2009年, 第32卷, 第2期　刊出日期：2009-04-10

  

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论著
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  H9N2禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶DNA疫苗对小鼠的免疫保护研究

  方芳 邱美珍 常海艳 李小曼 杨忠东 陈则

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 57-63. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.001

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  目的    检测H9N2禽流感病毒血凝素（hemagglutinin, HA）和神经氨酸酶（neuraminidase, NA）DNA疫苗保护小鼠抵抗致死量同源病毒感染的能力。方法  通过小鼠肺对肺传代，建立禽流感病毒A/chicken/Jiangsu/07/2002(H9N2) 小鼠适应株。同时，构建病毒HA和NA DNA疫苗，以不同剂量电击法免疫小鼠1或2次，在初次免疫后4周或加强免疫后1周用致死量（40 LD50）鼠适应型病毒攻击小鼠。通过测定小鼠血清抗体滴度、小鼠存活率和肺部病毒滴度来评价疫苗的效果。 结果  HA 或NA DNA 10 μg免疫1次或3 μg免疫2次均可保护小鼠抵抗致死量H9N2病毒的感染。 结论  低剂量HA或NA DNA可为抗H9N2禽病毒感染提供有效的免疫保护。
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  重组人乳头瘤病毒16型L1蛋白在昆虫细胞中的表达及条件优化研究

  孙丽媛 刘君 张夕燕 丁军颖 张振龙 许雪梅

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 64-67. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.002

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  目的  利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达人乳头瘤病毒16型（human papillomavirus 16, HPV16）L1蛋白，并确定含编码HPV16 L1基因杆状病毒的扩增及其相应目的蛋白表达的最佳条件。方法  在不同感染复数（MOI）、不同时间条件下扩增病毒，以蚀斑试验检测病毒滴度，研究获得最高滴度病毒的最适条件；通过对相应蛋白进行表达条件的优化，以蛋白印迹法比较蛋白表达量，确定目的蛋白表达的最佳条件。结果  确定了扩增含编码HPV16 L1基因杆状病毒及表达相应蛋白的最佳条件，即在sf9细胞系中，以MOI值为0.10接种病毒，扩增48 h收获病毒；以细胞密度为2×106~3×106/ml, MOI值为10.0接种病毒，悬浮表达72 h收获目的蛋白。蛋白印迹法检测结果证实，表达的目的条带可与HPV16 L1蛋白的单克隆抗体发生反应。结论  建立了在昆虫细胞中表达HPV16 L1蛋白的最适条件，为下一步的纯化及免疫原性研究奠定了基础。
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  含编码人乳头瘤病毒18型L1基因的杆状病毒扩增及相应蛋白表达的条件优化

  丁军颖 张振龙 孙丽媛 刘君 张夕燕 于世荣 许雪梅

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 68-70. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.003

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  目的 确定以昆虫细胞sf9扩增含编码人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）18型L1(HPV18 L1)基因的杆状病毒以及相应蛋白表达的最佳条件。方法 以对数生长期的sf9细胞在不同感染复数（MOI）和不同时间条件下扩增病毒，以蚀斑试验检测病毒滴度，选择获得最高滴度病毒的最佳条件；再以sf9细胞在不同细胞密度、不同MOI值和不同时间条件下表达相应蛋白，以蛋白印迹法鉴定并比较不同条件下的蛋白表达量，选择获得最大量目的蛋白的最佳条件。结果 对数生长期的sf9细胞在MOI值为0.50扩增时间为48 h时，所扩增的病毒滴度最高，可达3×108 pfu/ml；在细胞密度为3×106/ml、MOI值为2.0、表达时间为72 h时，所表达的蛋白量最大，约5 mg/L。结论 确定了含编码HPV18 L1基因的杆状病毒扩增及相应蛋白表达的最佳条件。
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  Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的研制

  刘莉莉 陆敏依 刘照平 赵立哲 陈列胜

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 71-74. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.004

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  目的  以Vero细胞为基质，研制安全有效的乙型脑炎灭活疫苗。方法  将经Vero细胞适应的乙型脑炎病毒P3株接种Vero细胞，培养后收获病毒液。采用β-丙内酯灭活，通过超滤浓缩、硫酸鱼精蛋白沉淀、蔗糖密度梯度离心等方法纯化病毒，最终配制成预防乙型脑炎病毒感染的疫苗。通过临床试验考察疫苗的安全性及免疫原性。结果  该疫苗的主要考核指标，如病毒滴度、总蛋白含量、Vero细胞DNA残留量、效价等均符合国家标准。临床观察结果显示，接种本疫苗后局部及全身反应轻微；各年龄组乙型脑炎病毒中和抗体阳转率均＞90%。结论  采用本法制备的疫苗安全有效。
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  2型肺炎链球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及免疫原性研究

  张明华 刘学龙 郑海发 任涛 唐秀丽 韩菲 胡鹏 张美香 曹欣 郝倩 魏文进

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 75-78. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.005

