目的  建立定量检测白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产过程中黏着素（pertactin， Prn）的方法。 方法   纯化的Prn免疫家兔以制备高效价血清抗Prn抗体。辛酸-硫酸铵沉淀法纯化抗Prn多克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记，建立双抗体夹心ELISA法。 结果   建立的方法与丝状血凝素和百日咳毒素无交叉反应，特异性较好。该ELISA法在1.25~80 .00 μg/L Prn测量区间有最佳线性，相关系数＞0.99。实验内和实验间检测64、32、16 μg/L Prn，变异系数为2.6%~7.7%，回收率为84.9%~95.5%，精密度和准确度均符合常规质控要求，因此该法的定量限度为16 μg/L。 结论   建立的ELISA法可有效检测百日咳疫苗纯化过程中的Prn含量，为组分百日咳疫苗质量控制奠定了重要基础。

 目的  用植物蛋白胨替代目前肺炎链球菌（pneumococcus，Pn）培养基中的动物蛋白胨，以保证生物制品的安全性。方法   比较大豆蛋白胨与胰蛋白胨的各种成分含量。分别以大豆蛋白胨和胰蛋白胨制备培养基进行9个型Pn大罐培养，比较两种培养基培养对Pn生长和粗制多糖含量的影响。 结果   大豆蛋白胨的总氮含量、氨氮含量和消化系数与胰蛋白胨相近，但大豆蛋白胨的总碳水化合物含量（336.20 μg/g）明显高于胰蛋白胨的总碳水化合物含量（10.56 μg/g）。植物源性培养基培养获得的各型Pn浓度（t＝3.851，P<0.05）和粗制多糖含量（t=3.853，P<0.05）明显高于动物源性培养基培养。 结论   植物蛋白胨可替代动物蛋白胨来制备Pn培养基。

目的  研究建立符合《药品生产质量管理规范（2010年修订）》要求的生物制品生产厂房的设计确认（design qualification，DQ）文件。 方法   将生产厂房的DQ文件分为DQ方案和DQ报告。对工艺布局、生产厂房、净化空调系统、洁净暖房、洁净冷库DQ进行探讨。 结果   通过设计与确认，以文件和记录证明生物制品厂房的设计符合预定用途和药品生产质量管理规范。 结论   建立了符合药品生产质量管理规范的生物制品生产厂房的设计确认文件，为生产安全有效的生物制品奠定了基础。

目的  研究真核表达载体pcDNA3.1(+) 介导白细胞介素（interleukin, IL）24在肝癌细胞系HepG2细胞中表达的可行性，以及IL-24体外对HepG2细胞的抗瘤效应和可能机制。方法 采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.1(+)-IL-24 及空质粒分组转染HepG2细胞，在倒置显微镜下观察细胞形态变化。用噻唑蓝比色方法测量细胞增殖指数，流式细胞仪研究细胞早期凋亡率及其细胞周期分布。结果  IL-24 mRNA成功表达于HepG2细胞中。重组质粒转染组可见明显的凋亡细胞形态，48 h增殖抑制率（F=27.058，P<0.01）、72 h增殖抑制率( F=63.481，P<0.01)和早期细胞凋亡率( F=326.220，P<0.01)与对照组的差异均有统计学意义。细胞分布呈明显的G2/M周期阻滞。结论 真核表达载体pcDNA3.1(+)可以有效地介导IL-24在HepG2细胞的表达。IL-24对HepG2细胞有明显的增殖阻滞和凋亡诱导效应，G2/M细胞周期阻滞或许是IL-24抗瘤效应的机制。

 

 痢疾是全世界范围内流行的肠道传染病，由志贺菌属细菌引起。由于对志贺菌的致病机制和机体抗感染免疫还不十分了解，目前尚无有效的市售痢疾疫苗。此文讨论了志贺菌的致病机制，对痢疾疫苗研究的近展进行了综述，尤其是亚单位疫苗。

 人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）是疱疹病毒科β亚科的成员，具有典型的疱疹病毒结构和基因表达模式。在核衣壳与包膜之间的皮层区域含有多种蛋白以及病毒或细胞的RNA，这些蛋白统称为皮层蛋白。皮层蛋白不仅占病毒颗粒蛋白的大部分，而且功能多样。此文就HCMV皮层蛋白在病毒入胞、基因表达、免疫逃避、组装和释放几个重要阶段中的功能做一综述。

 工艺验证不仅是法律法规对疫苗行业的要求，更是商业化生产的必要条件和产品质量保证的重要手段。随着疫苗行业的发展以及最新行业法规指南的发布，工艺验证工作被赋予了新的内容，开始与产品生命周期的各个阶段联系在一起。此文在最新行业法规和指南的基础上，结合部分实际工作经验，对工艺验证的最新内容和发展趋势进行综述。

