目的  建立从天然百日咳杆菌中提纯百日咳杆菌黏着素（pertactin，PRN）的方法，研究PRN的生物学特性并确定PRN在无细胞百日咳疫苗中的作用。方法  百日咳杆菌CS株于发酵罐培养后，经热浸提、硫酸铵分级沉淀及离子交换层析得到纯化PRN，根据《中华人民共和国药典》2005年版三部的要求，对纯化PRN进行纯度检测及生物学特性研究。结果  各项检测显示，纯化PRN的纯度在95%以上，其相对分子质量和等电点与标准PRN一致。纯化PRN对小鼠具有保护效力，且其保护效力随PRN免疫浓度的增加而增强。未检到纯化PRN的特异性毒性和异常毒性。结论  建立了从天然百日咳杆菌中提纯PRN的方法，而且纯化PRN具有免疫原性和保护效力。

目的  建立麻疹腮腺炎减毒活疫苗生产用鸡胚的质量控制方法。方法  运用酶联免疫吸附测定检测禽白血病病毒；运用双向免疫扩散试验检测马立克氏病病毒、网状内皮组织增生症病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、多杀性巴氏杆菌；运用血凝试验检测血吸附病毒；运用逆转录-聚合酶链反应检测新城疫病毒；依照《中华人民共和国药典》2010年版三部的要求进行无菌检查及支原体和外源因子检查。结果  采用上述方法未在无特定病原体鸡胚（鸡群代码：S、R、D、W、C、F、G、M、H）尿囊液、原代鸡胚成纤维细胞悬液、鸡胚成纤维细胞悬液培养物中检出禽白血病病毒、马立克氏病病毒、网状内皮组织增生症病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、多杀性巴氏杆菌、血吸附病毒和新城疫病毒，表明采用这些方法对麻疹腮腺炎减毒活疫苗生产用鸡胚进行质量控制是可行的。结论  建立了一套用于麻疹腮腺炎减毒活疫苗生产用鸡胚质量控制的快速、特异的检测方法。

人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）是疱疹病毒β亚科的DNA病毒，基因组为线状双链DNA，全长约240 kb，编码200种以上的基因产物。这些基因产物除参与病毒复制增殖外，还与免疫逃逸有关。HCMV感染后，宿主终身带毒并表现为持续性感染。免疫系统对HCMV有持续的选择压力，HCMV存在于宿主体内的关键是逃逸免疫清除。自然杀伤细胞（NK细胞）是人体的固有免疫淋巴细胞，是抵抗感染和清除病变细胞的第一道防线，在体内阻止感染的发生发展起到重要作用。NK细胞表面表达多种抑制性和激活性受体，如杀伤细胞凝集素样受体(KLR)中的CD94/NKG2C和免疫球蛋白样转录体受体1（LIR1/ILT2）为抑制性受体；NKG2D、NKp30则为激活性受体。NK细胞清除靶细胞的能力由抑制性和激活性受体所产生的抑制和激活信号的平衡所控制。HCMV感染细胞对NK细胞介导的细胞毒具有明显的抗性作用。迄今为止，已经发现HCMV 7个基因（UL16、UL18、UL40、UL83、UL112、UL141和UL142）可以编码相应产物，通过不同机制调节NK细胞抑制或激活信号，抑制NK细胞激活，从而对抗NK细胞的清除作用。

人巨细胞病毒（HCMV）普遍存在于各类人群中 ，是先天性病毒感染的最常见原因。在过去的十年中HCMV疫苗的研制取得了巨大进展，此文概述了HCMV疫苗的临床试验和临床前研发现状，重点介绍了近5年来HCMV疫苗和生物学研究进展。

