2024年, 第47卷, 第2期 刊出日期：2024-04-10
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 63-66. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230327-00028目的 研究乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗冻干稳定剂中各组分（蔗糖乳糖溶液、尿素、人血白蛋白、明胶）对病毒滴定方法（噬斑法）的影响，进一步确定该方法的专属性。方法 采用噬斑法对不同浓度的乙脑疫苗稳定剂各组分分别进行滴定，考察各组分对BHK21细胞的影响。取3批乙脑疫苗原液与稳定剂各组分分别混合为实验组，与病毒稀释液混合为对照组，采用噬斑法检测实验组与对照组的病毒滴度并进行统计分析。结果 稳定剂中各组分对BHK21细胞无影响。将乙脑病毒完全中和后，细胞板上没有噬斑形成。实验组与对照组病毒滴度差异无统计学意义，t值分别为蔗糖乳糖溶液0.24，明胶-0.09，尿素-0.15，人血白蛋白-0.05，P值均大于0.05。结论 噬斑法检测乙脑病毒的专属性良好，可用于乙脑疫苗的病毒滴度检测。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 67-71. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230330-00029目的 评估风疹病毒BRDⅡ减毒株（BRDⅡ株）E1区在人二倍体细胞2BS株（2BS细胞）中的连续传代稳定性。方法 将BRDⅡ株28代病毒在2BS细胞中连续传10代分别获得第29—38代病毒，依据中国药典2020年版三部对不同代次病毒进行生物学特性检测，将28代病毒（主种子批）、31代病毒（工作种子批）以及38代病毒进行全基因测序后对其核苷酸序列进行分析比对。结果 BRDⅡ株28代病毒在2BS细胞中连续传10代，其细胞病变程度基本稳定。基因测序发现，结构蛋白E1区第8281nt位点共出现1个突变，为同义突变。结论 BRDⅡ株在2BS细胞中自28代连续传至38代，病毒蛋白主要功能区E1区的氨基酸序列高度保守，具有良好的传代稳定性。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 72-78. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230423-00033目的 制备1株抗黑猩猩腺病毒68型（chimpanzee adenovirus type 68，AdC68）六邻体（hexon，hex）蛋白重组单克隆抗体（单抗）。方法 表达并纯化AdC68-hex蛋白，免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA及细胞免疫染色法筛选得到1株分泌抗AdC68-hex蛋白单抗的杂交瘤细胞。抽提杂交瘤细胞RNA进行测序，获得单抗重链与轻链可变区序列，分别与小鼠重链与轻链恒定区序列拼接得到小鼠全长IgG1κ抗体重链与轻链，并构建至真核细胞高效表达质粒。将重链与轻链质粒共同转染至哺乳动物细胞表达并纯化得到抗AdC68-hex重组单抗。将抗体用于滴定AdC68、重组AdC68及AdC68重组疫苗，并开展方法学验证。结果 表达制备的AdC68-hex蛋白能有效诱导小鼠的病毒产生抗AdC68-hex抗体。抗AdC68-hex重组单抗用于重组AdC68滴定具备良好的专属性、耐用性，在4.56~9.57 lg感染单位/ml范围内具备良好的线性、准确度和精密度。结论 制备的重组抗AdC68-hex单抗适用于AdC68及AdC68重组疫苗载体相关的基因治疗药物及疫苗等的检测。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 79-84. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230516-00047目的 研究西林瓶和预灌封注射剂吸附破伤风疫苗在非临床阶段的安全性差异，为预灌封注射剂型临床使用的安全性提供参考。方法 对西林瓶和预灌封注射剂吸附破伤风疫苗分别进行体外溶血试验、主动全身过敏试验和肌肉刺激试验以评价其制剂安全性。