从原核生物的适应性免疫机制衍生出的成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白（clustered regularly interspaced short palindromic repeat and associated protein，CRISPR-Cas）系统，以其特异性高、可开发性强、简单高效等特点迅速从众多具有竞争力的基因编辑技术中脱颖而出，既为体内基因编辑技术带来革命性突破，也在体外诊断领域开拓了新的方向。近年来涌现出许多快速、便携、经济、高效的基于CRISPR-Cas系统的体外诊断技术，这些技术在病原体检测方面展示出良好的性能，在肿瘤基因诊断、遗传病筛查、移植排斥反应检测等方面也具有很大潜力。此文仅就CRISPR-Cas系统的作用原理、基于CRISPR-Cas系统的检测方法以及在病原体核酸检测领域的应用进展进行简述。

病毒检测在病毒感染的预防、诊断、治疗及病毒性疫苗的质量控制等方面发挥着重要的作用。实时荧光定量PCR通过荧光信号实时检测目的基因扩增数量，是目前实验室最常用的的病毒检测技术，具有灵敏度高、检测快速、污染小等优点。此文对实时荧光定量PCR技术在病毒感染的快速诊断、病毒核酸定量检测和病毒型别的鉴定三个方面的应用进行阐述。

病毒类生物制品包括病毒性疫苗以及用于基因治疗和肿瘤治疗的各种病毒载体药物，其研发和生产过程需要建立准确而快速的检测方法，用于评价工艺效果。滴度的测定是检测病毒类生物制品活  性和效力的直接数据佐证，也是评价生物制品质量的关键指标之一。本文主要对噬斑法、半数感染剂量测定法、荧光定量PCR技术、病变灶免疫化学法、报告基因法等病毒滴度检测方法的原理、特点及研究进展进行综述。

 目的  采用40层细胞工厂(40-layer cell factory, CF40)工艺培养原代地鼠肾(primary hamster kidney, PHK)细胞，优化乙脑减毒活疫苗的生产工艺。 方法  用不同浓度新生牛血清培养不同接种密度PHK细胞，比较各组PHK细胞数量，确定CF40工艺的PHK细胞接种密度和新生牛血清浓度。通过对比CF40和15 L转瓶采用不同新生牛血清的PHK细胞培养情况，比较两种工艺对新生牛血清的选择性。对4个厂家CF40培养的PHK细胞数量进行单因素方差分析，判定对CF40的选择性。结果  CF40工艺的最有条件为PHK细胞接种密度为6.1×10⁵ ml^-1、新生牛血清浓度6%。CF40工艺对新生牛血清的选择性较低，能比转瓶工艺更稳定地培养更多的PHK细胞。4个厂家CF40培养的PHK细胞数量之间的差异无统计学意义（F=0.23，P＞0.05），对CF40选择性低。 结论  采用CF40可以制备出满足乙脑减毒活疫苗生产要求的PHK细胞。

目的 优化层析-比色法，并对该方法进行分析方法验证；比较优化层析-比色法和层析-积分法，评价两方法测定伤寒Vi精制多糖分子大小的适用性。方法 优化比色法O-乙酰基标准曲线浓度范围，对该方法进行准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性的验证；应用优化层析-比色法和层析-积分法检测多批次伤寒Vi精制多糖分子大小，对结果进行统计学分析。结果 优化层析-比色法准确度回收率均为100%；样品的重复性相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）分别为2.4%和0.0%，中间精密度RSD均为3.4%，连续5次测定标准曲线，决定系数均大于0.999 0，耐用性RSD为4.6%。优化层析-比色法和层析-积分法在检测伤寒Vi精制多糖分子大小时，差异无统计学意义（t=-1.372，P＞0.05）。结论  优化的比色法具有良好的准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性，两种方法均可用于检测伤寒Vi精制多糖分子大小。

作为抗体的一种新型替代品，亲和体不仅以高亲和力与靶蛋白特异性结合，同时又具备相对分子质量小（~6 500）、穿透性强、免疫原性弱和制备过程简单等诸多特性。因此，亲和体在肿瘤靶向治疗、体内成像诊断和生物技术应用等方面具更突出的优势和可行性。此文对其特性和应用研究进展做一综述。

目的 探讨RiboGreen法检测mRNA疫苗中mRNA含量可能的影响因素。方法 在不同裂解液浓度、裂解时间、样品稀释浓度和参比品条件下，使用RiboGreen荧光染料法对不同生产工艺的mRNA疫苗的mRNA含量进行检测。结果 在裂解液为0.1%〜2.5% Triton X-100、裂解5〜30 min、样品稀释至mRNA含量0.5〜1.5 μg/ml时，mRNA含量检测结果的差异无统计学意义；不同参比品序列下样品mRNA含量检测结果差异有统计学意义。结论 根据检测样品的mRNA含量的回收率，初步确定了mRNA疫苗中mRNA含量检测的最适条件。