流感是重大的公共卫生问题，可发生全球大流行。研制安全有效的流感疫苗对控制流感至关重要。然而，由于流感病毒的交叉免疫及其机制尚未完全阐明，对研制疫苗带来不利影响。对甲型流感病毒交叉免疫的深入研究必将有助于更好地研制流感疫苗，对预防和控制甲型流感具有重要意义。此文对甲型流感病毒交叉免疫、免疫机制、不同亚型免疫的评价等研究进展进行综述。

宫颈癌的发生与高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)的持续感染有关。随着对HPV及其致病机制的深入研究，已经开发了多种用于宫颈癌生物免疫治疗的疫苗，有些已进入临床试验。此文对已进入临床试验阶段的宫颈癌疫苗的设计策略和临床试验进展做一综述。

多种多糖-蛋白结合疫苗被开发成功，用于预防b型流感嗜血杆菌、脑膜炎球菌和肺炎链球菌感染，为婴幼儿健康提供了保障。常用的载体蛋白是破伤风类毒素、白喉类毒素和白喉类毒素突变体CRM197。在临床研究中观察到，相同载体或不同载体结合疫苗同时接种, 或者与DTP/HBV/IPV等疫苗同时接种时，会干扰对某些抗原的免疫应答，其中可能有多种机制在起作用。随着更多的结合疫苗有望进入婴幼儿期基础免疫程序和无细胞百日咳疫苗（aP）逐渐代替全细胞百日咳疫苗（wP），如何选择合适的或者新的载体蛋白和佐剂、谨慎设计临床研究方案和接种程序等方面的问题越来越受到人们的关注。

肺炎链球菌疫苗接种是抵抗肺炎链球菌病的最主要策略之一。此文阐述了后7价肺炎链球菌结合疫苗接种时代的肺炎链球菌病的临床和流行特征、新批准的2种肺炎链球菌结合疫苗的应用以及基于蛋白的肺炎链球菌疫苗的研发现状。

表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）是与大多数上皮实体肿瘤密切相关的一种跨膜糖蛋白。EGFR的致癌机制很多，并且往往呈现出肿瘤特异性。由于EGFR在许多肿瘤发生过程中起着重要的促进作用，因此，EGFR已成为肿瘤靶向治疗领域的一个研究热点。目前，靶向EGFR的药物主要有两种： EGFR胞外区结合抗体和小分子酪氨酸激酶抑制剂。此文对EGFR的结构、致癌机制、靶向治疗等进行探讨，希望通过在分子和基因水平对EGFR在恶性肿瘤中所起作用的了解，促进肿瘤特异性抗癌药物的设计、开发和临床评价。

 2010年3月12日在英国韦林加登城由EuroSciCon组织召开了“重组疫苗：候选疫苗发现和疫苗接种的策略”会议，来自英国、马来西亚和澳大利亚的国际科学家参加了此次会议。病原体的基因组分析和致病机制的阐明已促进候选疫苗的发现和研制。此次会议除了对目标选择和临床试验作了详细说明外，还阐述了疫苗的生产可能性、按比例扩大和接种。

目的  了解新生儿单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type 1，HSV-1）和人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）血清抗体阳性情况及其与早产儿临床表现的关系。方法  收集新生儿血清共178份（其中健康产妇顺产新生儿脐带血血清114份，早产儿外周血血清64份），分别用HSV-1和HCMV IgG、IgM ELISA试剂盒进行检测。采用χ2检验对结果进行比较。结果  178名新生儿中，血清HSV-1 IgG阳性率为83.70%，IgM为阴性；HCMV IgG和IgM阳性率分别为94.38%和0.56%。其中114名顺产新生儿中，HSV-1 IgG和IgM阳性率分别为78.07%和0.00%，HCMV IgG和IgM阳性率分别为94.74%和0.88%，HSV-1 IgG和HCMV IgG共阳性率为73.68%。在64名早产儿中，HSV-1 IgG和IgM阳性率分别为93.75%和0.00%，HCMV IgG和IgM阳性率分别为93.75%和0.00%，HSV-1 IgG和HCMV IgG共阳性率为87.50%。早产儿与顺产儿的HCMV IgG阳性率差异无统计学意义（χ2=0.07，P>0.05）；但早产儿HSV-1 IgG阳性率以及HSV-1 IgG和HCMV IgG共阳性率均高于顺产儿，且差异有统计学意义（χ2值分别为7.38和4.65，P值均<0.05）。HSV-1 IgG和HCMV IgG阳性早产儿出现胎膜早破、胎盘早剥、羊水过少、羊水污染和皮肤异常的几率明显高于阴性早产儿。结论  本次检测的新生儿HSV-1 IgG和HCMV IgG阳性率较高，且两者阳性的早产儿可能伴随胎膜早破等临床表现。