泛素-蛋白酶体系统是细胞内蛋白降解的主要途径，目前认为这一系统参与多种炎症和自身免疫病的发生，因此，通过阻断泛素调节蛋白降解成为治疗自身免疫病的新方法。此文就蛋白酶体抑制剂硼替佐米治疗自身免疫病的研究进展做一综述。

 microRNA (miRNA)是一类非编码小RNA分子，通过降解靶mRNA或抑制蛋白质翻译而在转录后水平上对基因表达进行负调控。近年来的大量研究表明，某些特异性miRNA在胚胎干细胞向心肌细胞分化的过程中发挥了不可替代的作用。此文阐述了miRNA的基本生物学特征，以及胚胎干细胞心肌分化及心脏发育过程中几种miRNA所发挥的作用。

 将编码强效广谱中和抗体的基因转移至人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）的抗体基因转移（antibody gene transfer）策略，有望成为预防HIV感染的新型免疫策略。2012年9月疫苗研究基金会（The Foundation for Vaccine Research）在波士顿召开的艾滋病疫苗大会上组织了一次卫星研讨会，主要讨论了腺相关病毒载体在转移广谱中和抗体基因上的应用，以及强效抗体的改良。

此文介绍了轮状病毒病的病原体、单价和五价轮状病毒疫苗的免疫程序、免疫效果、安全性、成本效益以及WHO对疫苗的建议。

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 目的  研究含前S表位重组HBsAg（SS1S2）与重组HBcAg（C）联合免疫BALB/c小鼠的体液和细胞免疫应答。 方法   用纯化的SS1S2与C分别配制含或不含Al(OH)3佐剂（Al）的疫苗。采用简单随机法将雌性BALB/c小鼠分为5组：阴性对照（NC）、SS1S2、SS1S2+C、SS1S2+Al、SS1S2+C+Al，各组分别于0和21 d进行腹腔免疫，对照组注射磷酸盐缓冲液。初免及加强后1周各取一半小鼠采血，采用ELISA法测定抗-HBs、抗-前S1、抗-前S2和抗-HBc滴度；常规制备脾淋巴细胞，用酶联免疫斑点法测定分泌IFN-γ的T细胞频数。采用t检验对各组结果进行比较。 结果   联合HBcAg的疫苗组均产生了较高水平的抗-HBs、抗-前S1、抗-前S2和抗-HBc。初免后1周，SS1S2+C组的抗-HBs阳转比例（1/5）高于SS1S2组（0/5）、SS1S2+Al+C组（4/5）高于SS1S2+Al组（3/5）；SS1S2+C组的抗-前S1阳转比例（3/5）高于SS1S2组（0/5）；HBcAg对抗-前S2的产生无影响。加强免疫后，各疫苗组的抗体滴度均升高，联合HBcAg的疫苗组各抗体滴度明显高于SS1S2疫苗组。各组疫苗免疫后均可诱导细胞免疫应答，初免后SS1S2+C和SS1S2+Al+C组分泌IFN-γ的T细胞频数显著超过SS1S2和S1S2+Al组（t值分别为2.926、2.974，P值均<0.05）；加强免疫后，各组均有加强效应，SS1S2+C组的T细胞频数明显超过SS1S2组（t=4.604，P=0.010）。 结论   SS1S2联合HBcAg可在BALB/c小鼠中诱导较强的免疫应答，HBcAg可增强SS1S2诱导的体液及细胞免疫应答。

 目的  以酸性/碱性苯酚盐作为常规消毒剂，在腮腺炎疫苗生产车间建立新的清洁消毒方法。方法  每月轮换使用酸性/碱性苯酚盐溶液进行擦拭，且每周使用杀孢子剂进行熏蒸。检测新消毒方法的消毒效果，并与原消毒方法进行比较。 结果  新方法的消毒效果好于原方法，使用新方法消毒后，腮腺炎疫苗车间的沉降菌检出率下降，而且腮腺炎疫苗单收液和原液的污染率分别降至0.1%和0.0%。  结论  新消毒方法可用腮腺炎疫苗生产车间的日常清洁消毒。

