2026年, 第49卷, 第5期 刊出日期：2026-10-10
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 293-301. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20260305-00012目的 制备高纯度新型H7N9禽流感病毒基质蛋白1（matrix protein 1，M1）及其多克隆抗体（多抗）。方法 借助pGEX-6p-1载体，设计于M1的N端、C端分别融合谷胱甘肽硫转移酶（glutathione S-transferase，GST）、组氨酸（histidine，His）标签的嵌合M1（chimeric M1，cM1）序列，对cM1的生物信息学特性进行分析，将鉴定正确的重组表达载体pGEX-6p-1-cM1转化至E. coli BL21(DE3)感受态细胞，使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷进行诱导表达。基于最佳表达条件放大培养后，分别用His标签和GST标签亲和层析纯化诱导产物。纯化的目标蛋白经SDS-PAGE分析后，免疫新西兰大白兔制备多抗，并采用蛋白质印迹法、间接免疫荧光法和间接ELISA检测该抗体的特异性及效价。结果 利用原核表达系统成功制备了高纯度的cM1，表观相对分子量约55 000，用其免疫新西兰大白兔制备了抗cM1多抗。间接免疫荧光法和蛋白质印迹法显示该多抗能高效识别新型H7N9禽流感病毒；间接ELISA检测结果显示该多抗效价为1∶10 240。结论 利用原核表达系统可溶性表达并纯化获得了高纯度的cM1，制备的多抗免疫应答强、效价高，为深入探索M1的结构及功能、建立H7N9禽流感病毒免疫学检测方法奠定了基础。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 302-306. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250822-00068目的 比较3种按不同比例配制的佐剂稀释液，筛选适合猪场使用的猪瘟活疫苗长效佐剂稀释液。方法 采用3种佐剂AD05、氢氧化铝胶和IMS1313，分别以5%和10%的体积分数配制6组稀释液，以生理盐水作为对照，进行外观、pH、无菌、安全性、效价及抗体检测。综合各项指标，筛选最佳佐剂稀释液用于健康仔猪的临床试验。结果 各组佐剂稀释液均能快速溶解疫苗；pH均在6.8～7.2；无菌和支原体检验均合格。10% AD05组出现1头仔猪厌食和精神萎靡，其他组无明显症状；5%氢氧化铝胶组效价为103.5半数荧光抗体感染剂量（50% fluorescent antibody infectious dose, FAID50），10%氢氧化铝胶组效价为102.4 FAID50，其他组效价均＞104.0 FAID50；免疫后90 d，只有5% 和10% AD05组抗体阳性率＞95%。综合各项指标和成本，筛选5% AD05作为猪瘟活疫苗佐剂稀释液。临床试验中，免疫后第30天猪瘟抗体阳性率即达97%，第130天（175日龄）阳性率仍保持在90%；阻断率为74.07%，变异系数0.19。结论 5% AD05佐剂可以作为猪瘟活疫苗的长效佐剂稀释液，为规模化猪场简化免疫程序、减少猪群应激、高效预防猪瘟提供新的思路。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 307-312. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20260319-00017目的 考察聚偏二氟乙烯除菌过滤在流感病毒裂解疫苗半成品配制工艺中的可行性。方法 使用聚偏二氟乙烯除菌滤器对流感病毒裂解疫苗半成品实施除菌过滤工艺验证，开展滤器兼容性测试、吸附试验、细菌截留有效性验证，并考察除菌过滤后半成品的质量参数。结果 在现有工艺条件下，过滤后样品的泡点、流量时间、重量及外观均符合可接受标准，表明滤器与样品兼容性良好。除菌过滤后，样品的血凝素含量和蛋白质含量均在未过滤样品的96%～104%范围内，吸附影响较小。0.22 μm聚偏二氟乙烯除菌过滤滤器可完全截留半成品中的缺陷短波单胞菌。除菌过滤前后半成品各型血凝素含量和蛋白质含量差异均无统计学意义（t=0.04~1.81，均P＞0.05），聚山梨酯80残留量在过滤后有所下降（t=6.93，P＜0.05）。未见除菌过滤对半成品主要质量属性产生不利影响。除菌过滤后半成品的均一性和有效期均符合质量要求。结论 聚偏二氟乙烯除菌过滤适用于流感病毒裂解疫苗生产工艺，为该疫苗半成品配制增加除菌过滤工序积累了关键数据。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 313-317. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20251105-00080目的 通过分析Sabin株脊髓灰质炎（脊灰）灭活疫苗（Sabin strain inactivated poliovirus vaccine，sIPV）病毒灭活液样品透析前后样品中的物质变化探讨透析效果。方法 取Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV病毒灭活液各3批进行透析处理，对透析前后样品的体积、D抗原含量、pH值、甲醛含量、渗透压进行评价。