2016年, 第39卷, 第1期　刊出日期：2016-02-10

  

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论著
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  特异性结合白色念珠菌(1,3)-β-D-葡聚糖单链DNA适配子的筛选及其应用

  唐晓磊 华影 袁纯辉

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 1-7. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.01.001

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  目的  通过指数富集的配基系统进化技术（systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX）筛选能与高亲和力(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的适配子，并用该适配子建立双适配子夹心酶联寡聚核苷酸吸附试验（enzyme-linked oligonucleotide assay，ELONA）来对深部真菌感染血浆进行辅助诊断。方法  提取白色念珠菌ATCC10231株细胞壁(1,3)-β-D-葡聚糖，通过SELEX筛选获得能与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的高亲和力单链DNA适配子，并用该适配子建立双适配子夹心ELONA来检测深部真菌感染血浆中的(1,3)-β-D-葡聚糖。结果  从白色念珠菌细胞壁中成功提取了高聚合度(1,3)-β-D-葡聚糖，并通过体外酶解获得可溶性低聚合度(1,3)-β-D-葡聚糖作为筛选靶标。通过SELEX进行12轮筛选后，从初始单链DNA文库中获得2个高亲和力适配子AU1和AD1，检测发现这2个适配子并非结合于(1,3)-β-D-葡聚糖的同一表位。双适配子夹心ELONA法检测深部真菌感染血浆中的(1,3)-β-D-葡聚糖的特异性和灵敏度分别为91.94%和92.31%。结论  从初始单链DNA文库中成功获得可与(1,3)-β-D-葡聚糖特异结合的高亲和力适配子，为深部真菌感染新型诊断试剂的研发奠定了基础。
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  检测破伤风类毒素的酶联免疫吸附法的建立及应用

  王玲 王珣 韩俊杰 张建玲 杨云凯 张娜 佟芳 潘殊男 张霖阳

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 8-11. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn:1673-4211.2016.01.002

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  目的  建立定量检测白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产过程中破伤风类毒素（tetanus toxoid，TT）的方法。方法  TT免疫家兔以制备高效价血清抗TT抗体。辛酸-硫酸铵沉淀法纯化抗TT多克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记，建立双抗体夹心ELISA法。结果  建立的ELISA法与丝状血凝素、百日咳毒素及白喉类毒素无交叉反应，特异性较好。该ELISA法在0.5~16.00 Lf/L TT测量区间有最佳线性，决定系数＞0.99。实验内和实验间检测14.0、12.0、6.0、3.0和1.5 Lf/L TT，变异系数为4.7%~9.8%，回收率为92.7%~109.0%，精密度和准确度均符合常规质控要求。该法的定量下限为1.5 Lf/L TT。结论  建立的ELISA法可有效检测破伤风疫苗纯化过程中的TT含量，为破伤风疫苗质量控制奠定了基础。
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  1株甲基杆菌的鉴定

  曹璟 黄思佳 郭蓉 刘鹏 金文平 胡业勤 薛红刚

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 12-14. https://doi.org/10.3760/cam.j.issn.1673-4211.2016.01.003

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  目的  鉴定1株在生物制品生产车间采集的菌株wh01的种属。方法   观察该菌株的形态，并用细菌鉴定仪进行检定。采用PCR法扩增菌株的16S rDNA和甲醇脱氢酶大亚基的mxaF基因，用生物信息学软件进行分析。结果  该菌株经细菌鉴定仪检定为沙门菌属，但其形态与沙门菌有很大差别，16S rDNA和mxaF 基因序列与甲基杆菌属序列的相似性高达99%。结论  该菌株属于甲基杆菌属。
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  CXCL5基因敲除小鼠的繁殖、基因型鉴定及与野生型小鼠的比较

  宋杰 胡雅洁 胡云光 李嘉祺 王艳翠 刘龙丁

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 15-19. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.01.004

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  目的  繁殖和鉴定CXC 趋化因子配体5（CXC chemokine ligand 5， CXCL5） 基因敲除小鼠，以获得CXCL5^-/-纯合子小鼠并与野生型小鼠进行比较。方法  将CXCL5^+/-杂合子小鼠繁殖后，剪取子代小鼠耳组织，提取基因组DNA，用 PCR法鉴定子代小鼠的基因型。采用独立样本t检验比较同周龄同性别CXCL5基因敲除纯合子小鼠与野生型小鼠的体重和结直肠长度，并通过苏木素-伊红染色观察两种基因型小鼠的结肠形态结构。结果  经繁殖，共获得60只CXCL5^-/-纯合子小鼠和55只野生型小鼠。4、6、8、10周龄雌性CXCL5^-/-小鼠的体重分别为（10.08±0.78）、（14.55±0.92）、（18.01±0.68）和（19.75±1.23）g，明显轻于同龄雌性野生型小鼠〔（11.43±0.85）、（18.42±0.76）、（20.42±1.63）和（21.27±1.66）g〕（t 值分别为-2.622、-7.253、-3.042、-1.644，P值均<0.05）；6、8周龄雄性CXCL5^-/-小鼠的体重分别为（17.46±0.74）和（20.62±1.62）g，也明显轻于同龄雄性野生型小鼠〔（20.47±1.66）和（23.33±1.67）g〕（t值分别为-3.688、-2.885，P值均<0.05）。6周龄雌性CXCL5^-/-小鼠的结直肠长度为（6.86±0.17) cm，与同龄雌性野生型小鼠（7.66±0.11）cm的长度相比，明显较短（t =-8.835，P<0.05），但结肠的形态结构无明显改变。结论  成功获得了CXCL5基因敲除纯合子小鼠，为深入研究CXCL5 的生物学功能奠定了基础。
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  山东和广西地区献浆者的血浆白蛋白和IgG相对含量的初步分析