目的  对治疗用卡介苗毒性试验和脾激活试验进行方法学验证。方法  分别用治疗用卡介苗、皮内注射用卡介苗或生理氯化钠溶液处理小鼠，通过每天观察处理小鼠的体重变化和健康状况并打分来进行毒性试验，通过计算处理小鼠的脾指数来进行脾激活试验。使用NCSS软件对检测结果进行方差分析，考察试验方法的精密度和中间精密度。结果  操作人员和时间变化对毒性试验和脾激活试验的检测结果没有影响。结论  治疗用卡介苗毒性试验和脾激活试验均具有可重复性和精密性，可用于治疗用卡介苗的安全性和有效性检测。

目的  确认定量ELISA法检测健康人血浆抗呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）IgG抗体的可行性。方法  采用定量ELISA法检测健康人血浆，对初检的抗-RSV阳性血浆（抗-RSV效价>11 U/ml）进行复检和中和试验。结果  检测3041份血浆，初检和复检的血浆抗-RSV阳性率分别为5.4%和4.7%。定量ELISA法的特异性和精密性均良好，抗-RSV阳性血浆的有效检出率为87.8%。结论  定量ELISA法可用于健康人血浆抗RSV IgG抗体的大规模筛检。

恩替卡韦（entecavir, ETV）是新一代核苷酸类抗病毒药物，具有强效抗病毒作用和极低耐药性的特点，被广泛用于治疗乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）相关的慢性肝炎、肝硬化和急慢性重型肝炎等疾病。此文就ETV在HBV相关肝病的临床治疗中的应用作一综述。

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是导致尖锐湿疣、宫颈上皮瘤样病变和宫颈癌的主要原因。鉴于HPV的特殊扩增机制，目前尚不能通过体外培养的传统方法来获得病毒用于疫苗研究。HPV的主要衣壳蛋白L1在体外可自行组装成病毒样颗粒（virus-like partical，VLP），形成的VLP在实验动物和人体中均可诱生高滴度的保护性抗体，是理想的预防性疫苗组分。此文就HPV的流行病学、致病机制及其VLP的制备和应用作一综述。

新版《中华人民共和国药典》对生物制品的质量要求更高，其中对残留宿主细胞蛋白（HCP）在生物制品中含量的要求也越来越严格。目前HCP研究领域进展迅速。此文对生物制品中宿主残留蛋白的风险分析和检测方法作一综述。

幽门螺杆菌感染在全世界广泛存在，能引起多种胃部疾病，包括胃癌。尽管抗生素治疗有效，但是人们一致认为幽门螺杆菌疫苗可能是控制幽门螺杆菌感染的最佳方法。有效的幽门螺杆菌疫苗策略可显著增进全世界人群的健康。此文就幽门螺杆菌疫苗的保护性抗原、佐剂、动物模型、免疫机制的研究进展进行综述。

脑膜炎球菌是唯一能导致全球流行性脑脊髓膜炎（流脑）流行的病因。全球范围内90% 的病例是由A、B、C、Y和W135群所致。欧美国家主要流行菌群为B、C和Y群；亚洲和非洲主要是A、C和W135群。A、C、Y和W135群多糖疫苗能有效控制流脑暴发，但由于在婴儿中免疫原性差，应用并不广泛。发达国家在引进C群结合疫苗后，C群流脑发病数迅速下降。A、C、Y和W135群结合疫苗的研制成功有望控制这些群导致的流脑流行。以外膜囊、外膜蛋白和基因组来源的表面蛋白为目标的B群疫苗研究取得不同程度的进展。