结果 透析前后sIPV灭活液体积差≤1 mL；透析后，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型的D抗原回收率分别为（95.08±3.71）%、（90.17±2.12）%和（98.96±1.24）%，均> 90%；透析后Ⅰ、Ⅱ型pH值分别从7.00±0.00、6.90±0.00均升高至7.37±0.06，Ⅲ型pH值透析前（6.97±0.06）后（7.27±0.15）无明显变化，样品透析后的pH值均收敛于7.30~7.40区间；透析前Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中甲醛含量分别为96~97、94~96、94~98 μg/mL，透析后均降至1 μg/mL以下，甲醛清除率均达99%以上；透析后Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型的渗透压分别从（302±12）、（391±5）、（359±2） mOsm/kg降至（282±2）、（282±3）、（282±3） mOsm/kg，最终均稳定于约282 mOsm/kg。结论 透析后的sIPV病毒灭活液既去除了杂质，又保留了关键目标抗原成分，满足后续研究要求。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 318-324. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20251023-00077目的 评价4种品牌无血清细胞冻存液在低密度无血清悬浮Madin Darby犬肾（Madin Darby canine kidney，MDCK）细胞长期冻存中的保护效果，并比较不同冻存条件对细胞复苏后存活率、增殖能力及病毒产毒性能的影响。方法 将无血清悬浮细胞MDCK-SFSU按每支2×106个细胞的密度，分别加入不同品牌无血清冻存液（A、B、C、D），并以二甲基亚砜冻存液为对照组，分别在﹣80 ℃和液氮条件下冻存0、3和6个月。复苏后检测细胞存活率，绘制生长曲线、活力曲线并评估其接种流感病毒后的产毒能力，以综合评价冻存效果。结果 冻存液A、B、C能够在﹣80 ℃条件下有效保存低密度MDCK-SFSU细胞，冻存6个月复苏后， A、B、C组细胞活力高于对照组且差异有统计学意义（F= 247.00， P＜0.001），均达到88%以上，B、C组细胞培养病毒的血凝滴度均大于9 log2血凝单位/50 μL。该保护效应无法应用到液氮保存环境。冻存液D和对照组在2种低温条件下对细胞的保护作用均欠佳。结论 低密度MDCK无血清悬浮细胞可采用冻存液B或C在﹣80 ℃保存6个月。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 325-329. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20250604-00041目的 制备A基因型腮腺炎病毒S79株抗血清，用于传统腮腺炎疫苗免疫效力评价及A 基因型毒株血清学鉴别；制备靶向流行变异毒株的F基因型腮腺炎病毒QBB株抗血清，用于监测抗原漂移现象、评估传统腮腺炎疫苗对流行野毒株的交叉中和能力。方法 分别将A基因型腮腺炎病毒S79株和F基因型腮腺炎病毒QBB株接种于Vero细胞，收获病毒后经超速离心纯化制备2种免疫原。将2种免疫原分别与弗氏佐剂按体积比1∶1混合后，经背部多点注射免疫日本大耳白兔制备2种腮腺炎病毒抗血清，以PBS为对照。采用中和试验法、间接ELISA和免疫印迹法分别检测血清抗体中和效价、IgG抗体浓度及血清抗体与抗原特异性结合能力。结果 完成2种腮腺炎病毒抗血清制备。中和试验结果显示，S79株病毒第4次免疫血清分别在1∶1 024与1∶256稀释时可以完全中和1 000 CCID50/mL S79株与QBB株病毒；QBB株病毒第4次免疫血清分别在1∶2 048与1∶32 768稀释时可以完全中和1 000 CCID50/mL S79株与QBB株病毒。间接ELISA结果显示，S79及QBB株第4次免疫血清IgG抗体效价均达到1∶107。用2种抗血清，通过免疫印迹法均检测到QBB、S79毒株以及腮腺炎病毒血凝素-神经氨酸酶截短蛋白的结合条带。结论 成功制备A、F基因型腮腺炎病毒抗血清，为腮腺炎疫苗免疫效果评价、毒株血清学分型、疫苗跨基因型交叉保护研究提供关键数据参考。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 330-336. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20260120-00003目的 建立并验证适用于四价HPV疫苗主要抗原组分衣壳蛋白L1的比活性检测方法。方法 采用双抗夹心ELISA，以四参数逻辑斯谛模型拟合标准曲线，建立HPV疫苗比活性检测方法；通过专属性、线性、准确度、中间精密度、检测范围及方法适用性实验，对该方法进行系统验证。结果 HPV6/11/16/18型ELISA检测试剂盒的专属性合格，各型别检测无交叉反应；线性关系均良好，决定系数均≥0.99；重复性相对标准偏差均≤15%，中间精密度相对标准偏差均≤20%；在抗原含量15.625~16 000.000 ng/mL范围内，加标回收率均值为98%～110%，各型别加标回收率的相对标准偏差均≤12%。检测不同批次疫苗单价原液及洗脱物样品，其比活性均满足合格标准。结论 建立的HPV L1抗原比活性的双抗夹心 ELISA检测法专属性、线性、重复性、准确度及中间精密度良好，可用于四价 HPV 疫苗单价原液及生产过程控制样品的抗原比活性检测，为疫苗生产工艺监控及终产品质量评估提供技术保障。