 目的  研究精子膜特异性蛋白Izumo基因mRNA在内蒙古白绒山羊睾丸和附睾组织中的表达。方法  采用逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法对内蒙古白绒山羊Izumo基因的部分片段进行重新克隆。然后重新设计一对引物，利用RNA印迹技术，以非放射性地高辛标记法对引物进行处理，制成地高辛标记DNA探针，与绒山羊睾丸和附睾头、体、尾部组织的总RNA进行杂交。 结果   RT-PCR扩增产物片段大小与预期的788 bp相符。RNA印迹试验中，标记的探针浓度为100 pg/µl，检测结果显示Izumo mRNA在内蒙古白绒山羊睾丸和附睾头、体、尾部组织均有表达。 结论   内蒙古白绒山羊睾丸和附睾组织均可表达Izumo mRNA，从而为进一步研究Izumo在人类精卵融合中的作用奠定了基础。

目的  初探不同碱处理条件对人血白蛋白（human serum albumin，HSA）分子的影响。方法  在保持pH 10.0±0.2的条件下，以不同钠离子浓度和辛酸钠浓度处理白蛋白，通过圆二色谱和高效液相色谱对碱处理的HSA进行检测，分析不同处理条件对HSA分子的影响。结果  在保持pH 10.0±0.2且辛酸钠浓度为0.16 mmol/g的条件下，以不同钠离子浓度（40～800 mmol/L）处理获得的单体和双体HSA含量均＞96%，而且碱处理HSA的圆二色谱峰值（6.7～8.2 cm）与合格HSA（7.5～8.9cm）相近，峰值位置没有偏移。在保持pH 10.0±0.2且钠离子浓度为40 mmol/L的条件下，以不同辛酸钠浓度（0.16～1.00 mmol /g）处理获得的的单体和双体HSA含量均＞97%，碱处理HSA的圆二色谱峰值（6.1～8.2 cm）与合格HSA（7.5～8.9 cm）相近，峰值位置没有偏移。结论  在一定条件下对HSA进行碱处理不会对其结构产生明显影响。

 目的  初探大规模纯化人血浆载脂蛋白AⅠ(apolipoprotein AⅠ，ApoAⅠ）的低成本生产工艺。方法  以人血浆组分Ⅳ为原料，通过等电点沉淀、阴离子层析、低温乙醇沉淀和超滤等步骤纯化ApoAⅠ蛋白，并放大实验室纯化方法来纯化ApoAⅠ。结果  放大的纯化方法生产的ApoAⅠ的得率和纯度分别为59.0%和85.6%，经相关方法验证为人血浆ApoAⅠ。结论  实验室方法放大的纯化工艺可纯化ApoAⅠ。

 目前乙型肝炎疫苗通过肌肉注射方式接种，虽然具有很好的乙型肝炎预防效果，但依从性差。而鼻内接种生物利用度高，依从性好，被认为是替代注射接种最可行的途径。此文对鼻内接种型乙型肝炎疫苗的递送系统和免疫增强剂的研究进展做一综述。

  戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）引起的戊型肝炎是全球主要的病毒性肝炎之一。目前HEV还没有稳定的体外细胞培养体系，因此，对于HEV疫苗的研究主要集中在有免疫原性的病毒衣壳重组蛋白上。HEV基因组第2个开放阅读框编码的主要衣壳蛋白在体外可以自发组装成病毒样颗粒，后者在动物和人体内均可诱导高滴度保护性抗体，是理想的预防性疫苗组分。此文对HEV的基因组与分类学、病毒样颗粒及其疫苗的研究现状等做一综述。

 核酸疫苗是将编码某种抗原的外源基因（DNA或RNA ) 直接导入动物体细胞内, 通过宿主细胞表达系统合成抗原, 诱导宿主产生对该抗原的免疫应答, 以达到防治疾病目的的一类新型疫苗。研究表明，核酸疫苗不仅具有良好的免疫原性和安全性，而且由于核酸更易于修饰和改造，使核酸疫苗较以往蛋白疫苗具有更大的灵活性。在实际生产中，核酸疫苗的制备和纯化工艺较为简单，生产周期短，生产成本低，且易于制成多价疫苗，因此极有可能成为下一个成功应用于人类的新型疫苗。此文对核酸疫苗的研究进展做一综述。

 尽管早产儿的免疫系统不成熟，但在大多数早产儿中，免疫接种诱生的抗体可提供短期和长期的免疫保护作用，并能诱导免疫记忆。因此，早产儿可按常规免疫接种程序接种相关疫苗。此文主要讨论了早产儿免疫系统和免疫接种，以及早产儿对各种疫苗的免疫应答。

 人表皮生长因子受体3 (human epidermal growth factor receptor 3，HER3) 是I型跨膜酪氨酸激酶受体，在多种肿瘤中表达上调。此文就HER3的结构特征、HER3与肿瘤的关系以及抗HER3抗体的抗肿瘤作用进行简要综述。

