2018年, 第41卷, 第2期　刊出日期：2018-04-10

  

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论著
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  凝胶过滤层析纯化白喉类毒素工艺的优化

  何岩 张明华 邓海清 段霄 李硕航 杨朝晖 刘建凯 郑海发

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 53-57. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.001

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  目的  通过定制设计优化白喉类毒素（diphtheria toxoid，DT）层析纯化工艺。方法  将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose 4FF （4FF）和Sephacrayl S-300（S-300）凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计，将上样体积、样品浓度、洗脱流速、层析介质设为实验因子，将层析载量、纯度、收率设为响应值，建立数学模型，确定凝胶过滤层析的最优层析参数，并对实验结果进行工艺验证。结果  定制设计的实验结果显示，S-300凝胶过滤层析纯化的DT纯度和收率均高于4FF凝胶过滤层析。进一步分析确定，S-300凝胶过滤层析的最佳参数为：上样体积2.5%，样品浓度45 mg/ml，洗脱流速45 cm/h。当以最佳参数进行S-300凝胶过滤层析纯化时，层析工艺的验证结果符合预期。结论  S-300比4FF更适宜作为DT纯化工艺的凝胶层析介质。
  
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  大豆蛋白水解物促进MDCK细胞生长及流感病毒增殖的实验研究

  周琳婷 李贝贝 叶文佳

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 58-62,71. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.002

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  目的  研究大豆蛋白水解物对Madin-Darby犬肾（Madin-Darby canine kidney，MDCK）细胞生长和流感病毒增殖的促进作用。方法  比较MDCK细胞在10%进口胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）-Dulbecco改良Eagle培养基（Dulbecco’s modified Eagle’s medium，DMEM），10%国产新生牛血清（newborn calf serum，NCS）-DMEM和添加2、4、8 g/L大豆蛋白水解物SHEFF-VAX PLUS PF ACF（PF ACF）的10% 国产NCS -DMEM中的生长情况，以及甲型H7N9流感病毒接种细胞后的血凝素（hemagglutinin，HA）效价。结果  采用培养瓶静置培养时，5种培养体系中的细胞数在第3天达到最高，分别为（8.67±1.54）×106、（4.78±0.64）×106、（10.60±0.23）×106、（9.17±0.51）×106和（4.79±0.19）×106。采用搅拌瓶内微载体培养时，FBS-DMEM、NCS-DMEM和添加2、4 g/L PF ACF的NCS-DMEM中的细胞密度最高可达到（2.56±0.68）×106、（1.74±1.77）×106、（2.20±1.48）×106和（2.50±1.25）×106细胞/ml。流感病毒接种细胞后，FBS-DMEM、NCS-DMEM和添加4 g/L PF ACF的NCS-DMEM中测得的病毒HA效价分别为8.0、3.5和8.0 log2HAU/50 μl。结论  含国产NCS的培养基在添加4 g/L  PF ACF后，MDCK细胞密度和流感病毒产量与含进口FBS的培养基的培养结果相仿，因此，大豆蛋白水解物可作为培养基添加物应用于MDCK细胞培养和流感病毒增殖。
  
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  重组毕赤酵母中Textilinin-1基因拷贝数的荧光定量PCR法检测

  兰海英 李娜 石乔 康乐 陈宏超 徐梅

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 63-67. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.003

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   目的 利用荧光定量PCR法检测重组毕赤酵母外源纤溶酶抑制剂Textilinin-1基因的拷贝数。方法 采用双标准曲线法，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）基因为内源参照基因，分别利用含有GAPDH和Textilinin-1基因的质粒，进行荧光定量PCR反应，建立标准曲线。对重组毕赤酵母基因组进行荧光定量PCR反应，通过标准曲线计算出外源Textilinin-1基因在毕赤酵母基因组中的拷贝数。结果 GAPDH和Textilinin-1基因的扩增效率分别95.04%和96.36%，两条标准曲线的决定系数均为0.999，且均具有良好的重复性，共检测10个单菌落，均得到Textilinin-1基因拷贝数为2。结论 建立的方法能够鉴定重组毕赤酵母中Textilinin-1基因的拷贝数。
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  猪凝血因子ⅩⅢ的分离与纯化

  赵晶 郑登忠 黄宏宝 章丽丽 黄发灿

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 68-71. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.004

