      PDF(pc) (696KB)(1332)    收藏
 人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)是诱发宫颈癌、导致女性死亡的主要原因。随着对HPV的基因结构,主要表达蛋白及致病机制的深入研究,多种不同类型的相关疫苗已进行了动物实验或临床试验。此文对HPV相关疫苗的设计思路和研究进展做一综述。
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18. 嵌合病毒样颗粒疫苗研究进展
仇书兴 霍玉奇 黄晓媛 杨晓明
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 82-58,90.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.007
摘要13)      PDF(pc) (700KB)(1653)    收藏
 嵌合病毒样颗粒(chimeric virus-like particle,cVLP)是一种改良型病毒样颗粒,通过基因融合表达或基于病毒样颗粒平台采用化学偶联的方法将外源抗原多肽与其偶联制备而成。此文就cVLP疫苗的制备方法、免疫机制、表达系统及免疫原性等方面的研究进展做一综述。
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19. 白细胞介素35和iTr35细胞及其与疾病的关系
孟帅 张进安
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 86-90.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.008
摘要24)      PDF(pc) (706KB)(1536)    收藏
 白细胞介素35(interleukin-35,IL-35)为IL-12家族的新成员,是由p35和Ebi3以共价键相结合形成的异源二聚体,主要通过抑制Th17细胞分化和促进调节性T(Treg)细胞增殖在多种疾病的免疫调控中发挥免疫抑制作用。iTr35细胞为IL-35诱导产生的一种新型诱导性Treg细胞亚群,具有长期的功能稳定性。因此,iTr35细胞和IL-35在免疫调控中具有重要作用。
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20. B细胞激活因子与靶向治疗
张丹 瞿爱东
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 91-97.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.009
摘要14)      PDF(pc) (1067KB)(1294)    收藏
 T、B淋巴细胞在自身免疫病发生发展中起重要作用,其中肿瘤坏死因子家族的B细胞激活因子(B cell activating factor of the tumor necrosis factor family, BAFF)是B细胞存活和T细胞激活的重要细胞因子,与许多疾病发生发展相关。此文重点介绍BAFF及其受体的结构功能、BAFF与相关疾病以及基于BAFF的靶向治疗。
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21. WHO关于人乳头瘤病毒疫苗的意见书
国际生物制品学杂志    2015, 38 (2): 98-104.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.02.010
摘要10)      PDF(pc) (719KB)(1043)    收藏
 此文介绍了目前国际上获准使用的两种人乳头瘤病毒疫苗的免疫原性、效果、交叉保护作用、保护作用持续时间、安全性、与其他疫苗同时接种、成本效益以及WHO对人乳头瘤病毒疫苗的意见。
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22. 人甲型H7N9禽流感全病毒灭活疫苗和裂解疫苗在小鼠中的免疫原性研究
徐康维 于丹 邵铭 刘书珍 邹勇 李长贵
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 105-107.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.001
摘要41)      PDF(pc) (661KB)(1425)    收藏
 目的   比较人甲型H7N9禽流感全病毒灭活疫苗和裂解疫苗在小鼠中的免疫原性,为该疫苗的类型选择提供初步依据。 方法   采用相同血凝素含量(5 μg)的H7N9全病毒灭活和裂解疫苗(含或不含氢氧化铝佐剂共4种类型),分别对BALB/c小鼠进行1针或2针免疫。免疫后,用血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)试验检测血清抗体滴度,比较不同类型疫苗的免疫效果。 结果   小鼠免疫1针全病毒灭活疫苗后,全部血清阳转,HI抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)为149;免疫2针后,抗体GMT为243。小鼠免疫1针裂解疫苗后无抗体阳转;免疫2针后全部抗体阳转,GMT为139。两种疫苗添加铝佐剂后,诱导的HI抗体GMT仅略有增加。 结论   H7N9全病毒灭活疫苗在小鼠中的免疫原性较强。在同样类型和剂量的情况下,裂解疫苗需要免疫两次才能达到与全病毒疫苗相同的效果。铝佐剂对免疫原性提升不明显。