  冯卫国 杨列清 范加金 杨虎虎

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 20-25. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.01.005

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   目的  分析山东和广西地区献浆者的血浆白蛋白和IgG含量的差异，以提高血浆利用率。方法   将3 600份血浆样品按地区、性别、年龄段（18~29、30~40和41~55岁）进行分组，每组100份样品。用AU5400型全自动生化分析仪检测血浆总蛋白、白蛋白和IgG含量，并用单因素方差分析对检测结果进行统计分析。结果  单因素方差分析显示，山东省与广西省献浆者间的白蛋白/IgG比值差异具有显著的统计学意义：18~29、30~40和41~55岁男性献浆者F值分别为138.994、186.262和139.056，P值均为0.000；18~29、30~40和41~55岁女性献浆者F值分别为209.670、174.120和155.081，P值均为0.000。山东与广西地区献浆者间的IgG含量差异具有显著的统计学意义：18~29、30~40和41~55岁男性献浆者F值分别为146.756、186.262和195.263，P值均为0.000；18~29、30~40和41~55岁女性献浆者F值分别为186.133、190.365和206.300，P值均为0.000。结论  山东和广西地区献浆者的血浆白蛋白和IgG含量存在差异。
综述
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  结核病疫苗研发面临的挑战

  程飞 楼觉人

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 26-32. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.01.006

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   结核病（tuberculosis，TB）是由结核杆菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）引起的传染病，每年有近1 000万例TB新发病例，150万人死于TB。卡介苗是唯一能够为婴幼儿提供保护作用的疫苗，但它却不能预防成年人TB以及控制TB流行。随着耐多药TB的播散和Mtb/HIV双重感染人数的不断上升，在世界范围内控制TB的形势变得愈发严峻。新疫苗的研发是TB防治的重要内容之一，目前全世界已有至少15种TB候选疫苗进入临床试验。此外，适宜的动物模型也将对新型疫苗研发以及宿主抗TB免疫机制研究起重要作用。
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  疫苗纳米粒技术及其在流感疫苗研发中的应用

  陈锦城 罗剑 毛树宝 周锋 许文婷 陈则

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 33-37. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.01.007

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   随着纳米科技的发展，纳米粒技术也被运用于疫苗的开发，在增强疫苗的免疫原性、促进APC对抗原的识别、延缓抗原在体内的降解、延长抗原在体内作用的时间等方面具有重要作用。此文就疫苗纳米粒技术及其在流感疫苗开发中的应用进行综述。
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  IFN-λ及其抗病毒作用机制

  陈薇 赵俊 王明丽

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 38-43. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.01.008

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  最近发现的Ⅲ型IFN家族由IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ3（也称作IL-29、IL-28A、IL-28B）和IFN-λ4组成。IFN-λ通过结合IFN-λR1和IL-10R2组成的异二聚体受体复合物，激活Janus激酶-信号转导及转录活化因子信号通路，诱导IFN刺激基因的表达并发挥生物学作用。近年来，对IFN-λ抗病毒作用的研究十分广泛，IFN-λ与HCV感染引起的免疫应答密切相关。IL-28B的单核苷酸多态性和新发现的IFN-λ4与HCV的自发清除也有关，预示IFN-λ在HCV感染治疗中具有潜在作用。此文介绍了IFN-λ的抗病毒作用机制及其在HCV感染临床治疗中的研究进展。
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  胰高血糖素样肽1受体激动剂在2型糖尿病治疗中的研究进展

  秦荣浦 杨宇峰 楼觉人

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 44-48. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2016.01.009

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   胰高血糖素样肽1受体激动剂（glucagon-like peptide-1 receptor agonist，GLP-1RA）是近年来2型糖尿病药物开发领域的研究热点。作为一种降血糖药物，GLP-1RA在增强患者血糖调控能力的同时，还能降低患者低血糖风险，减轻体重，保护心血管系统。此文对已上市和部分正处于临床试验阶段的GLP-1RA的疗效及安全性做一综述，并对GLP-1RA药物的发展趋势进行探讨。
Cochrane 评价
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  肿瘤坏死因子α抑制剂治疗强直性脊柱炎

  国际生物制品学杂志. 2016, 39(1): 49-49.

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