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   目的  探索以猪血为原料制备凝血因子ⅩⅢ的新方法。方法  采用硫酸铵分级沉淀法从猪血中粗提凝血因子ⅩⅢ，进一步用二乙氨乙基-Sepharose阴离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶层析进行纯化。结果  获得比活为204.4 IU/mg的高纯度凝血因子ⅩⅢ制剂，其收率为53.5%，纯化倍数21.7倍。结论  从猪血中提取的粗制品再经过离子交换层析和凝胶层析进行分离纯化可得到高纯度凝血因子ⅩⅢ。
综述
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  水痘减毒活疫苗病毒的单核苷酸多态性分析

  兰永发 朱为

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 72-76. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.005

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  水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus，VZV）是引起水痘和带状疱疹的主要病原体，Oka株水痘减毒活疫苗（V-Oka）能有效预防水痘发生。V-Oka株与Oka亲本株之间存在至少42个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）位点差异，部分位点与V-Oka株的减毒特性有关。目前已知有6个SNP位点为疫苗型位点，可用于区分V-Oka病毒与野生型病毒。近期研究发现某些SNP位点与疫苗相关皮疹有关。此文对水痘减毒活疫苗的重要SNP位点做一综述。
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  长非编码RNA在HCV致病过程中的作用研究进展

  李蕾 刘水平

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 77-80，90. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.006

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  HCV感染是肝细胞癌和其他肝病的主要病因之一。探索用于慢性丙型肝炎高危人群早期诊断的标志物及HCV相关预防和治疗的靶标分子，具有重要的意义。近年来，已发现大量与HCV感染相关的长非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA），它们可能与HCV相关肝细胞癌的发病机制有密切关系。研究这些lncRNAs的结构和作用机制，将促进HCV相关疾病的早期诊断和防治。此文对近年HCV感染过程以及宿主抗病毒应答相关lncRNA的研究进展做一综述。
  
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  T细胞受体多态性与自身免疫病相关研究进展

  贾西 张进安

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 81-85. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.007

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  T细胞受体（T cell receptor，TCR）是T细胞识别抗原和诱导免疫应答的基础。在自身免疫病状态下，T细胞根据疾病特异性抗原可产生相应的特异性TCR库的克隆扩增。通过高通量分子测序技术检测TCR序列，找出疾病状态下和健康人中TCR库的差异，可进一步探索疾病的发病机制，并为进一步通过诱导免疫耐受干预疾病的发生发展提供了可能。此文概述了近5年来TCR测序和自身免疫病之间的原始研究，并对相关研究进展进行了总结。
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  人抗凝血酶Ⅲ的临床应用研究

  郭玉婷 付艳丽 孔涛 梁凌宇 蒋琳

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 86-90. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.008

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  抗凝血酶Ⅲ（antithrombin Ⅲ，AT-Ⅲ）是人血浆中的一种多功能丝氨酸蛋白酶抑制蛋白，也是血液中的重要抗凝血因子，在生理性凝血机制中起重要作用。先天性或获得性AT-Ⅲ缺乏可导致血栓发生。临床上主要应用AT-Ⅲ 浓缩制剂防治血栓栓塞性疾病。此文就AT-Ⅲ在人体中的主要功能以及在临床治疗中的作用做简要综述。
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  α1抗胰蛋白酶缺乏症及其治疗

  任沁 周旭

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 91-94. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.009

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  α1抗胰蛋白酶（α1- antitrypsin，AAT）是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，其缺乏所致的AAT缺乏症（AAT deficiency, AATD）可引起肺部和肝脏疾病。目前治疗AATD相关的肺部疾病的常用方法是静脉注射人血AAT制剂，一些治疗AATD的新方法也在不断开发。此文就AATD的治疗研究做一综述。
  
  
短篇论著
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  带状疱疹减毒活疫苗渗透压摩尔浓度限定标准的建立

  王磊 王舰兵 杨晓叶 黄鹏 崔云龙 沈红杰 梁慧颖

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 95-96. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.010

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标准与指南
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  WHO 关于白喉疫苗的意见书

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 97-100. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.011

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  此意见书取代2006年WHO关于白喉疫苗的意见书，介绍了白喉疫苗的特性、免疫原性、效果、安全性、保护作用持续时间、同时接种和WHO对白喉疫苗接种及与其他疫苗同时接种的意见。
国际会议介绍
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  第15届癌症免疫治疗协会年会报告

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 101-103. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2018.02.012

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  第15届癌症免疫治疗（CIMT）协会年会于2017年5月10—11日在德国美因茨举行，来自世界各地的科学家和CIMT协会会员出席会议，对癌症免疫治疗的过去、现状和未来进行了介绍和探讨。此文概述了癌症治疗部分领域的研究状况。
  
Cochrane 评价
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  表皮生长因子受体抑制剂治疗转移性结直肠癌

  国际生物制品学杂志. 2018, 41(2): 103-103.

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