取兔1只进行体外溶血试验，观察样品的溶血情况；取豚鼠36只进行主动全身过敏试验，观察豚鼠出现的全身反应及死亡情况；取兔16只进行肌肉刺激试验，观察注射局部的刺激反应，并进行组织病理学检查。 结果 2种吸附破伤风疫苗在体外溶血试验中，对兔红细胞皆有凝聚作用，未见溶血；主动全身过敏试验中，在0.1 ml和0.5 ml致敏剂量下均未见过敏反应；肌肉刺激试验中，单次注射0.5 ml后注射部位肌肉可见轻度刺激性，停药后可恢复，与疫苗中含有铝佐剂相关。 结论 西林瓶和预灌封注射剂吸附破伤风疫苗安全性均良好。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 85-89. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230426-00035目的 验证聚乙二醇修饰的干扰素（培干扰素）α1b原液中残留DNA检测的实时荧光定量PCR（quantitative PCR，qPCR）。方法 提取4批培干扰素α1b原液的残留DNA，使用qPCR检测试剂盒进行扩增反应，绘制标准曲线，建立残留DNA的qPCR检测方法，对建立的方法进行线性、重复性、准确性、精密度、定量限和耐用性的验证，并与探针杂交法进行比较。结果 qPCR检测在300 pg/μl~30 fg/μl浓度范围内线性关系良好。6次检测相对标准偏差为7.45%；加标回收率为95.67%~129.28%；不同人员检测相对标准偏差小于30%；定量限为30 fg/μl。不同孵育温度条件下检测结果无明显差异，耐用性良好。探针杂交法与qPCR的检测结果均小于中国药典2020年版规定的10 ng/剂。结论 qPCR检测培干扰素α1b原液中DNA残留具有良好的线性、重复性、准确性、精密度和耐用性，适用于该项检测。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 90-93. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230529-00051目的 探索一种简便、快捷、准确检测自动移液工作站移液性能的方法。方法 用校准后的移液器移取系列体积的重铬酸钾原液，配制成等体积不同浓度酶标检测稀释液，读取吸光度值，拟合原液体积-稀释液吸光度值回归方程。选取实验室最常用移液量50 μl作为测试点，用96通道自动移液工作站移取50 μl重铬酸钾原液配制稀释液，读取吸光度值，根据回归方程计算出各通道实际原液移取体积，对自动移液工作站的移液准确性、重复性和通道一致性进行分析。结果 原液体积与稀释液吸光度值成线性关系，相关系数为1.000。在50 μl量程点，96个通道的准确性均符合偏差不超出±3%的标准，7次重复性实验结果符合变异系数≤1.5%的标准，一致性符合不超出设定量×（100±5）%的标准。结论 建立的方法简便、快捷、准确，可用于实验室自动移液工作站移液性能的日常监测。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 94-98. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230607-00053目的 通过比较RJ300型和GE450型层析柱对人凝血因子Ⅷ（human coagulation factor Ⅷ，F Ⅷ）的纯化效果，探究GE450型层析柱纯化FⅧ的适用性。方法 分别采用2种层析柱各制备3批FⅧ制品，按照中国药典2020年版三部的要求对制品进行检测，比较2种层析柱制备的FⅧ原液的回收率、比活性、洗脱峰的峰形差异、杂蛋白去除效果以及成品的检定结果，并进行产品稳定性考察。 结果 RJ300型和GE450型层析柱纯化后的FⅧ原液回收率分别为(63.8±4.8)%和(61.0±4.3)%，相对标准偏差分别为7.5%和7.0%，原液比活性分别为(100.7±5.8) 和(114.0±12.2)国际单位（international unit, IU）/mg，2种层析柱洗脱峰的峰形差异无统计学意义（F=0.42，P＞0.05），2种层析柱均能有效去除杂蛋白，成品检定结果均合格，成品比活性分别为(38.6±5.5) IU/mg和(39.4±6.2) IU/mg。2种层析柱制备的FⅧ的稳定性研究结果均符合中国药典规定。结论 GE450型层析柱能实现较好的FⅧ纯化效果，成品安全有效、稳定性良好，适合商业规模化生产。