2010年4月WHO在日内瓦召开了WHO人乳头瘤病毒（human papillomavirus, HPV）疫苗咨询委员会会议。会议讨论了有关HPV疫苗的政策和研究状况、HPV疫苗纳入免疫计划和疫苗接种方面的内容，并向WHO建议实施全球接种所要采取的措施。

国际艾滋病疫苗行动组织是一个国际非营利组织，致力于促进疫苗研发，预防艾滋病传播。此文侧重介绍该组织关于艾滋病疫苗项目的研究目标和进展。

此文介绍了百日咳疫苗(全细胞疫苗和无细胞疫苗)的背景资料，疫苗的免疫效果、不良反应、免疫程序和免疫策略，疫苗成本效益，以及WHO对该疫苗的意见。

目的  建立地鼠多瘤病毒（hamster polyomavirus, HaPyV）PCR检测方法，并应用于乙型脑炎减毒活疫苗生产过程中地鼠肾细胞的感染检测。方法  设计针对HaPyV衣壳蛋白VP1基因片段的特异引物，以含HaPyV VP1片段的质粒PMD19T-HaPyV688为模板进行PCR扩增并测序确认扩增产物。以多种病毒DNA为模板进行PCR扩增并对扩增产物进行斑点杂交鉴定以验证PCR方法的特异性。将定量的质粒PMD19T-HaPyV688 10倍系列稀释后进行PCR敏感性检测。以小鼠多瘤病毒(murine polyomavirus, MuPyV)检验PCR法对质粒DNA和病毒DNA检测的一致性。应用建立的方法对生产用地鼠肾细胞悬液进行HaPyV DNA检测。结果  仅含有质粒PMD19T-HaPyV688和MuPyV DNA的样品能够扩增出600 bp的片段，经斑点杂交及测序证明其分别为HaPyV和MuPyV的VP1特异基因片段。PCR所能检出的PMD19T-HaPyV688和MuPyV 的最少DNA拷贝数分别为5300和590。7个亚批生产用地鼠肾细胞悬液的HaPyV检测结果均为阴性。结论  建立的PCR方法具有较高的敏感性和特异性，可用于生产用地鼠肾细胞HaPyV感染的检测。

近年来肠道病毒71型（enterovirus 71, EV71）在我国引发了手足口病的暴发和流行。针对该病毒的流行病学研究，为预防和控制EV71引发的手足口病流行提供重要依据。此文就目前EV71在人群中的血清阳性率和中和抗体水平资料进行综述。

 肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）是引起手足口病（hand, foot and mouth disease，HFMD）的主要病原体之一，HFMD可并发神经系统疾病，甚至导致死亡。对于EV71感染，目前尚无有效的治疗药物和措施，因此研制有效的疫苗是控制EV71流行的最佳方法。此文就EV71疫苗的研究进展进行综述。

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）持续感染是妇女发生子宫颈癌的必要因素，此文介绍了HPV的流行病学特征，包括HPV的分布、感染的危险因素以及导致宫颈癌的流行病学证据。

脑膜炎球菌是唯一能导致全球流行性脑脊髓膜炎（流脑）流行的病因。全球范围内90% 的病例是由A、B、C、Y和W135群所致。欧美国家主要流行菌群为B、C和Y群；亚洲和非洲主要是A、C和W135群。A、C、Y和W135群多糖疫苗能有效控制流脑暴发，但由于在婴儿中免疫原性差，应用并不广泛。发达国家在引进C群结合疫苗后，C群流脑发病数迅速下降。A、C、Y和W135群结合疫苗的研制成功有望控制这些群导致的流脑流行。以外膜囊、外膜蛋白和基因组来源的表面蛋白为目标的B群疫苗研究取得不同程度的进展。