 2012年9月19 — 21日，来自47个国家科研、公共和私营机构的350多位专家在泰国曼谷出席了第十届国际轮状病毒研讨会，探讨轮状病毒预防和控制的进展。与会者讨论了轮状病毒病给人类带来的负担和流行病学方面的数据，轮状病毒疫苗的临床试验结果，从已实施轮状病毒疫苗接种计划国家收集到的轮状病毒疫苗效果和安全性的上市后信息，对轮状病毒致病机制、免疫力和毒株多样性的新认识，有关轮状病毒疫苗政策和引入的关键问题。

 2013年9月—2014年1月，全球分离到2009年大流行甲型H1N1（甲型H1N1pdm09）、甲型H3N2和乙型流感病毒。对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明，甲型H1N1pdm09流感病毒呈抗原同质性，并与疫苗病毒A/California/7/2009密切相关。甲型H1N1pdm09流感病毒血凝素基因的序列分析表明，这些病毒属于抗原性不能区分的几个遗传进化枝。大多数新近分离的甲型H3N2流感病毒的抗原性和遗传性与细胞培养参考病毒（如A/Texas/50/2012和A/Victoria/361/2011）相似。大多数新近分离的B/Yamagata/16/88谱系病毒的抗原性与类B/Massachusetts/2/2012更密切相关。

在b型流感嗜血杆菌(Haemophilus in fluenzae type b,Hib)疫苗使用前,13个发达国家的流行病学资料显示,Hib疾病在发达国家是一个严重的健康问题,5岁以下儿童的年发病率为20/10万～100/10万.欧美各国的研究均表明,Hib引起的最重要疾病是化脓性脑膜炎,该病占所有Hib疾病的40％～70％,但不同国家和地区间的差异却很大.在罹患脑膜炎的幸存者中,30％～40％的患者会发生智力低下或听觉丧失等后遗症所致的终身残疾.Hib结合疫苗的问世和推广,使Hib感染引起的疾病迅速下降.以Hib结合疫苗为代表的细菌多糖-蛋白结合疫苗技术是20世纪疫苗技术的重大成就之一,也是疫苗控制疾病的一个良好典范.

目的 优化b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)多糖纯化工艺,替代传统的苯酚结合乙醇方法.  方法 采用十六烷基三甲基溴化铵提取粗糖,以脱氧胆酸钠结合乙醇多级纯化进一步纯化粗糖,通过超滤浓缩和除菌过滤获得纯化的Hib多糖.采用优化的纯化工艺以中试和放大规模各纯化3批Hib多糖,按照《中华人民共和国药典》2010年版三部的要求检测纯化的Hib多糖.   结果 中试和放大规模纯化的各3批Hib多糖的相对分子质量分别为621 800、634 400、659 900和597 200、612 100、583 400,均符合规定的标准.中试和放大规模纯化的各3批Hib多糖的细菌内毒素含量分别为2.0、0.5、0.7 EU/μg和4.0、2.0、1.0 EU/μg,均明显低于规定的标准.鉴别试验显示,中试和放大规模纯化的各批Hib多糖均可与标准Hib抗血清形成明显的沉淀线.  结论 优化的Hib多糖纯化工艺具有较好的稳定性,且易于工艺放大,可替代传统工艺用于Hib多糖的纯化.

 目的   建立检测b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)多聚核糖基核糖醇磷酸盐(polyribosylribitol phosphate,PRP)的竞争酶联免疫吸附法(competative enzyme-linked immunosorbent assay,cELISA).   方法 以Hib PRP-酪胺(PRP-Ty)为包被抗原,待测PRP为竞争抗原,利用方阵滴定法确定抗原与血清抗PRP抗体的最适反应条件,建立cELISA法并验证其准确性和精密度,并将该法与传统检测法进行比较.   结果 最适包被PRP-Ty浓度为1.30 mg/L,血清抗PRP抗体稀释度为1∶40 000.该法的检测线性范围为6.25～100.00 mg/L,决定系数(R2)为0.99,批内精密度为3.39％～6.53％,批间精密度为8.48％.该法对Hib PRP的检测结果与传统化学法一致.  结论 建立的Hib多糖cELISA法的准确性和精密性良好,可特异性检测Hib PRP.