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 99-103. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230701-00057目的 研究氨水法制备氢氧化铝佐剂时工艺中使用超滤替代透析工艺去除NH4+的可行性。 方法 取氨水法制备的氢氧化铝胶体溶液稀释并超滤至氨质量浓度低于0.04%，浓缩定量至起始体积；另取等体积氢氧化铝胶体溶液透析至氨含量质量浓度低于0.04%。超滤或透析后，收集氢氧化铝胶体溶液进行高压蒸汽灭菌。依据中国药典2020年版三部及《预防用含铝佐剂疫苗技术指导原则》对2种工艺制备的佐剂进行外观、pH、铝含量、吸附率、沉降率、等电点、粒径大小及分布、X-射线衍射等质量指标检测。结果 超滤工艺制备的3批佐剂pH为4.63±0.04、铝含量为（4.963±0.027）mg/ml、平均粒径为（123.2±7.3） nm、粒径分布为（40~500） nm、等电点为10.9±0.1、回收率为 91.4%±0.5%；透析工艺制备的3批佐剂pH为4.86±0.25、铝含量为（4.959±0.340） mg/ml、平均粒径为（120.6±6.2） nm、粒径分布为（40~500） nm、等电点为10.9±0.4、回收率为91.5%±2.5%。2种工艺制备的氢氧化铝佐剂质量指标差异无统计学意义(t值为﹣1.58~0.46，P值为0.251~0.918)。 结论 相较于透析工艺，采用超滤工艺制备的氢氧化铝佐剂所有质量指标未改变，且质量一致性更好。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 104-109. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230411-00032C-C 基序趋化因子受体 8（C-C motif chemokine receptor 8，CCR8）是一种调控免疫细胞趋化迁移的7次跨膜蛋白，在肿瘤微环境中高表达于Treg表面。由于CCR8+ Treg能强烈抑制肿瘤免疫，因此CCR8是一种扭转抑制型肿瘤微环境的理想靶点。目前有多种在研的靶向CCR8抗体药物，可在多种肿瘤模型中特异性清除肿瘤浸润CCR8+ Treg、扭转免疫抑制，展现出良好的抗肿瘤活性。此文对CCR8+ Treg促进肿瘤进展的基础研究和靶向药物应用进行综述，以期为该靶点肿瘤免疫治疗研究提供参考。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 110-116. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20230515-00046真皮和表皮具备独特的免疫特性，含有丰富的APC，如表皮朗格汉斯细胞和真皮树突状细胞。研究发现，由于皮内接种疫苗可显著提高细胞介导的免疫应答，特别是CD4+和CD8+ T细胞应答，因此皮内接种作为常规肌内接种的代替途径受到了持续关注。相比标准剂量的肌内接种途径，皮内接种可诱导相当的免疫应答，却只需要较少的疫苗剂量，尤其是在常规肌内接种后免疫应答较弱的特殊人群中。在疫苗的扩大范围接种时，皮内接种方式较肌内接种相对有优势。此文就皮内免疫相关研究成果，包括皮内免疫细胞的组成特征、皮内免疫机制以及皮内接种途径在病毒疫苗研究中的应用等进行了汇总分析，对包括流感疫苗、狂犬病疫苗和新型冠状病毒疫苗等的临床研究结果与实验设计进行总结，以期为疫苗的皮内给药研究提供参考。
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国际生物制品学杂志. 2024, 47(2): 117-123. https://doi.org/10.3760/cma.j.cn311962-20231016-00015手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是由多种肠道病毒感染引起的急性传染病，在全世界尤其是亚太地区多次暴发、持续流行，给儿童的生命健康带来了严重威胁。HFMD病原谱较广，且主要肠道病毒血清型病原谱不断发生变化，单价疫苗无法预防由不同血清型病毒感染引起的HFMD，多价疫苗是防控HFMD的主要手段。此文对HFMD病原学及多价疫苗的研发进展进行综述。
沪公网安备 31010502000696号