肿瘤的生长、侵袭和迁移依赖于血管新生。因此，以抑制肿瘤血管形成为目标的抗肿瘤治疗策略是当前研究的热点。血管内皮生长因子及其受体在肿瘤血管新生这一病理性血管形成过程中起关键作用，从而使它们成为研发肿瘤疫苗的靶点。此文就疫苗的研发基础、免疫机制及研究进展做一综述。

端粒酶是在细胞衰老和肿瘤发生中发挥重要作用的核糖核蛋白酶，具有成为抗癌药物靶标的巨大潜力。此文以一种具有临床前景的端粒酶疫苗GV1001为例，论述了端粒酶疫苗的设计依据以及诱导机体产生抗肿瘤反应的生物学原理、免疫原性和临床疗效。结合已进行的Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期临床试验与取得的成果和经验，进一步将GV1001与其他针对端粒酶的免疫治疗方法相比较，对端粒酶疫苗未来的发展方向与需要解决的问题作一阐述，从而评价端粒酶疫苗成为未来肿瘤治疗标准的可行性。

植物转基因技术是一种新兴的技术手段，它给低成本、大规模生产重组蛋白质带来了广阔的前景。此文综述了目前该领域中应用的各种蛋白表达技术，并对植物疫苗在预防和治疗自身免疫性疾病方面的研究进展，尤其对口服自身抗原诱导机体免疫耐受予以重点介绍。

几十年来，新型疫苗佐剂大都凭借经验进行研发。而今，已发现了一系列通过明确的免疫机制产生作用的新型佐剂及其相关配方。了解佐剂的作用机制对疫苗的设计至关重要，因为这将免疫应答转向更加有效的疾病特异性效应机制和适当的免疫记忆方面。同时，为在开发阶段和管理层面评估佐剂的安全性，建立新的范例也非常重要。2010年4月29—30日，在美国马里兰州贝塞达斯，由国际生物制品协会组织召开了一次关于佐剂的作用方式的会议。会议主要讨论了对佐剂作用方式的认识可能会影响疫苗安全性的评估，并有助于特异性疫苗的开发。

2011年9月—2012年1月，全球分离到2009大流行甲型H1N1（甲型H1N1pdm09）、甲型H5N1、甲型H3N2变异株（v）、甲型H1N1v、甲型H1N2v和乙型流感病毒。北半球甲型H1N1pdm09流感病毒以很低水平传播，流感疫情较轻。对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明，甲型H1N1pdm09流感病毒呈抗原同质性，并与疫苗病毒A/California/7/2009密切相关。甲型H1N1pdm09流感病毒血凝素基因的序列分析表明，病毒属于抗原性不能区别的至少8个基因群。大多数新近分离的甲型H3N2病毒的抗原性和遗传性与类A/Victoria/361/2011参考病毒密切相关。大多数B/Yamagata/16/88谱系病毒的抗原性与类B/Wisconsin/1/2010病毒密切相关。

目的  对内蒙古白绒山羊精子膜蛋白Izumo的基因编码区cDNA序列进行扩增并对其结构作初步分析。方法  以已知的内蒙古白绒山羊Izumo部分基因序列为模板，采用cDNA末端快速扩增技术扩增3′端和5′端未知序列，钓取基因编码区，并分析编码区氨基酸序列。结果  经序列扩增和拼接，得到1035 bp的Izumo编码区cDNA序列，后者编码由344个氨基酸组成的蛋白。氨基酸序列中包含免疫球蛋白样结构域。Izumo编码区的疏水性平均值为-0.181。找到4个位于Izumo蛋白胞外区的潜在磷酸化位点。结论  进一步确定Izumo属于免疫球蛋白超家族的一员，初步得出Izumo是一种亲水性蛋白，根据潜在磷酸化位点的位置，推断磷酸化可能不是Izumo蛋白发挥作用的机制。