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23. 乙型脑炎减毒活疫苗病毒群体的异质性分析
杨会强 汪伟 刘莉娜 何婷 曾献武
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 108-111.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.002
摘要21)      PDF(pc) (936KB)(1585)    收藏
 目的  通过观察疫苗病毒群体中病毒个体的遗传和生物学特征,分析SA14-14-2株乙型脑炎减毒活疫苗病毒的均一性,为疫苗病毒的遗传稳定性提供实验证据。 方法   对3批疫苗病毒连续进行3次蚀斑纯化后,各挑选8个蚀斑纯化株,扩大培养一代。比较24个病毒纯化株的包膜(envelope,E)蛋白基因序列、单斑培养病毒滴度以及蚀斑特征。 结果   24个纯化株中共有6个病毒株(25%)的E蛋白核苷酸发生变化,其中2株(8.3%)的核苷酸变异导致其编码氨基酸发生改变,这些变异占总核苷酸变异数的28.6%。动物实验表明,这2个纯化株没有引起小鼠神经毒力变化。在所有24个纯化株中,我国2010年版药典规定的影响疫苗病毒遗传稳定性的8个E蛋白关键位点的氨基酸均未发生改变。24个纯化株病毒的蚀斑大小和形态以及单斑培养滴度均无明显差异。 结论   疫苗病毒具有典型的准种群体多样性特征,但在群体病毒中未检测到E蛋白氨基酸位点为野生型病毒位点的个体病毒,因此,疫苗病毒具有很好的减毒群体特征和遗传稳定性。
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24. Vero细胞在无血清条件下制备乙型脑炎灭活疫苗#br#
贾锐 马可 王红燕 李虎 朱楠 白亮 张晋
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 112-115.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.003
摘要13)      PDF(pc) (851KB)(1706)    收藏
 目的   探索Vero细胞在无血清条件下制备乙型脑炎灭活疫苗的工艺。 方法   用无血清培养基培养Vero细胞,并将乙型脑炎病毒P3V2株毒种接种于培养的Vero细胞,观察细胞和病毒的生长情况。收获病毒液,通过灭活、纯化制备乙型脑炎灭活疫苗,检测疫苗各项指标,并与有血清培养工艺制备的疫苗(2013年生产的疫苗)进行比较。 结果   无血清培养基培养的Vero细胞生长良好, 培养5 d的细胞呈致密单层生长。3批无血清培养工艺制备的疫苗的第1、2和3次收获液的平均病毒滴度分别为8.847、8.319和7.194 lgLD50/ml。3批无血清培养工艺制备的疫苗半成品的平均抗原含量(1.51 EU/ml)与有血清培养工艺制备的疫苗(1.41 EU/ml)相当,但前者的宿主细胞蛋白含量(19.69 μg/L)则明显低于后者(63.90 μg/L)。 结论   乙型脑炎病毒可在无血清Vero细胞中良好生长,Vero细胞无血清培养工艺制备乙型脑炎灭活疫苗是可行的。
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25. 水痘减毒活疫苗的无菌生产工艺验证
马相虎 陈哲文 晏子厚
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 116-120.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.004
摘要20)      PDF(pc) (691KB)(1622)    收藏
 目的  通过培养基模拟灌装试验,验证水痘减毒活疫苗(水痘疫苗)无菌生产工艺的有效性。方法  模拟水痘疫苗的无菌灌装工艺,对胰酪胨大豆肉汤培养基(TSB)按0.6 ml/瓶进行模拟灌装,对灌装后小瓶进行培养,根据小瓶内培养基的污染情况,评估现行水痘疫苗无菌生产工艺的有效性。结果  3次TSB模拟灌装试验的灌装批量分别为10 160、10 181和10 175瓶,经20~25 ℃和30~35 ℃先后培养后,均未出现TSB污染。在水痘疫苗生产区域的各监测点,≥0.5 μm悬浮粒子均≤70粒/m3,≥5.0 μm悬浮粒子均为0;沉降菌和表面微生物的菌落计数均为0;培养基灵敏度检查和微生物挑战试验均合格。结论  水痘疫苗的无菌生产工艺符合药品生产质量管理规范的要求,可确保产品的无菌性。
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26. 发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒抗原定量检测方法的建立
陈蕾 戴新宪 郝春生 张越 宋冬梅 田龙 李秀玲
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 121-126.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.005
摘要53)      PDF(pc) (954KB)(1683)    收藏