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 337-346. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20260315-00015黏膜系统是机体抵御病原体入侵的第1道防线，70%~90%的感染在呼吸道、消化道及女性生殖道等黏膜表面发生。自然感染可在黏膜局部诱导特异性免疫记忆。传统注射疫苗主要诱导血清中和抗体，难以在黏膜表面建立分泌型IgA及组织驻留记忆T/B细胞介导的免疫屏障；相对的，黏膜疫苗可直接靶向黏膜组织，诱导局部特异性免疫应答，从源头阻断病原体入侵。此文系统梳理了3种黏膜途径的抗原识别、摄取与提呈机制，分析鼻喷、口服、吸入等不同途径疫苗的研发进展、免疫原性与有效性，同时探讨了黏膜疫苗的安全性挑战问题，并提出新型疫苗平台开发、佐剂创新、序贯接种策略及标准化评价体系等未来研究方向，为黏膜疫苗研发与临床应用提供参考。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 347-355. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20260204-00007近10年来，以细胞基质为基础的新型生物制品发展迅猛，对生物安全性检测提出新要求。相较于传统检测法，下一代测序（next-generation sequencing，NGS），又称高通量测序，凭借广谱检测与高灵敏度的优势，正在革新生物制品外源病毒检测体系。目前，国内外检测机构、国际协调机构及各国监管机构正合力制定NGS用于病毒安全检测的标准品、规范化验证指导及法规。此文梳理了NGS技术在此领域的研究进展，聚焦技术标准化等关键问题，为技术优化和行业实践提供依据。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 356-364. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20251011-00074EB病毒（Epstein-Barr virus, EBV）核抗原1（EBV nuclear antigen 1,EBNA1）是EBV潜伏感染中的核心蛋白，通过维持病毒基因组、促进免疫逃逸和驱动细胞永生化，在多种EBV相关肿瘤（如伯基特淋巴瘤、鼻咽癌等）及自身免疫性疾病中扮演关键角色。此文系统阐述了EBNA1的多结构域特征及致病分子机制，包括甘氨酸-丙氨酸重复序列介导的翻译自抑制与免疫逃逸、DNA结合/二聚化域介导的病毒基因组复制和维持、泛素特异性蛋白酶7结合域对p53通路的干扰等，以及靶向EBNA1的新型治疗策略，包括破坏其DNA结合能力的小分子抑制剂、单克隆抗体、靶向甘氨酸-丙氨酸重复序列/核仁素相互作用的化合物，以及蛋白降解靶向嵌合体技术；并讨论了这些治疗策略在药物递送、选择性和耐药性方面面临的挑战和应用前景。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 365-374. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20260214-00009脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis，Nm）是引发侵袭性脑膜炎与败血症的关键病原体，流行范围广且病死率高，对公共卫生安全构成严重威胁。单克隆抗体(单抗)具备高特异性与高亲和力，在Nm感染的诊断、治疗及预防领域展现出巨大潜力。此文梳理了Nm的流行病学特性、病原学特征及分型依据，为单抗靶向研究提供理论基础；以靶点类型为核心，重点阐述了针对B群Nm菌体蛋白、ACWYX群多糖组分及机体补体系统的单抗研究进展，明确阻断免疫逃逸、多抗体协同补体激活的主流杀菌机制。基于现有的研究结论，保守表位识别、多抗原联用已被证实是实现广谱抗菌的关键策略。此文进一步分析菌株抗原多样性、抗体功能异质性等研究难点，总结当前单抗在Nm感染诊断、被动免疫及辅助治疗中的应用价值，并对人源化广谱抗体、多靶点联合制剂等发展方向进行展望，以期为Nm治疗性单抗的后续研发及临床转化提供参考。
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国际生物制品学杂志. 2026, 49(5): 375-384. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20251106-00081烧伤是严重的全球性健康问题，传统治疗方法存在皮肤来源受限、瘢痕形成及功能恢复不佳等局限。干细胞尤其是间充质干细胞，凭借强大的生长繁殖与多向分化潜能，以及旁分泌与免疫调节功能，已经成为推动烧伤创面再生性愈合的关键新型生物材料。然而，干细胞在动态的烧伤创面复杂环境中的低存活率与短滞留时间限制了治疗的疗效。水凝胶作为干细胞递送载体，可提供三维支撑、维持湿润环境、缓解氧化应激与炎症，为干细胞发挥功能构建保护性动态微环境。此文聚焦于干细胞治疗的核心修复机制，探讨不同来源干细胞在烧伤治疗研究方面的特性；并阐释了水凝胶系统如何通过增强干细胞存活、定植与功能持久性，协同促进血管生成、再上皮化及抑制纤维化的功能，最终实现烧伤的高质量创面修复与功能重建。未来研究应致力于优化干细胞来源与工程化策略，并开发与之精准匹配的智能化水凝胶载体，以加速临床转化。
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