 目的  建立检测19A型肺炎链球菌荚膜多糖的竞争ELISA方法，检测细菌发酵过程中多糖的表达量。方法   以19A型肺炎链球菌多糖为包被物，待测多糖为竞争物，建立间接竞争ELISA方法，并验证该方法的准确性和精密度。用建立的方法检测不同培养条件下发酵物中的多糖表达量。 结果   最佳多糖包被质量浓度为10 mg/L，多糖抗血清稀释度为1：4×104。当检测范围为39.06~5 000.00 μg/L时，决定系数为0.995。批内和批间相对标准差分别为5.08%~9.58%和5.28%~12.93%。培养物样品加标回收率为95.84%~110.07%。两种不同培养条件下培养物中的多糖表达量分别为312.17 mg/L和1 056.42 mg/L。 结论  新建的方法能用于19A型肺炎链球菌发酵物中多糖表达量的检测，对于优化培养条件及掌握培养物收获时间具有指导意义。

 目的  用无动物源性培养基筛选高产糖1型肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae serotype 1，PN1）。方法  配制无动物源性培养基，并用此培养基进行高产糖PN1单菌落筛选。比较筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量。 结果   无动物源性培养基筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量分别为420和960 mg/L，筛选后PN1的产糖量明显高于筛选前PN1。 结论   以无动物源性培养基筛选PN1可使PN1的产糖量明显提高。

 b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）是导致婴幼儿严重细菌性感染的主要致病菌之一。Hib疫苗的研发和使用大大降低了Hib疾病的发病率。研究显示，Hib结合疫苗可有效预防婴幼儿侵袭性Hib疾病，且具有良好的安全性。此文就Hib的病原学、流行病学及疫苗研究进行综述。

 b型流感嗜血杆菌（ Haemophilus influenzae type b，Hib）疫苗在中国属于二类疫苗，其安全性良好，接种反应发生率低。Hib疫苗接种后的一般反应包括局部红肿、疼痛，低热等，无需处理可自愈。Hib疫苗接种后的异常反应包括局部水泡和化脓、全身过敏性皮疹和紫癜、消化道反应、情绪异常等，这些异常反应经对症治疗可得到恢复。

 百日咳毒素是百日咳杆菌重要的保护性抗原，经化学方法脱毒成为百日咳类毒素后制成的无细胞百日咳疫苗（acellular pertussis vaccine，APV）具有残余毒性和毒性逆转的可能性，所以建立特异性毒性检测方法对于保证APV的安全性是十分必要的。此文就国内外APV特异性毒性检测方法的现状做一综述，并结合近几年国外研究的毒性检测新方法进行展望。

 伤寒是一种通过污染的水源和食物传播的胃肠道疾病。在许多缺乏安全饮用水和基础卫生设施的贫穷国家，伤寒沙门菌是重要的致病和致死原因。人类是伤寒沙门菌的唯一天然宿主和贮主。每年伤寒在全球造成近2 100万发病和至少20万例死亡。目前人们正在研发可以安全有效地用于婴幼儿的伤寒结合疫苗。近期WHO和韩国食品药品管理局召开会议，与各专家团体共同探讨制定对伤寒结合疫苗质量、安全性和效力进行管理评估的指导原则。此文介绍了该原则中需要考虑的有关科学和技术问题的共同观点。

  WHO 全球疫苗安全咨询委员会（Global Advisory Committee on Vaccine Safety,  GACVS）是由 WHO设立的临床和科研专家咨询机构，旨在对可能具有全球重要性的疫苗安全问题作出科学严谨的建议。2013 年 6 月 12—13 日， GACVS 在瑞士日内瓦召开第 28 次会议，对亚洲四国使用五价联合疫苗的经验作了评议，现将主要评议结果报告如下。

 此文是WHO关于b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）疫苗的最新意见书。介绍了目前国际上使用的Hib疫苗的免疫原性、效力、接种程序、接种年龄、保护作用持续时间、接种间隔、特殊高危人群、不良反应和成本效益以及WHO对该疫苗的意见。

  2012年6月20日和2013年2月20日，美国免疫实施咨询委员会（ACIP）分别建议对免疫损害、功能性或解剖性无脾、脑脊液漏或人工耳蜗植入的≥19岁成年人及6~18岁且未接种过13价肺炎链球菌结合疫苗（PCV13）的儿童常规接种PCV13。对于6~18岁儿童，无论之前是否接种过7价肺炎链球菌结合疫苗（PCV7）或23价肺炎链球菌多糖疫苗（PPSV23）都应当接种PCV13。对此年龄段儿童使用PPSV23的建议不变。对于适合接种的成年人，除接种PPSV23（目前建议供这些成年人接种的疫苗）外还应当接种PCV13。免疫损害者接种PCV13的裨益与风险的证据已经过建议、评估、发展与评价分级（GRADE）工作组评估。此文概述了ACIP对PCV13使用的新建议，解释了对免疫损害、功能性或解剖性无脾、脑脊液漏或人工耳蜗植入者接种PCV13和PPSV23的建议，总结了ACIP考虑做出建议的证据。