 目的   建立定量检测发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)抗原的方法,以用于疫苗生产过程中SFTSV抗原含量的检测。 方法   用SFTSV抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗SFTSV单克隆抗体。抗体纯化后以辣根过氧化物酶进行标记,建立双抗体夹心ELISA法。确定该法的线性范围和灵敏度,并对该法的准确性、精密性、专属性进行验证。 结果   建立的ELISA法的线性范围为0.117~2.000 mg/L,定量限为0.117 mg/L,线性的决定系数为0.990 3。该法具有良好的准确性和精密度,样品回收率为98%,变异系数均<8%。该法的专属性良好,对6株不同SFTSV的检测结果均为阳性,而与其他布尼亚病毒、Vero细胞培养上清及其他生产辅料均无交叉反应。 结论   成功建立了SFTSV抗原的定量检测方法,为疫苗生产的质量控制奠定了基础。
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27. 基于流感病毒血凝素的通用流感疫苗研究进展
陈绍恒 陈则
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 127-130.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.006
摘要24)      PDF(pc) (686KB)(1461)    收藏
 目前使用的流感疫苗都是针对现行流行株设计的,因此难以有效应对病毒快速变异出现的新病毒株,而开发能同时抵抗多个流感病毒株感染的具有交叉保护作用的通用疫苗是今后流感疫苗研发的趋势。随着对流感病毒研究的深入,人们发现将传统认为具有高度变异性的流感病毒血凝素蛋白合理设计成疫苗靶抗原,也可以在一定程度上起到抗多个流感病毒株感染的保护作用,这表明流感病毒血凝素也具有作为通用流感疫苗候选抗原的潜力。此文对近年来基于血凝素构建的通用流感疫苗的研究进行综述。
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28. 呼吸道合胞病毒减毒活疫苗研制进展
傅生芳 余黎 周旭
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 131-135,152.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.007
摘要18)      PDF(pc) (749KB)(1176)    收藏
 人呼吸道合胞病毒(resipiratory syncytial virus,RSV)是世界范围内儿童下呼吸道感染的主要病原,但其疫苗的开发面临许多困难和挑战。随着反向遗传学及相关技术和工具的应用,RSV疫苗,尤其是减毒活疫苗的研制已经取得很大进展。此文就RSV减毒活疫苗研发的主要突破和研究进展进行综述。
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29. 乙型肝炎病毒核心抗原在疫苗研究中的应用
张鹏艳 叶琳
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 136-140.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.008
摘要47)      PDF(pc) (720KB)(1465)    收藏
 乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis B virus core antigen,HBcAg)是乙型肝炎病毒的核衣壳蛋白,具有高度的免疫原性,能自我装配形成病毒样颗粒,并可接受外源基因的插入。HBcAg作为载体和佐剂已用于数十种病原微生物抗原表位的表达和新型疫苗的研发。此文就HBcAg的结构特点、免疫原性及其在疫苗研究中的应用进展作一综述。
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30. 甲型肝炎疫苗接种反应及处理
樊永贞
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 141-143,152.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.009
摘要19)      PDF(pc) (750KB)(1621)    收藏
 甲型肝炎疫苗有减毒活疫苗和灭活疫苗两种,在中国已列入一类疫苗范畴,供适龄儿童免费接种。该疫苗安全性较好,接种反应多为一般反应,主要是接种部位微痛、发红,少数儿童出现低热、疲乏、腹泻等轻度全身反应,通常不需要特殊处理。个别儿童可出现变态反应、消化系统反应、神经系统反应、血液系统反应、关节炎反应等,经抗过敏、保肝、免疫调节、营养神经、保护血管和对症治疗即可痊愈。
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31. 2015—2016年北半球流感流行季节使用流感疫苗成分的建议
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 144-146.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.010
摘要21)      PDF(pc) (662KB)(1196)    收藏
 2014年9月—2015年1月,全球分离到2009年大流行甲型H1N1(甲型H1N1pdm09)、甲型H3N2和乙型流感病毒。对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明,甲型H1N1pdm09流感病毒呈抗原同质性,并与疫苗病毒A/California/7/2009密切相关。甲型H1N1pdm09流感病毒血凝素基因的序列分析表明,最近流行的大多数病毒属于进化枝6B。大多数新近分离的甲型H3N2流感病毒的抗原性和遗传性与细胞培养病毒A/Switzerland/9715293/2013相似。大多数新近分离的乙型流感病毒B/Yamagata/16/88谱系病毒的抗原性与鸡胚培养病毒B/Phuket/3073/2013更密切相关。