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  目的  制备2型肺炎链球菌多糖(Streptococcus pneumoniae type 2 polysaccharide，SPNPS2)-破伤风类毒素(tetanus toxoid，TT)结合疫苗(SPNPS2-TT)，并研究其免疫原性。 方法  采用溴化氰(CNBr)活化SPNPS2，己二酰肼(ADH)作连接剂，碳二亚胺(EDAC)为耦联剂，将活化的SPNPS2与TT耦联制SPNPS2-TT。以SPNPS2-TT或单纯SPNPS2免疫Balb/c小鼠，用ELISA检测小鼠血清抗SPNPS2 IgG水平。 结果  SPNPS2-TT的各项指标均达到质控标准。SPNPS2-TT免疫小鼠产生的特异性抗SPNPS2 IgG水平显著高于单纯SPNPS2免疫小鼠，且SPNPS2-TT诱生了免疫记忆应答。 结论  采用此项技术制备SPNPS2-TT疫苗是可行的。
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  人群口服霍乱rBS/WC疫苗的安全性及免疫效果评价

  陈恩富 吕华坤 张鑫培 章兴祥 贾杰 韦余东 余昭 秦淑文 莫顺堂

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 79-82. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.006

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  目的  进一步观察自然人群口服重组霍乱毒素B亚单位/灭活霍乱弧菌全菌体疫苗的安全性和免疫学效果，为制定霍乱免疫预防策略提供依据。方法  采用随机、双盲、对照试验，随访观察每次服苗后3 d内以及全程服苗后1、2、3月的不良反应，按比例随机抽取试验组和对照组受试者采血，用酶联免疫法检测抗霍乱毒素抗体，采用SPSS软件对数据进行相关分析。结果  每次服苗后3 d内试验组的总不良反应率为1.16%，主要是轻微胃肠道反应；试验组抗霍乱毒素抗体，全程接种后1～6月维持较高的阳性率，全程接种后12月有所降低。结论  口服霍乱疫苗具有良好的安全性和短期效果，可用于流行区的霍乱免疫预防。
综述
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  人乳头瘤病毒疫苗研究进展

  孟胜利 严家新

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 83-86. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.007

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  2006年6月美国FDA批准了第一个用于预防宫颈癌的疫苗，即可以预防人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）6、11、16和18型感染的4价疫苗，70%的宫颈癌和90%的生殖器疣由这些型别引起。还有一种可以预防HPV 16 和18型的二价HPV疫苗也已上市。此文主要就治疗性和预防性HPV疫苗的发展情况做一综述。
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  抗体人源化技术研究进展

  凌媛 许丽锋 徐静

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 87-91. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.008

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   人源化单克隆抗体已日益广泛地应用于治疗以肿瘤为主的多种疾病。重组DNA技术使鼠源抗体的人源化改造得以实现。此文对抗体人源化技术的发展及面临的问题进行综述。
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  Th17细胞在自身免疫性疾病中的研究进展

  刘琳 张进安

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 92-96. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.009

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  经典的Th1和Th2模式为人们理解CD4+T细胞的生物学特性以及固有免疫和适应性免疫提供了基本框架。近来，新发现的Th17细胞以优先产生IL-17、IL-17F和IL-22等细胞因子为特征，它不仅参与宿主防御免疫而且在自身免疫方面起重要作用。这种新的效应T细胞的发现改变了传统的对宿主免疫防御、免疫调节和免疫致病的理解。本文就Th17细胞在自身免疫性疾病中的研究进展作一综述。
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  特异性转移因子的研究现状和临床应用

  周建伟 罗军敏

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 97-100. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673.4211.2009.02.010

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   特异性转移因子是一种具有免疫调节功能的生物制剂，既可以增强机体特异性、非特异性免疫应答，提高免疫系统清除异物的能力，也可以降低机体免疫应答的强度，减轻由于超敏反应而造成的组织病理损伤，对于多种疾病的免疫治疗有较好的应用前景。此文就其研究现状和临床应用作一综述。
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  美国应用核酸检测筛查血液的历程和现状

  白玉 常卫红

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 101-105. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.011

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  输血相关传染病的预防和控制已经成为全社会关注的焦点问题，而新的检测技术（如核酸检测）的引入是进一步提高血液安全的重要措施之一。此文综述了美国应用核酸检测筛查血液的历程和现状，以期对我国血液筛查策略的改进提供参考。
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  α₁-抗胰蛋白酶的检测方法浅析

  王彩霞 朱建思 周见远

  国际生物制品学杂志. 2009, 32(2): 106-108. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2009.02.012

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  α₁-抗胰蛋白酶（α₁-antitrypsin，α₁-AT）与肺气肿等多种疾病密切相关，其血清水平的升高或降低直接影响疾病的发生发展。近年来，对α₁- AT分子结构、基因型、
  检测方法等各方面的研究都取得了很大进展，此文对其检测方法做一综述，为更好地检测α₁-AT的血清水平提供理论支持。