目的  对两个工作种子批菌种D2-甲12制备的两批冻干卡介苗接种人体后的安全性和效果进行临床考核。 方法  对100名结核杆菌纯化蛋白衍生物（PPD）皮肤试验阴性的3月龄~50岁健康对象和205名新生儿分别接种上述两个批次的观察疫苗和一个对照疫苗。观察接种后的局部和全身反应，测量卡痕，并对新生儿进行PPD皮肤试验。采用χ²检验和t检验对新生儿各组间的卡痕和PPD试验结果进行比较。结果  所有对象接种后均未发现接种部位和全身不良反应。新生儿卡痕均值≥4.6 mm，PPD硬结均值≥6.8 mm。卡痕和PPD试验阳性率均超过90%，两者在新生儿各组间的差异均无统计学意义（χ² =0.001~1.713，P=0.191~1.000）。卡痕均值和PPD硬结均值在两个观察疫苗组间的差异无统计学意义（t=0.773，P=0.441；t=0.226，P=0.822），而对照疫苗组与两个观察疫苗组间的差异均有统计学意义（t=2.645~3.361，P=0.001~0.010）。  结论  两个工作种子批菌种D2-甲12制备的卡介苗接种人体是安全的，并具有良好的接种效果。

黏膜免疫包括各种对不同病原体易感的黏膜表面。此文根据黏膜表面的多样性及其独特的组织环境探索黏膜免疫的基本原理，并基于大动物对感染和疫苗接种的免疫应答的实验研究，为研制诱导黏膜免疫的疫苗提供一些思路。

CpG DNA是含有非甲基化CpG基序的寡脱氧核苷酸，通过Toll样受体9（TLR9）激活树突状细胞（DC）和B细胞产生免疫应答。 CpG DNA可以促进专职抗原呈递细胞有效地呈递抗原，从而增强疫苗的特异性免疫应答。目前使用CpG DNA佐剂的疫苗免疫后能维持长期免疫，具有明显的全身和黏膜免疫效果。临床前和临床试验表明，CpG DNA佐剂安全有效，能够提高传染病和肿瘤疫苗的效能，增强疫苗的免疫原性。

端粒酶是在细胞衰老和肿瘤发生中发挥重要作用的核糖核蛋白酶，具有成为抗癌药物靶标的巨大潜力。此文以一种具有临床前景的端粒酶疫苗GV1001为例，
论述了端粒酶疫苗的设计依据以及诱导机体产生抗肿瘤反应的生物学原理、免疫原性和临床疗效。结合已进行的Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期临床试验与取得的成果和经验，进一步将GV1001与其他针对端粒酶的免疫治疗方法相比较，对端粒酶疫苗未来的发展方向与需要解决的问题作一阐述，从而评价端粒酶疫苗成为未来肿瘤治疗标准的可行性。

人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，Her2）是表皮生长因子受体家族成员之一，在乳腺癌等多种人类肿瘤中过表达，是肿瘤治疗的重要靶点，也是肿瘤诊断和预后检测的重要指标。此文阐述了Her2的结构特征、Her2与肿瘤发生发展的关系、抗Her2单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用以及针对Her2靶点的其他治疗策略。

诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell, iPSC)是通过将几个特定的转录因子导入分化的体细胞以诱导体细胞重编程而获得的可不断自我更新且具有多向分化潜能的多能干细胞。如同胚胎干细胞, iPSC仍维持未分化状态，可分化为3个胚层来源的所有细胞以参与机体所有组织和器官的形成。这项技术避免了干细胞研究领域的免疫排斥和伦理道德问题，同时为特异性疾病的研究提供了强有力的工具。因此，iPSC研究不仅具有重要的理论研究意义，而且在再生医学及药物筛选与评价方面具有很好的应用价值。