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32. WHO关于乙型脑炎疫苗的意见书
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 147-.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.011
摘要18)      PDF(pc) (734KB)(1127)    收藏
 此文是WHO关于乙型脑炎疫苗的最新意见书,取代2006年的意见书,介绍了乙型脑炎疫苗的安全性、免疫原性、效力、效果、保护作用持续时间、成本效益、接种程序和不良反应以及WHO对该疫苗的意见。
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33. GTCBio第三届流感研究和开发年会
国际生物制品学杂志    2015, 38 (3): 153-156.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.03.012
摘要20)      PDF(pc) (676KB)(1082)    收藏
 2014 年7月9—11日由GTCBio主办的第三届流感研究和开发年会在美国马萨诸塞州波士顿召开。这次会议是2014 年传染病峰会的一部分。会议关于流感疫苗研究和开发的内容包括:持续的流感疫苗需求、通用流感疫苗、大流行流感减毒活疫苗、对流感疫苗的免疫应答、DNA疫苗接种、合成疫苗和重组鞭毛素流感疫苗。会议讨论了改进流感疫苗的需求、评估疫苗效力的方法以及疫苗接种新策略。
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34. 乙型脑炎减毒活疫苗生物学关键质量指标警戒限和行动限的建立与应用
刘菊 朱小农 罗静 汪小磊 田志航 郑庆纹
国际生物制品学杂志    2015, 38 (4): 157-160.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.04.001
摘要11)      PDF(pc) (782KB)(1417)    收藏
 目的   建立适用于乙型脑炎减毒活疫苗(乙脑疫苗)生物学关键质量指标(critical quality attribution,CQA)的警戒限和行动限范围,开展趋势分析以及时发现异常趋势,指导疫苗生产。 方法   根据CQA的数据分布及特点,采用休哈特控制图法及阈值法建立限度范围,比较两种方法的结果,并采用适宜的限度范围对近3年的数据进行统计分析。 结果  乙脑疫苗的病毒滴度等生物学CQA数据为非正态分布,采用休哈特控制图建立的行动限范围有超出法规限的情况;而采用阈值法建立的行动限范围则均在法规限以内。采用阈值法建立的限度分析近3年乙脑疫苗各生产阶段生物学指标的状态,各指标超出行动限的点数均小于总点数的1%,表明乙脑疫苗各生产阶段处于稳定状态。 结论  阈值法为建立限度范围的适用方法;趋势分析中应结合数据本身特性与分布,选用适合的方法来建立限度标准,才能更为科学地将趋势分析工具用于指导实际生产。
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35. 5种不同细胞对柯萨奇病毒A组16型和肠道病毒71型的敏感性研究
杨婷 谢天宏 宋霞 李华 岳磊 龙润乡 杨蓉 罗芳宇 朱凡丽 张也 谢忠平
国际生物制品学杂志    2015, 38 (4): 161-165.   DOI: 10.3760/cma.i.issn.1763-4211.2015.04.002
摘要42)      PDF(pc) (1472KB)(1383)    收藏
 目的   评价肠道病毒研究中常用的5种细胞对柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)和肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的敏感性,为分离和培养CA16和EV71提供实验室依据。方法  用分离的各15株CA16和EV71分别感染RD、Vero、KMB17、Hep2和L20B细胞,每天观察细胞病变情况,按Karber法计算病毒感染性滴度。采用不同的统计学方法(包括方差分析和卡方检验)比较5种细胞对CA16和EV71的敏感性差异。 结果   5种细胞的CA16和EV71病毒感染性滴度间的差异具有统计学意义(CA16:F=18.481,P=0.000;EV71:χ2=63.106,P=0.000)。在5种细胞中,RD细胞对2种病毒的敏感性最高,CA16和EV71的病毒感染性滴度分别可达7.8和8.2 lgCCID50/ml,且均于接种细胞后48 h达增殖高峰,第4天进入增殖平台期;2种病毒在Hep2和L20B细胞中的病毒感染性滴度均较低,CA16分别为5.2和4.2 lgCCID50/ml,EV71分别为4.9和4.0 lgCCID50/ml,且2种病毒在接种后第6~7天才达增殖高峰,但仅L20B细胞中的2种病毒于接种后第7天进入增殖平台期;CA16在Vero和KMB17细胞中的病毒感染性滴度分别为6.9和7.3 lgCCID50/ml,EV71分别为7.1和6.8 lgCCID50/ml,2种病毒均在接种Vero和KMB17细胞后第3天达到增殖高峰,第5天进入增殖平台期。 结论   RD细胞对CA16和EV71的敏感性最好,其次是Vero和KMB17细胞,而Hep2和L20B细胞并非是分离和培养这2种病毒的理想细胞。
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36. 疫苗生产中使用的酸性和碱性苯酚对MRC-5细胞生长的影响
杨月莲 王亮 周锋 谢蕾 沈谊清 蒋樱 王伟 周翎乔
国际生物制品学杂志    2015, 38 (4): 166-168.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.04.003
摘要20)      PDF(pc) (1085KB)(1303)    收藏
 目的   观察疫苗生产中使用的消毒剂酸性苯酚和碱性苯酚对MRC-5细胞生长的影响。 方法   将酸性苯酚(0.37%)和碱性苯酚(0.74%)分别加入MRC-5细胞培养瓶中,观察细胞生长形态,绘制细胞生长曲线,测定细胞贴壁率。分别采用t检验和x2检验对结果进行比较。 结果  加入酸性和碱性苯酚后,第7天的细胞数分别为6.65×105和7.12×105,与对照组(6.93×105)相比,差异无统计学意义(t=0.476,P=0.654;t=0.334,P=0.752);第8小时的细胞贴壁率分别为88.3%和96.0%,与对照组(90.3%)相比,差异亦无统计学意义(x2=0.765,P=0.659;x2=0.376,P=0.585)。 结论  微量酸性和碱性苯酚对MRC-5细胞的生长没有显著影响。
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37. 重组腺病毒-血管内皮生长因子受体在结肠癌治疗中的应用
郑云程
国际生物制品学杂志    2015, 38 (4): 169-172.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.04.004
摘要11)      PDF(pc) (1004KB)(1139)    收藏
 目的   研究以复制缺陷型重组腺病毒(adenovirus,Ad)为载体的血管内皮生长因子受体1和2(vascular endothelial growth factor receptor-1 and -2,VEGFR1R2)对新生血管的抑制作用,以达到治疗结肠肿瘤的目的。方法   利用Ad载体质粒pCA13构建携带VEGFR1R2基因的质粒,在293A细胞中表达并扩增。用蛋白质印迹法检测细胞中Ad-VEGFR1R2的表达。观察Ad-VEGFR1R2对人脐静脉内皮细胞、兔角膜新生血管、小鼠结肠癌生长和肿瘤血管生成的抑制作用。采用重复测量的方差分析对实验结果进行比较。 结果   Ad-VEGFR1R2在293A细胞内成功表达出相对分子质量为62 000的蛋白。体外实验显示其可强烈抑制静脉内皮细胞生长;体内实验表明其对兔角膜新生血管的生长具有抑制作用。结肠癌小鼠模型注射Ad-VEGFR1R2后,第32天肿瘤平均体积为(400±12) mm3,明显小于对照组〔(1 200±90) mm3〕(F=135.54,P<0.01);与对照组相比,注射Ad-VEGFR1R2的小鼠肿瘤组织中的血管生成也较少。 结论   以复制缺陷型重组Ad为载体的VEGFR1R2能明显抑制新生血管形成,并抑制小鼠结肠癌生长。

 

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38. 结核病疫苗的研究进展
杨炯明 晏子厚 楼觉人
国际生物制品学杂志    2015, 38 (4): 173-176.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.04.005
摘要50)      PDF(pc) (802KB)(1753)    收藏
  结核病是由结核杆菌引起的慢性传染病,是流行性最广、病死率最高的传染病之一。卡介苗是目前唯一用于预防结核病的疫苗,可预防儿童结核性脑膜炎和播散性结核病,但对青少年和成年人肺结核的预防效果不理想。目前已经研发出数十种能够诱导细胞免疫应答的新型结核病疫苗,包括结核杆菌减毒疫苗、重组卡介苗、亚单位疫苗和病毒载体疫苗。部分疫苗已进入临床试验,但有些研究结果不够理想。
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39. B群脑膜炎球菌疫苗研究进展
王婷婷 任涛 唐秀丽 郝倩 张明华 魏文进 郑海发
国际生物制品学杂志    2015, 38 (4): 177-180.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.04.006
摘要34)      PDF(pc) (811KB)(1615)    收藏
 脑膜炎球菌是引起流行性脑脊髓膜炎的主要病原菌,是全球重要的公共卫生问题。目前仍缺少安全有效的疫苗用于控制和预防B群脑膜炎球菌引起的感染。此文对B群脑膜炎球菌疫苗研究进展及存在问题进行综述。
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40. 登革热疫苗的近期研究进展
吴师师 吴浩飞 孟胜利
国际生物制品学杂志    2015, 38 (4): 181-184.   DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2015.04.007
摘要23)      PDF(pc) (803KB)(1475)    收藏
 登革热已成为世界上分布最广、发病最多的虫媒病毒病。人口增加和流动性增大加剧了登革病毒传播,对人类健康造成了严重威胁。目前尚无针对该病毒的疫苗上市,几种候选疫苗正处于临床试验阶段。此文就登革病毒的结构特征以及一些前景较好的登革热疫苗的研究状况做一综述。
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